發(fā)布時間：2017-06-21 08:02

  本文關鍵詞：共載阿霉素和EGFR siRNA的PLGA腦靶向納米粒的制備及抗神經膠質瘤作用研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：藥物的聯(lián)合治療是腫瘤治療的新策略之一。阿霉素是一種傳統(tǒng)的腫瘤化療藥物，但同時也是P-糖蛋白（P-gp）的底物，由于腦毛細血管內皮細胞表面也存在P-gp，非常不利于阿霉素穿過血腦屏障治療腦腫瘤�；蛑委熓且环N比較有希望的治療手段。腦癌,肺癌，乳腺癌，頭頸癌，肝癌等都過度表達表皮生長因子受體(Epidermal growth factor receptor, EGFR)。腫瘤EGFR的表達水平與腫瘤的等級程度，不良的預后和對放療化療的抗性等都有著密切的關系。本課題構建了一種共載阿霉素和EGFR siRNA的靶向納米粒遞送系統(tǒng)，以期能夠更好的治療神經膠質瘤。課題的主要內容如下： 1. ANG-CHI的合成與表征。通過3-馬來酰亞胺丙酸-N-羥基琥珀酸亞胺酯（Pr-NHS-Mal），將靶向基團（angiopep-2）接載于殼聚糖上。采用傅里葉紅外光譜（FT-IR）、核磁共振（NMR）和BCA蛋白測定法分別對聚合物上的angiopep-2進行定性和定量表征，結果證實，angiopep-2成功接載于殼聚糖上。 2. ANG/PLGA/DOX/siRNA靶向載藥系統(tǒng)的構建。通過單因素考察，確定納米粒制備處方，制備了ANG/PLGA/DOX納米粒載藥系統(tǒng)，并利用投射電鏡（TEM），納米粒度和電位測定儀、紫外可見分光光度計對納米粒的形態(tài)、粒徑、電位、載藥量、包封率、體外釋放特征進行了表征。然后將其與荷負電荷的EGFRsiRNA孵育，得到ANG/PLGA/DOX/siRNA靶向載藥系統(tǒng)，瓊脂糖凝膠電泳顯示EGFR siRNA能夠很好的荷載于納米粒上。 3. ANG/PLGA/DOX/siRNA靶向載藥系統(tǒng)對人腦星形膠質母細胞瘤U87MG細胞的抗腫瘤活性。使用苯磺羅丹明B（SRB）法考察了空白載體以及各種載藥系統(tǒng)對U87MG細胞存活率的影響；使用激光共聚焦顯微鏡和流式細胞儀考察了載藥系統(tǒng)被U87細胞攝取情況，通過流式細胞儀分析載藥系統(tǒng)對細胞周期和細胞凋亡的影響。結果顯示，共載系統(tǒng)比單獨載藥系統(tǒng)的抗腫瘤活性更為顯著，作用4h后阿霉素和siRNA能夠有效的被U87MG細胞同時攝取，引起細胞凋亡。 4. ANG/PLGA/DOX載藥系統(tǒng)小鼠體內藥物動力學和組織分布研究以及載藥系統(tǒng)透過血腦屏障能力研究。體內藥物動力學和組織分布研究顯示，載藥系統(tǒng)能夠提高阿霉素的藥時曲線下面積（AUC），能夠有效的遞送藥物進入腦部。 本研究主要是制備了一種共載阿霉素和EGFR siRNA的靶向納米粒遞送系統(tǒng)，并通過一系列實驗指標考察了制劑的特征以及體外抗腫瘤活性，最后考察了載藥系統(tǒng)的藥物動力學和組織分布特征，，證實了該系統(tǒng)能夠遞送阿霉素進入腦部，對神經膠質瘤治療具有一定應用價值。
【關鍵詞】：聚丙交酯-乙交酯共聚物 angiopep-2 siRNA 神經膠質瘤 納米粒
【學位授予單位】：鄭州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R943
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-15
• 縮略詞表15-17
• 第1章 緒論17-30
• 1.1 神經膠質瘤和血腦屏障17-18
• 1.1.1 神經膠質瘤17
• 1.1.2 血腦屏障簡介17-18
• 1.2 物質透過血腦屏障的方式18-20
• 1.3 神經膠質瘤靶向納米粒載藥系統(tǒng)研究20-26
• 1.3.1 被動靶向納米粒載藥系統(tǒng)21-22
• 1.3.2 主動靶向納米粒載藥系統(tǒng)22-25
• 1.3.3 物理化學靶向納米粒載藥系統(tǒng)25
• 1.3.4 智能化多功能納米粒載藥系統(tǒng)25-26
• 1.4 參考文獻26-30
• 第2章 制劑的制備及表征30-61
• 2.1 引言30-31
• 2.2 實驗材料31-33
• 2.2.1 實驗儀器31-32
• 2.2.2 實驗試劑32-33
• 2.2.3 Angiopep 2 序列33
• 2.2.4 EGFR siRNA 序列33
• 2.2.5 溶液的配制33
• 2.3 實驗方法33-41
• 2.3.1 制備方法的選擇33-34
• 2.3.2 空白納米粒的制備及處方篩選34
• 2.3.3 ANG CHI 的合成與表征34-36
• 2.3.4 ANG/PLGA/DOX 納米粒的制備及制備工藝篩選36-37
• 2.3.5 ANG/PLGA/DOX 納米粒含量測定方法的建立37-38
• 2.3.6 ANG/PLGA/DOX 納米粒的表征38-40
• 2.3.7 ANG/PLGA/DOX/siRNA 納米粒的制備40
• 2.3.8 ANG/PLGA/DOX/siRNA 納米粒的表征40-41
• 2.4 數據處理41
• 2.5 實結果與討論41-59
• 2.5.1 angiopep 2 質譜和液相色譜圖41-42
• 2.5.2 空白納米粒制備工藝篩選42-43
• 2.5.3 ANG CHI 的表征43-45
• 2.5.4 ANG/PLGA/DOX 納米粒的制備及制備工藝篩選45-48
• 2.5.5 ANG/PLGA/DOX 納米粒中藥物含量測定方法48-50
• 2.5.6 ANG/PLGA/DOX 納米粒的表征50-56
• 2.5.7 ANG/PLGA/DOX/siRNA 納米粒的制備和表征56-59
• 2.6 本章小結59
• 2.7 參考文獻59-61
• 第3章 制劑的體外研究61-81
• 3.1 引言61
• 3.2 實驗材料61-64
• 3.2.1 實驗儀器61-62
• 3.2.2 實驗試劑62-63
• 3.2.3 試劑配制63-64
• 3.3 實驗方法64-68
• 3.3.1 細胞的培養(yǎng)方法64-65
• 3.3.2 載體系統(tǒng)體外細胞攝取實驗65
• 3.3.3 載體系統(tǒng)體外細胞轉染率測定65-66
• 3.3.4 SRB 法測定載體系統(tǒng)對細胞的存活率66-67
• 3.3.5 細胞周期實驗67
• 3.3.6 細胞凋亡實驗67-68
• 3.4 數據處理68
• 3.5 實驗結果與討論68-79
• 3.5.1 U87MG 細胞的形態(tài)學特征68-69
• 3.5.2 載體系統(tǒng)對 U87MG 細胞攝取實驗69-72
• 3.5.3 空白載體對細胞存活率的影響72-73
• 3.5.4 DOX 對細胞生長的抑制作用73-74
• 3.5.5 載阿霉素的納米粒對細胞生長的抑制作用74-75
• 3.5.6 共載系統(tǒng)對細胞生長的抑制作用75
• 3.5.7 載藥系統(tǒng)對細胞周期的影響75-77
• 3.5.8 載藥系統(tǒng)對細胞凋亡的影響77-79
• 3.6 本章小結79
• 3.7 參考文獻79-81
• 第4章 制劑的藥動學與組織分布研究81-97
• 4.1 前言81
• 4.2 實驗材料81-82
• 4.2.1 實驗儀器81-82
• 4.2.2 實驗試劑82
• 4.2.3 溶液的配制82
• 4.3 實驗方法82-85
• 4.3.1 載藥系統(tǒng)透過 BBB 能力的考察82-83
• 4.3.2 藥物動力學和組織分布分析方法的建立83-84
• 4.3.3 小鼠體內藥物動力學和組織分布研究84-85
• 4.4 數據處理85
• 4.5 實驗結果與結論85-96
• 4.5.1 載藥系統(tǒng)透過血腦屏障的情況85-87
• 4.5.2 DOX 體內分析方法的建立87-91
• 4.5.3 藥物動力學參數91-93
• 4.5.4 不同時間點組織中藥物分布特征93-95
• 4.5.5 藥物腦靶向性評價95-96
• 4.6 本章小結96
• 4.7 參考文獻96-97
• 全文總結97-98
• 個人簡歷、在學期間發(fā)表的學術論文與研究成果98-99
• 一．教育背景98
• 二．在讀期間發(fā)表的文章98
• 三．在讀期間申請專利98
• 四．在讀期間參加的科研項目98
• 五．在讀期間獲得的獎勵98-99
• 致謝99

【參考文獻】

中國期刊全文數據庫 前5條

1 呂鳳嬌;許小平;;阿霉素納米粒體外釋放模型的擬合研究[J];計算機與應用化學;2010年07期

2 王朝輝;姜同英;張婧;王思玲;;腦靶向納米載體系統(tǒng)的研究進展[J];中國生化藥物雜志;2008年05期

3 吳永紅;張成崗;;HIV-1TAT蛋白轉導肽的研究進展[J];中國生物工程雜志;2010年10期

4 龔連生;曾雅娟;張陽德;周艷琴;陳果;李一卉;;阿霉素納米脂質體大鼠體內的藥動學研究[J];中國現(xiàn)代醫(yī)學雜志;2010年01期

5 林蘇娜;林華慶;;納米粒作為抗腫瘤藥物載體的研究進展[J];中國腫瘤臨床;2013年06期

  本文關鍵詞：共載阿霉素和EGFR siRNA的PLGA腦靶向納米粒的制備及抗神經膠質瘤作用研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：467970