目的利用該實(shí)驗(yàn)室先期已建成的人臍血源間充質(zhì)干細(xì)胞株(FUCB-MSCs),標(biāo)記上增強(qiáng)型綠色熒光蛋白(EGFP),以對燙傷SCID小鼠行外源性FUCB-MSCs移植治療的創(chuàng)面區(qū)進(jìn)行移植效應(yīng)示蹤。方法FUCB-MSCs經(jīng)腺病毒轉(zhuǎn)染標(biāo)記GFP;建立深Ⅱ度燙傷SCID小鼠模型,將小鼠隨機(jī)分為低劑量移植組、高劑量移植組和空白對照組,每組6只,每只2個(gè)創(chuàng)面,共12個(gè)創(chuàng)面,分別將轉(zhuǎn)染后的GFP-MSCs按照0.2mL 1×106個(gè)、0.2mL 2×106個(gè)以及等體積培養(yǎng)基通過尾靜脈注射的方式進(jìn)行創(chuàng)面移植。移植9d后取各組創(chuàng)面組織行冰凍切片HE染色,比較各組創(chuàng)面面積和創(chuàng)面細(xì)胞數(shù),熒光顯微鏡下觀察綠色熒光蛋白表達(dá)和創(chuàng)面修復(fù)損傷情況。結(jié)果 FUCB-MSCs經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄病毒感染后,48h熒光顯微鏡下可見到EGFP表達(dá),陽性率在80%以上,且6周后仍能觀察到GFP穩(wěn)定表達(dá),移植后創(chuàng)面部位可觀察到人源性GFP陽性表達(dá),移植3周后熒光未見衰減;移植標(biāo)記了GFP的FUCB-MSCs后SCID小鼠未出現(xiàn)排斥反應(yīng),低劑量組、高劑量組與對照組比較,在創(chuàng)面面積和細(xì)胞數(shù)上差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),可提示尾靜脈移...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 主要材料和試劑
    1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        1.2.1 FUCB-MSCs的復(fù)蘇培養(yǎng)與擴(kuò)增
        1.2.2 EGFP標(biāo)記FUCB-MSCs
        1.2.3 SCID小鼠燙傷模型建立
        1.2.4 移植創(chuàng)面分組情況
        1.2.5 標(biāo)記細(xì)胞觀察
        1.2.6 組織學(xué)觀察
        1.2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 FUCB-MSCs的復(fù)蘇與培養(yǎng)
    2.2 FUCB-MSCs體外標(biāo)記EGFP
    2.3 燙傷愈合恢復(fù)情況及創(chuàng)面細(xì)胞數(shù)對比
    2.4 熒光與免疫組化結(jié)果
3 討論
4 結(jié)論



本文編號(hào)：3920354