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β-環(huán)糊精衍生物包合齊墩果酸的生物利用度研究

發(fā)布時(shí)間：2017-05-15 22:02

本文關(guān)鍵詞：β-環(huán)糊精衍生物包合齊墩果酸的生物利用度研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：齊墩果酸具有多種藥理活性，但由于其溶解度極低，生物利用度很差，限制了其應(yīng)用。環(huán)糊精是一類具有中空?qǐng)A筒狀結(jié)構(gòu)的化合物，在制劑中應(yīng)用非常廣泛，主要用于改善難溶性藥物的溶解度，提高藥物的生物利用度等。環(huán)糊精種類較多，其中以β-環(huán)糊精的應(yīng)用較多。近年來，開發(fā)出了多種β-環(huán)糊精的衍生物，在藥物制劑中具有非常良好的應(yīng)用前景。齊墩果酸與羥丙基β-環(huán)糊精的包合物具有較好的增溶作用，但是，對(duì)齊墩果酸與β-環(huán)糊精衍生物的熱力學(xué)穩(wěn)定性及齊墩果酸/羥丙基β-環(huán)糊精的生物利用度研究尚未見報(bào)道。目的：β-環(huán)糊精的衍生物具有良好的對(duì)難溶性藥物的增溶作用，能夠有效的改善難溶性藥物的吸收，提高生物利用度。本研究建立了不同齊墩果酸的β-環(huán)糊精的衍生物包合物的高效液相色譜的測(cè)定方法，通過相溶解度法對(duì)齊墩果酸的β-環(huán)糊精的衍生物包合過程的熱力學(xué)穩(wěn)定性進(jìn)行研究，并對(duì)齊墩果酸的羥丙基β-環(huán)糊精包合物的大鼠體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)行為及生物利用度進(jìn)行研究，為齊墩果酸的制劑研究奠定基礎(chǔ)。方法：（1）建立不同齊墩果酸的β-環(huán)糊精的衍生物包合物的高效液相色譜測(cè)定方法并進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證。色譜條件采用Agilent ZORBAX SB-C18colum（n150mm×4.6mm,5μm）色譜柱，流動(dòng)相為甲醇-乙腈-水=36：59：5（V/V），檢測(cè)波長(zhǎng)為：210nm，流速為1mL·min~(-1)，柱溫為30℃，進(jìn)樣量為20μL。（2）配制濃度為0，10，20，40，80和160mmol·L~(-1)的甲基-β-環(huán)糊精、羥丙基-β-環(huán)糊精及磺丁基醚-β-環(huán)糊精的系列水溶液。分別取上述各溶液適量，分別加入過量的齊墩果酸固體粉末，密塞，置于恒溫振蕩器中分別在25，35和45℃下振蕩包合3d，取樣用0.45μm微孔濾膜過濾，，按上述色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，計(jì)算齊墩果酸含量。以β-環(huán)糊精衍生物濃度為橫坐標(biāo)，以齊墩果酸濃度為縱坐標(biāo)繪制相溶解度圖，計(jì)算不同齊墩果酸的β-環(huán)糊精的衍生物包合過程的超分子包合常數(shù)及熱力學(xué)參數(shù)，進(jìn)行熱力學(xué)穩(wěn)定性研究。并對(duì)齊墩果酸和羥丙基-β-環(huán)糊精的包合條件進(jìn)行篩選。（3）建立大鼠血漿中齊墩果酸的LC-MS測(cè)定方法，并進(jìn)行了方法學(xué)考察。以Agilent Zorbax Eclipse Plus C18（150mm×2.1mm,5μm）為色譜柱，流動(dòng)相采用甲醇~(-1)0mmol·L~(-1)-醋酸銨水溶液=90:10（v/v），流速為0.4mL·min~(-1)，柱溫為35℃，進(jìn)樣量為5μL，內(nèi)標(biāo)為甘草次酸；質(zhì)譜條件為檢測(cè)方式：MRM，離子極性：正離子，檢測(cè)離子：齊墩果酸：m/z455.7，裂解電壓：180V，甘草次酸：m/z469.7，裂解電壓：200V。（4）大鼠隨機(jī)分為靜脈組和口服組，口服組采用齊墩果酸/羥丙基-β-環(huán)糊精包合物進(jìn)行灌胃，靜脈組采用齊墩果酸/羥丙基-β-環(huán)糊精包合物進(jìn)行尾靜脈注射�？诜M分別于給藥前及給藥后10、20、30、45、60、120、240及360min眼球取血1mL，靜脈組分別于給藥前及給藥后2、5、10、20、30、60、120、240及360min眼球取血，分離血漿，以建立的LC-MS法進(jìn)行測(cè)定。將試驗(yàn)所測(cè)得的數(shù)據(jù)采用藥動(dòng)學(xué)統(tǒng)計(jì)軟件DAS2.0進(jìn)行處理，求算齊墩果酸在大鼠體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)，并計(jì)算其絕對(duì)生物利用度。結(jié)果：（1）干擾性試驗(yàn)結(jié)果顯示齊墩果酸與其他成分的分離效果良好，陰性對(duì)照未對(duì)齊墩果酸的測(cè)定產(chǎn)生干擾，線性范圍為0.0625～2mg·mL~(-1)，精密度結(jié)果RSD值為0.59%，表明儀器精密度良好，穩(wěn)定性結(jié)果顯示在24h內(nèi)樣品溶液穩(wěn)定。齊墩果酸/甲基-β-環(huán)糊精、齊墩果酸/羥丙基-β-環(huán)糊精及齊墩果酸/磺丁基醚-β-環(huán)糊精包合物的回收率分別為0.66%、1.0%和1.0%。（2）隨著溫度的升高，齊墩果酸/甲基-β-環(huán)糊精的相溶解度曲線斜率增加，而齊墩果酸/羥丙基-β-環(huán)糊精及齊墩果酸/磺丁基醚-β-環(huán)糊精的相溶解度曲線斜率減��；在25、35及45℃時(shí)齊墩果酸/甲基-β-環(huán)糊精的超分子包合常數(shù)分別為6.916、10.39和27.80L·mol~(-1)，熱力學(xué)參數(shù)ΔH~0為54.59kJ·mol~(-1)，ΔS~0為198.4J·mol~(-1)·K~(-1)，ΔG~0為-4.555、-6.538和-8.522kJ·mol~(-1)，齊墩果酸/羥丙基-β-環(huán)糊精的超分子包合常數(shù)分別為10.58、8.733和6.160L·mol~(-1)，熱力學(xué)參數(shù)ΔH~0為-21.24kJ·mol~(-1)，ΔS~0為-51.41J·mol~(-1)·K~(-1)，ΔG~0為-5.917、-5.403和-4.889kJ·mol~(-1)，齊墩果酸/磺丁基醚-β-環(huán)糊精的超分子包合常數(shù)分別為5.530、3.353和2.805，熱力學(xué)參數(shù)ΔH~0為-26.89kJ·mol~(-1)，ΔS~0為-76.36J·mol~(-1)·K~(-1)，ΔG~0為-4.119、-3.356和-2.592kJ·mol~(-1)。（3）建立了大鼠血漿中齊墩果酸的LC-MS測(cè)定方法，方法學(xué)驗(yàn)證結(jié)果表明本方法提取回收率良好82%，最低定量限為0.05μg·mL~(-1)，準(zhǔn)確度和日內(nèi)、日間精密度均良好RSD15%，靈敏度好，特異性高，無基質(zhì)效應(yīng)，滿足齊墩果酸口服后的藥代動(dòng)力學(xué)研究。（4）大鼠口服齊墩果酸/羥丙基β-環(huán)糊精包合物的平均滯留時(shí)間為84min，達(dá)峰時(shí)間出現(xiàn)在45min，其絕對(duì)生物利用度為2.010%。結(jié)論：（1）所建立的不同齊墩果酸的β-環(huán)糊精衍生物包合物中齊墩果酸的高效液相色譜測(cè)定方法經(jīng)方法學(xué)驗(yàn)證能夠滿足測(cè)定要求。（2）本研究首次從能量的角度對(duì)甲基-β-環(huán)糊精、羥丙基β-環(huán)糊精及磺丁基醚β-環(huán)糊精對(duì)齊墩果酸分子進(jìn)行包合過程的驅(qū)動(dòng)力的闡述。三種β-環(huán)糊精衍生物對(duì)齊墩果酸的包合過程均為自發(fā)過程，甲基-β-環(huán)糊精對(duì)齊墩果酸的包合過程為吸熱、無序化增加、熵驅(qū)動(dòng)過程，羥丙基β-環(huán)糊精及磺丁基醚β-環(huán)糊精對(duì)齊墩果酸的包合過程為放熱、無序化降低、焓驅(qū)動(dòng)過程。（3）建立的大鼠血漿中齊墩果酸的LC-MS測(cè)定方法符合對(duì)生物樣品的測(cè)定要求。（4）齊墩果酸的羥丙基β-環(huán)糊精包合物的生物利用度研究結(jié)果顯示以羥丙基β-環(huán)糊精為輔料對(duì)齊墩果酸進(jìn)行包合可以有效的改善其口服生物利用度。
【關(guān)鍵詞】：齊墩果酸 環(huán)糊精 熱力學(xué)穩(wěn)定性 相溶解度 生物利用度
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R96
【目錄】：