本文關(guān)鍵詞：共載阿霉素和EGFR siRNA的PLGA腦靶向納米粒的制備及抗神經(jīng)膠質(zhì)瘤作用研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：藥物的聯(lián)合治療是腫瘤治療的新策略之一。阿霉素是一種傳統(tǒng)的腫瘤化療藥物，但同時(shí)也是P-糖蛋白（P-gp）的底物，由于腦毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞表面也存在P-gp，非常不利于阿霉素穿過血腦屏障治療腦腫瘤�；蛑委熓且环N比較有希望的治療手段。腦癌,肺癌，乳腺癌，頭頸癌，肝癌等都過度表達(dá)表皮生長(zhǎng)因子受體(Epidermal growth factor receptor, EGFR)。腫瘤EGFR的表達(dá)水平與腫瘤的等級(jí)程度，不良的預(yù)后和對(duì)放療化療的抗性等都有著密切的關(guān)系。本課題構(gòu)建了一種共載阿霉素和EGFR siRNA的靶向納米粒遞送系統(tǒng)，以期能夠更好的治療神經(jīng)膠質(zhì)瘤。課題的主要內(nèi)容如下： 1. ANG-CHI的合成與表征。通過3-馬來(lái)酰亞胺丙酸-N-羥基琥珀酸亞胺酯（Pr-NHS-Mal），將靶向基團(tuán)（angiopep-2）接載于殼聚糖上。采用傅里葉紅外光譜（FT-IR）、核磁共振（NMR）和BCA蛋白測(cè)定法分別對(duì)聚合物上的angiopep-2進(jìn)行定性和定量表征，結(jié)果證實(shí)，angiopep-2成功接載于殼聚糖上。 2. ANG/PLGA/DOX/siRNA靶向載藥系統(tǒng)的構(gòu)建。通過單因素考察，確定納米粒制備處方，制備了ANG/PLGA/DOX納米粒載藥系統(tǒng)，并利用投射電鏡（TEM），納米粒度和電位測(cè)定儀、紫外可見分光光度計(jì)對(duì)納米粒的形態(tài)、粒徑、電位、載藥量、包封率、體外釋放特征進(jìn)行了表征。然后將其與荷負(fù)電荷的EGFRsiRNA孵育，得到ANG/PLGA/DOX/siRNA靶向載藥系統(tǒng)，瓊脂糖凝膠電泳顯示EGFR siRNA能夠很好的荷載于納米粒上。 3. ANG/PLGA/DOX/siRNA靶向載藥系統(tǒng)對(duì)人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤U87MG細(xì)胞的抗腫瘤活性。使用苯磺羅丹明B（SRB）法考察了空白載體以及各種載藥系統(tǒng)對(duì)U87MG細(xì)胞存活率的影響；使用激光共聚焦顯微鏡和流式細(xì)胞儀考察了載藥系統(tǒng)被U87細(xì)胞攝取情況，通過流式細(xì)胞儀分析載藥系統(tǒng)對(duì)細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡的影響。結(jié)果顯示，共載系統(tǒng)比單獨(dú)載藥系統(tǒng)的抗腫瘤活性更為顯著，作用4h后阿霉素和siRNA能夠有效的被U87MG細(xì)胞同時(shí)攝取，引起細(xì)胞凋亡。 4. ANG/PLGA/DOX載藥系統(tǒng)小鼠體內(nèi)藥物動(dòng)力學(xué)和組織分布研究以及載藥系統(tǒng)透過血腦屏障能力研究。體內(nèi)藥物動(dòng)力學(xué)和組織分布研究顯示，載藥系統(tǒng)能夠提高阿霉素的藥時(shí)曲線下面積（AUC），能夠有效的遞送藥物進(jìn)入腦部。 本研究主要是制備了一種共載阿霉素和EGFR siRNA的靶向納米粒遞送系統(tǒng)，并通過一系列實(shí)驗(yàn)指標(biāo)考察了制劑的特征以及體外抗腫瘤活性，最后考察了載藥系統(tǒng)的藥物動(dòng)力學(xué)和組織分布特征，，證實(shí)了該系統(tǒng)能夠遞送阿霉素進(jìn)入腦部，對(duì)神經(jīng)膠質(zhì)瘤治療具有一定應(yīng)用價(jià)值。
【關(guān)鍵詞】：聚丙交酯-乙交酯共聚物 angiopep-2 siRNA 神經(jīng)膠質(zhì)瘤 納米粒
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R943
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-15
• 縮略詞表15-17
• 第1章 緒論17-30
• 1.1 神經(jīng)膠質(zhì)瘤和血腦屏障17-18
• 1.1.1 神經(jīng)膠質(zhì)瘤17
• 1.1.2 血腦屏障簡(jiǎn)介17-18
• 1.2 物質(zhì)透過血腦屏障的方式18-20
• 1.3 神經(jīng)膠質(zhì)瘤靶向納米粒載藥系統(tǒng)研究20-26
• 1.3.1 被動(dòng)靶向納米粒載藥系統(tǒng)21-22
• 1.3.2 主動(dòng)靶向納米粒載藥系統(tǒng)22-25
• 1.3.3 物理化學(xué)靶向納米粒載藥系統(tǒng)25
• 1.3.4 智能化多功能納米粒載藥系統(tǒng)25-26
• 1.4 參考文獻(xiàn)26-30
• 第2章 制劑的制備及表征30-61
• 2.1 引言30-31
• 2.2 實(shí)驗(yàn)材料31-33
• 2.2.1 實(shí)驗(yàn)儀器31-32
• 2.2.2 實(shí)驗(yàn)試劑32-33
• 2.2.3 Angiopep 2 序列33
• 2.2.4 EGFR siRNA 序列33
• 2.2.5 溶液的配制33
• 2.3 實(shí)驗(yàn)方法33-41
• 2.3.1 制備方法的選擇33-34
• 2.3.2 空白納米粒的制備及處方篩選34
• 2.3.3 ANG CHI 的合成與表征34-36
• 2.3.4 ANG/PLGA/DOX 納米粒的制備及制備工藝篩選36-37
• 2.3.5 ANG/PLGA/DOX 納米粒含量測(cè)定方法的建立37-38
• 2.3.6 ANG/PLGA/DOX 納米粒的表征38-40
• 2.3.7 ANG/PLGA/DOX/siRNA 納米粒的制備40
• 2.3.8 ANG/PLGA/DOX/siRNA 納米粒的表征40-41
• 2.4 數(shù)據(jù)處理41
• 2.5 實(shí)結(jié)果與討論41-59
• 2.5.1 angiopep 2 質(zhì)譜和液相色譜圖41-42
• 2.5.2 空白納米粒制備工藝篩選42-43
• 2.5.3 ANG CHI 的表征43-45
• 2.5.4 ANG/PLGA/DOX 納米粒的制備及制備工藝篩選45-48
• 2.5.5 ANG/PLGA/DOX 納米粒中藥物含量測(cè)定方法48-50
• 2.5.6 ANG/PLGA/DOX 納米粒的表征50-56
• 2.5.7 ANG/PLGA/DOX/siRNA 納米粒的制備和表征56-59
• 2.6 本章小結(jié)59
• 2.7 參考文獻(xiàn)59-61
• 第3章 制劑的體外研究61-81
• 3.1 引言61
• 3.2 實(shí)驗(yàn)材料61-64
• 3.2.1 實(shí)驗(yàn)儀器61-62
• 3.2.2 實(shí)驗(yàn)試劑62-63
• 3.2.3 試劑配制63-64
• 3.3 實(shí)驗(yàn)方法64-68
• 3.3.1 細(xì)胞的培養(yǎng)方法64-65
• 3.3.2 載體系統(tǒng)體外細(xì)胞攝取實(shí)驗(yàn)65
• 3.3.3 載體系統(tǒng)體外細(xì)胞轉(zhuǎn)染率測(cè)定65-66
• 3.3.4 SRB 法測(cè)定載體系統(tǒng)對(duì)細(xì)胞的存活率66-67
• 3.3.5 細(xì)胞周期實(shí)驗(yàn)67
• 3.3.6 細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)67-68
• 3.4 數(shù)據(jù)處理68
• 3.5 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論68-79
• 3.5.1 U87MG 細(xì)胞的形態(tài)學(xué)特征68-69
• 3.5.2 載體系統(tǒng)對(duì) U87MG 細(xì)胞攝取實(shí)驗(yàn)69-72
• 3.5.3 空白載體對(duì)細(xì)胞存活率的影響72-73
• 3.5.4 DOX 對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用73-74
• 3.5.5 載阿霉素的納米粒對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用74-75
• 3.5.6 共載系統(tǒng)對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用75
• 3.5.7 載藥系統(tǒng)對(duì)細(xì)胞周期的影響75-77
• 3.5.8 載藥系統(tǒng)對(duì)細(xì)胞凋亡的影響77-79
• 3.6 本章小結(jié)79
• 3.7 參考文獻(xiàn)79-81
• 第4章 制劑的藥動(dòng)學(xué)與組織分布研究81-97
• 4.1 前言81
• 4.2 實(shí)驗(yàn)材料81-82
• 4.2.1 實(shí)驗(yàn)儀器81-82
• 4.2.2 實(shí)驗(yàn)試劑82
• 4.2.3 溶液的配制82
• 4.3 實(shí)驗(yàn)方法82-85
• 4.3.1 載藥系統(tǒng)透過 BBB 能力的考察82-83
• 4.3.2 藥物動(dòng)力學(xué)和組織分布分析方法的建立83-84
• 4.3.3 小鼠體內(nèi)藥物動(dòng)力學(xué)和組織分布研究84-85
• 4.4 數(shù)據(jù)處理85
• 4.5 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與結(jié)論85-96
• 4.5.1 載藥系統(tǒng)透過血腦屏障的情況85-87
• 4.5.2 DOX 體內(nèi)分析方法的建立87-91
• 4.5.3 藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)91-93
• 4.5.4 不同時(shí)間點(diǎn)組織中藥物分布特征93-95
• 4.5.5 藥物腦靶向性評(píng)價(jià)95-96
• 4.6 本章小結(jié)96
• 4.7 參考文獻(xiàn)96-97
• 全文總結(jié)97-98
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷、在學(xué)期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文與研究成果98-99
• 一．教育背景98
• 二．在讀期間發(fā)表的文章98
• 三．在讀期間申請(qǐng)專利98
• 四．在讀期間參加的科研項(xiàng)目98
• 五．在讀期間獲得的獎(jiǎng)勵(lì)98-99
• 致謝99

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前5條

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  本文關(guān)鍵詞：共載阿霉素和EGFR siRNA的PLGA腦靶向納米粒的制備及抗神經(jīng)膠質(zhì)瘤作用研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：467970