本文關(guān)鍵詞：津力達(dá)對高脂誘導(dǎo)的胰島素抵抗ApoE基因敲除小鼠脂肪組織中脂代謝的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目前糖尿病已成為嚴(yán)重危害我國人民身心健康的慢性疾病。糖尿病的高發(fā)被認(rèn)為與現(xiàn)代人的生產(chǎn)生活方式緊密相關(guān),不斷高脂肪攝入所帶來的的超重和肥胖已成為了致病的關(guān)鍵因素。有研究證實(shí),脂肪代謝紊亂與糖尿病,尤其是Ⅱ型糖尿病的胰島素抵抗(IR)關(guān)系密切。脂代謝紊亂時(shí)過高的FFA水平,使得脂質(zhì)過度沉積于脂肪組織中,從而降低胰島素的敏感性。FFA還可減少脂肪組織中腫瘤壞死因子α(TNF2α),纖溶酶原激活劑抑制物(PAI-1),白細(xì)胞介素-6(IL-6),C-反應(yīng)蛋白等細(xì)胞因子的釋放,降低內(nèi)源性生物活性多肽脂聯(lián)素的分泌,而引起IR。開發(fā)一種既可降糖又有降脂作用的藥物逐漸成為必須。近年來由石家莊以嶺藥業(yè)開發(fā)的降糖類中藥津力達(dá)顆粒在臨床的應(yīng)用得到了廣泛認(rèn)可。已有多項(xiàng)研究證實(shí),津力達(dá)具有明顯的降糖,降脂作用。但目前,該藥的具體作用機(jī)制和靶點(diǎn)尚不清晰。目的:通過高脂飼養(yǎng)Apo E-/-小鼠形成胰島素抵抗并發(fā)脂代謝紊亂的動(dòng)物模型,從改善胰島素抵抗和脂肪組織代謝的角度探索津力達(dá)改善IR的具體作用機(jī)制。方法:實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與分組:實(shí)驗(yàn)采用48只實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,8只雄性C57BL/6J小鼠設(shè)為正常對照組(NF),正常飼料喂養(yǎng)。40只雄性Apo E-/-小鼠,給予自制高脂飼料喂養(yǎng)16周后,根據(jù)血糖水平隨機(jī)分為5組:模型組(HF),羅格列酮組(LGLT,1.33 mg/kg.d-1),津力達(dá)高劑量組(JLDH,3.80 g/kg.d-1),津力達(dá)中劑量組(JLDM,1.90g/kg.d-1),津力達(dá)低劑量組(JLDL,0.95 g/kg.d-1)。正常對照組,模型組給予純水,每組8只,各組均灌胃給藥。每日一次,連續(xù)8周。取材與指標(biāo)檢測:第8周末次給藥后,禁食不禁水14-16h,進(jìn)行葡萄糖耐量試驗(yàn)(OGTT)。OGTT實(shí)驗(yàn)結(jié)束后實(shí)驗(yàn)動(dòng)物回籠正常飼養(yǎng)48h,待小鼠機(jī)體應(yīng)激反應(yīng)消失后,再次禁食不禁水14-16h,摘除小鼠的眼球取血1.5ml,脫頸椎處死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,留取胰腺和腹部皮下脂肪組織。將血液離心,分離血清,全自動(dòng)生化分析儀測定血清中FBG,FFA,TC,TG,HDL-C,LDL-C水平,放射免疫分析法檢測空腹胰島素(Fins)水平。采用10%福爾馬林溶液固定胰腺與部分脂肪組織,HE染色,光鏡觀察組織變化。部分脂肪組織制成勻漿,用于丙二醛(MAD)和超氧化物歧化酶(SOD)的含量測定,剩余部分脂肪組織,采用蛋白質(zhì)印跡法(Western Blot)測定脂肪組織中過氧化物酶體增殖物激活受體蛋白(PPAR-γ),胰島素受體底物-1(IRS-1),胰島素受體底物-2(IRS-2),葡糖糖轉(zhuǎn)運(yùn)載體-4(GLUT-4),固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白(SREBP-1c),LDL受體(LDLR),FAT蛋白(FAT)及肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶1(CPT1)的表達(dá)。結(jié)果:胰島素敏感性評價(jià):和NF組相比,HF組Fins,FBG和HOMA-IR水平均顯著升高(P均0.01)。JLD可劑量依賴性地降低Fins和FBG水平,與HF組比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(JLDH組P均0.01,JLDM組P均0.05),與HF組比較,JLD各組HOMA-IR水平明顯下降具備統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(JLDH組,JLDM組P均0.01,JLDL組P0.05)。其中JLDH組對Fins,FBG水平及HOMA-IR的作用和LGLT組相當(dāng)。在給予大量葡萄糖后,各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血糖值均在30min升至頂峰,之后逐步下降,JLD各組血糖高峰值與HF組比較明顯降低。改善血清血脂指標(biāo):HF組血清中TC,TG,FFA,LDL-C濃度均較NF組顯著升高(P均0.01),而HDL-C濃度低于NF組(P0.01)。JLD各劑量組對于血液中的TG有降低作用,與HF組比較差異顯著(P均0.05)。JLDH組,JLDM組對于血液中的TC有降低作用,與HF組比較差異顯著(JLDH組P0.01,JLDM組P0.05),JLD高,中劑量組尚可明顯降低FFA及LDL-C的濃度(JLDH組LDL-C P0.01,其他P均0.05),提高HDL-C的濃度(P均0.05)。脂肪組織抗氧化指標(biāo):和NF相比,HF組SOD含量降低,MDA含量升高(P均0.05)。與HF組相比,JLD各劑量組均可不同程度降低MDA含量(P均0.05),JLD高,中劑量組尚可顯著升高SOD的含量(P0.05)。脂肪與胰腺組織HE染色:脂肪組織染色后,HF組可見單視野內(nèi)脂肪細(xì)胞數(shù)量降低,體積增大,細(xì)胞長短經(jīng)升高。LGLT組,JLDH組與NF組相比未見明顯異常,JLDM組,JLDL組則可見不同程度的脂肪細(xì)胞體積增大,及細(xì)胞長短徑的升高。胰腺染色后,HF組胰腺內(nèi)胰島結(jié)構(gòu)不清,細(xì)胞形態(tài)不完整,數(shù)目減少,體積變小,LGLT組和JLD各組和HF組相比均有不同程度的減輕。脂肪組織分子生物學(xué)檢測:Western blot結(jié)果顯示,和NF組相比,HF組FAT及SREBP-1C的表達(dá)上調(diào),CPT1,GLUT-4,IRS-1,IRS-2及PPARγ的表達(dá)下調(diào)(P均0.05),對LDLR未見明顯影響。和HF組相比,JLD三個(gè)劑量組均可上調(diào)IRS-2的表達(dá),JLDM和JLDH組尚可上調(diào)CPT1,IRS-1,IRS-2的表達(dá)及下調(diào)SREBP-1C的表達(dá),JLDH尚可上調(diào)GLUT-4及PPARγ的的表達(dá),但LGLT組,JLD各組FAT,LDLR的表達(dá)未見明顯作用,LGLT組均可上調(diào)GLUT-4,IRS-1,IRS-2及下調(diào)SREBP-1C的表達(dá)。結(jié)論:1高脂飼料喂養(yǎng)APOE-/-小鼠連續(xù)數(shù)月,可致小鼠出現(xiàn)高血糖,胰島素抵抗和脂質(zhì)代謝紊亂。這應(yīng)該與脂肪組織氧化應(yīng)激過強(qiáng),糖的利用降低及脂質(zhì)沉積增加有關(guān)。2津力達(dá)可以不同程度改善高脂飲食誘導(dǎo)的Apo E-/-小鼠的胰島素抵抗和脂代謝紊亂,這應(yīng)該與其可降低脂肪組織的氧化應(yīng)激水平有關(guān),可促進(jìn)血糖的利用及脂質(zhì)轉(zhuǎn)化有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：糖尿病 津力達(dá) 脂代謝 胰島素抵抗 蛋白表達(dá) Apo E-/-小鼠
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R965
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-11
• 英文縮寫11-12
• 前言12-13
• 材料與方法13-18
• 結(jié)果18-23
• 附圖23-32
• 附表32-36
• 討論36-40
• 結(jié)論40-41
• 總結(jié)41-42
• 參考文獻(xiàn)42-47
• 綜述47-54
• 參考文獻(xiàn)51-54
• 致謝54-55
• 個(gè)人簡歷55

【參考文獻(xiàn)】

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  本文關(guān)鍵詞：津力達(dá)對高脂誘導(dǎo)的胰島素抵抗ApoE基因敲除小鼠脂肪組織中脂代謝的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：347243