發(fā)布時(shí)間：2017-06-17 11:09

  本文關(guān)鍵詞：五株嗜鹽放線菌次級(jí)代謝產(chǎn)物的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：本學(xué)位論文通過基因簇、代謝產(chǎn)物多樣性和生物活性等分析,選取了5株嗜鹽放線菌Nocardiopsis lucentensis DSM 44048、Saccharopolyspora sp. YIM M13568、Nocardiopsis chromatogenes YIM 90109、Nocardiopsis sp. YIM M13066和Saccharopolyspora sp. YIM M13001;系統(tǒng)開展了5株嗜鹽放線菌次級(jí)代謝產(chǎn)物的分離純化、結(jié)構(gòu)鑒定和活性評(píng)價(jià)等相關(guān)研究。使用葡聚糖凝膠SephadexLH-20柱色譜、RP-18反相硅膠柱色譜、正相硅膠柱色譜和高效液相色譜等技術(shù),對(duì)菌株代謝產(chǎn)物進(jìn)行分離,共得到48個(gè)化合物；通過IR、HRESIMS、UV、NMR和X-ray單晶衍射等手段,確定了它們的化學(xué)結(jié)構(gòu),其中包括23個(gè)新化合物；并對(duì)其細(xì)胞毒性、抗菌和沙門氏菌Ⅲ型分泌系統(tǒng)抑制活性進(jìn)行了評(píng)價(jià)。N. lucentensis DSM 44048菌株購買自德國微生物菌種保藏中心,經(jīng)瓊脂培養(yǎng)基平板發(fā)酵和代謝產(chǎn)物分離純化,得到14個(gè)化合物,包括7個(gè)苯并惡唑類化合物Nocarbenzoxazoles A-G (1-7)、2個(gè)丁內(nèi)酯類化合物L(fēng)ucentides A and B(8-9)、1個(gè)二肽類化合物048-12(10)、3個(gè)吲哚類化合物(048-1、048-8和048-5,11-13)和1個(gè)十六元環(huán)大環(huán)內(nèi)酯048-6(14)。對(duì)化合物Nocarbenzoxazoles A-G的細(xì)胞毒性和抗菌活性,以及化合物L(fēng)ucentides A and B的抗菌活性進(jìn)行了評(píng)價(jià),結(jié)果表明化合物Nocarbenzoxazole G具有很強(qiáng)的選擇性細(xì)胞毒活性。S. sp. YIM M13568菌株是從中國海南省文昌縣紅樹林根泥分離得到的一株糖多孢菌。經(jīng)發(fā)酵、產(chǎn)物提取和分離純化,得到9個(gè)化合物,包括4個(gè)喹諾酮類衍生物Q1-Q4(15-18)、1個(gè)萘類衍生物Q5(19)、3個(gè)紅霉素類衍生物(13568-1、13568-6和13568-5,20-22)和一個(gè)倍半萜13568-4(23)。對(duì)4個(gè)喹諾酮類衍生物Q1-Q4和1個(gè)萘類衍生物Q5的細(xì)胞毒活性和抗菌活性進(jìn)行了評(píng)價(jià),結(jié)果表明化合物Q1-Q3對(duì)不同的腫瘤細(xì)胞具有選擇性抗腫瘤作用。N. chromatogenes YIM 90109菌株為一株極端嗜鹽菌,分離自中國新疆鹽湖淤泥。經(jīng)瓊脂培養(yǎng)基平板發(fā)酵和代謝產(chǎn)物分離純化,得到3個(gè)倍半萜類化合物(90109-1、90109A和90109D,24-26)和1個(gè)呋喃類衍生物90109-2(27)。對(duì)倍半萜類化合物90109-1、90109A和90109D的抗菌活性、細(xì)胞毒和沙門氏菌Ⅲ型分泌系統(tǒng)抑制活性進(jìn)行了評(píng)價(jià),化合物均未表現(xiàn)出明顯活性。N. sp. YIM M13066菌株是分離自中國科研潛艇采集的中國南海深海底泥(109°53.171'E,16°3.576'N,-880 m)的一株擬諾卡氏放線菌。從其代謝產(chǎn)物中分離得到了7個(gè)二酮哌嗪類衍生物(066F、066C、13066M5、13066M4、13066K2、 13066K1和13066D,28-34)、1個(gè)吩嗪類衍生物13066T(35)、1個(gè)吲哚類化合物13066P(36)、5個(gè)α-吡喃酮類化合物(13066E.13066H、13066F、13066J和13066-3,37-41)、1個(gè)苯胺衍生物066G(42)和1個(gè)吡咯衍生物066N(43)。并對(duì)其中的2個(gè)哌嗪類化合物066F和066C和3個(gè)α-吡喃酮類化合物13066E、13066F和13066J的抗菌活性、細(xì)胞毒和沙門氏菌Ⅲ型分泌系統(tǒng)抑制活性進(jìn)行了評(píng)價(jià),其中化合物066F和066C具有廣譜細(xì)胞毒作用,作用強(qiáng)度與VP-16相當(dāng)。S.sp.YIM M13001菌株是采自中國南海深海淤泥的一株糖多孢菌,對(duì)其次級(jí)代謝產(chǎn)物進(jìn)行深入研究發(fā)現(xiàn)了2個(gè)十四元大環(huán)內(nèi)酯(001-MS-3和001-MS-1,44-45)、1個(gè)苯并呋喃衍生物13001-1(46)、1個(gè)苯酚衍生物13001-2(47)和1個(gè)吲哚衍生物13001-3(48)。
【關(guān)鍵詞】：嗜鹽放線菌 次級(jí)代謝產(chǎn)物 細(xì)胞毒 抗菌活性 Ⅲ型分泌系統(tǒng)毒蛋白
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R915
【目錄】：

• 摘要8-10
• Abstract10-12
• 附件12-13
• 符號(hào)說明13-15
• 第一章 嗜鹽放線菌研究概況15-24
• 1.1. 嗜鹽放線菌的定義及分類15-16
• 1.2. 嗜鹽放線菌生物資源研究概況16-17
• 1.3. 嗜鹽放線菌次級(jí)代謝產(chǎn)物研究概況17-22
• 1.3.1. 海洋源嗜鹽放線菌次級(jí)代謝產(chǎn)物17-21
• 1.3.2. 陸源嗜鹽放線菌次級(jí)代謝產(chǎn)物21-22
• 1.4. 嗜鹽放線菌的發(fā)展前景22-24
• 第二章 實(shí)驗(yàn)材料與方法24-33
• 2.1. 實(shí)驗(yàn)材料24-29
• 2.1.1. 主要儀器24-25
• 2.1.2. 試劑與耗材25-27
• 2.1.3. 細(xì)胞株來源27
• 2.1.4. 菌株來源27
• 2.1.5. 常用試劑的配制27-29
• 2.2. 實(shí)驗(yàn)方法29-33
• 2.2.1. 薄層層析(TLC)29
• 2.2.2. 正相硅膠柱色譜29-30
• 2.2.3. 反相硅膠柱色譜30
• 2.2.4. 葡聚糖凝膠柱色譜30
• 2.2.5. 重結(jié)晶30
• 2.2.6. 旋光30-31
• 2.2.7. 紫外光譜(UV)31
• 2.2.8. 紅外光譜(IR)31
• 2.2.9. 質(zhì)譜(MS)31
• 2.2.10. 核磁共振(NMR)31
• 2.2.11. 細(xì)胞的培養(yǎng)、傳代和保存31-32
• 2.2.12. SRB法測(cè)定藥物細(xì)胞毒活性32-33
• 第三章 菌株Nocardiopsis lucentensis DSM 44048化學(xué)成分的研究33-50
• 3.1. 引言33
• 3.2. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果33-50
• 3.2.1. 菌株的發(fā)酵培養(yǎng)及代謝產(chǎn)物的處理33-34
• 3.2.2. MeOH相的分離純化34-37
• 3.2.3. 結(jié)構(gòu)解析37-46
• 3.2.4. 苯并惡唑類化合物N1-N7和聚酮類化合物L(fēng)1-L2的活性評(píng)價(jià)46-48
• 3.2.5. 苯并惡唑類化合物的化學(xué)合成研究48-49
• 3.2.6. 總結(jié)分析49-50
• 第四章 菌株Saccharopolysporasp.YIM M13568化學(xué)成分的研究50-66
• 4.1. 引言50
• 4.2. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果50-66
• 4.2.1. 菌株的發(fā)酵培養(yǎng)及代謝產(chǎn)物的處理50
• 4.2.2. MeOH相的分離純化50-53
• 4.2.3. 結(jié)構(gòu)解析53-64
• 4.2.4. 化合物Q1-Q5活性評(píng)價(jià)64-65
• 4.2.5. 總結(jié)與分析65-66
• 第五章 菌株Nocardiopsis chromatogenes YIM 90109化學(xué)成分的研究66-75
• 5.1. 引言66
• 5.2. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果66-75
• 5.2.1. 菌株的發(fā)酵培養(yǎng)及代謝產(chǎn)物的處理66-67
• 5.2.2. MeOH相的分離純化67-68
• 5.2.3. 結(jié)構(gòu)解析68-73
• 5.2.4. 倍半萜類化合物90109-1、90109A、90109D的活性評(píng)價(jià)73-74
• 5.2.5. 總結(jié)分析74-75
• 第六章 菌株Nocardiopsis sp.YIM M13066化學(xué)成分的研究75-94
• 6.1. 引言75-77
• 6.2. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果77-94
• 6.2.1. 菌株的發(fā)酵培養(yǎng)及代謝產(chǎn)物的處理77
• 6.2.2. EA相的分離純化77-80
• 6.2.3. 結(jié)構(gòu)解析80-91
• 6.2.4. 二酮哌嗪和α-吡喃酮類化合物活性評(píng)價(jià)91-93
• 6.2.5. 總結(jié)分析93-94
• 第七章 菌株Saccharopolyspora sp.YIM M1 3001化學(xué)成分的研究94-102
• 7.1. 引言94-95
• 7.2. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果95-102
• 7.2.1. 菌株的發(fā)酵培養(yǎng)及代謝產(chǎn)物的處理95
• 7.2.2. MeOH相的分離純化95-97
• 7.2.3. 結(jié)構(gòu)解析97-101
• 7.2.4. 總結(jié)與分析101-102
• 參考文獻(xiàn)102-105
• 致謝105-107
• 研究生期間的學(xué)術(shù)成果107-108
• 附錄 化合物譜圖108-125
• 附件125

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  本文關(guān)鍵詞：五株嗜鹽放線菌次級(jí)代謝產(chǎn)物的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：458177