本文關(guān)鍵詞：葡萄糖水平對CEES染毒16HBE細(xì)胞能量代謝的影響及其機(jī)制

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【摘要】：目的比較在高糖和低糖培養(yǎng)條件下,經(jīng)半硫芥(CEES)染毒后支氣管上皮細(xì)胞(16HBE)能量代謝的變化。方法采用高糖(4.5 mg/ml)和低糖(1.1 mg/ml)兩種不同培養(yǎng)基培養(yǎng)16HBE細(xì)胞。MTS法比較細(xì)胞增殖和CEES染毒后6 h細(xì)胞活性差異;用不同劑量CEES染毒兩組細(xì)胞,24 h后HPLC檢測胞內(nèi)ATP、ADP、AMP含量,并計算ATP/ADP比值、腺苷酸池(總腺嘌呤核苷酸,total adenine nucleotides,TAN)及能荷值(能量負(fù)荷值,energy charge,EC),Western印跡檢測線粒體能量代謝功能酶COX-10和ISCU變化;流式細(xì)胞儀檢測0.5 mmol/L CEES染毒后5、8、12、24 h時相點線粒體膜電位(MMP)變化。結(jié)果低糖培養(yǎng)的16HBE細(xì)胞的增殖明顯增加,能量代謝指標(biāo)ADP、TAN、COX-10和ISCU顯著高于高糖組。高于0.5 mmol/L染毒劑量的CEES能顯著降低高糖、低糖培養(yǎng)的16HBE細(xì)胞的活性,且在1.0 mmol/L下兩組間差異有顯著意義。高糖組在0.5、1.0 mmol/L染毒24 h后,ATP、ADP、TAN顯著增高,而ATP/ADP比值及EC顯著降低。低糖組在1.0 mmol/L染毒24 h后,ADP、AMP、TAN顯著低于染毒前,而ATP/ADP比值及EC顯著高于染毒前。在0.5 mmol/L CEES染毒下,高糖組線粒體膜電位在8~12h顯著增加,其后至24 h時恢復(fù)至正常水平。低糖組MMP在5 h有一過性顯著降低,8 h后與染毒前已無顯著差異。高糖培養(yǎng)時,16HBE細(xì)胞的氧化磷酸化相關(guān)蛋白COX-10和ISCU蛋白水平顯著低于低糖培養(yǎng)的細(xì)胞;0.5~1.0 mmol/L CEES染毒24 h后,兩者的水平顯著升高,與低糖組已無顯著差異。1.0 mmol/L CEES染毒24 h后,低糖組COX-10和ISCU水平顯著降低。結(jié)論糖濃度差異會影響16HBE細(xì)胞的能量代謝、增殖和CEES損傷后能量應(yīng)激反應(yīng)。高糖可能通過增加細(xì)胞的應(yīng)激反應(yīng)能力抵抗CEES的細(xì)胞毒性作用。
【作者單位】： 第三軍醫(yī)大學(xué)軍事預(yù)防醫(yī)學(xué)院毒理學(xué)研究所;
【關(guān)鍵詞】： 葡萄糖 半硫芥 能量代謝 線粒體
【基金】：全軍醫(yī)學(xué)科技“十二五”重大項目(AWS11C004) 軍隊科技重大專項資助項目(2011ZXJ09102C)
【分類號】：R827.1
【正文快照】： 芥子氣是一種軍用毒劑,可造成皮膚黏膜糜爛,對生物分子(DNA、蛋白)和細(xì)胞活動(能量代謝)等造成損傷。芥子氣可通過吸入和液滴污染等途徑進(jìn)入機(jī)體產(chǎn)生毒性作用,肺是其靶器官之一。肺部染毒可引起急性損傷,表現(xiàn)如氣道炎癥、黏膜上皮變性壞死、氣管支氣管狹窄等。遠(yuǎn)期效應(yīng)包括慢

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