發(fā)布時(shí)間：2017-05-01 07:10

  本文關(guān)鍵詞：多層載藥微球型骨修復(fù)材料的制備及其對(duì)HPMSCs生物學(xué)活性影響的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究目的:1.人胎盤來源的間充質(zhì)干細(xì)胞(HPMSCs)已成為間充質(zhì)干細(xì)胞的重要獲得途徑,并被證明與其他來源間充質(zhì)干細(xì)胞相比有明顯的優(yōu)勢。本實(shí)驗(yàn)嘗試從胎盤中分離培養(yǎng)HPMSCs,并對(duì)其生物學(xué)特征進(jìn)行鑒定;2.在無菌環(huán)境中制備裝載VEGF/萬古霉素的藻酸鹽-殼聚糖多層緩釋微球,并檢測其對(duì)共培養(yǎng)的HPMSCs增殖活性及成骨活性有何影響。研究方法:1.將無菌條件下獲取的人足月胎盤組織帶回實(shí)驗(yàn)室,采用組織塊貼壁法分離培養(yǎng)原代HPMSCs,MTT檢測細(xì)胞生長曲線,對(duì)HPMSCs進(jìn)行成骨及成脂誘導(dǎo)驗(yàn)證其多向分化潛能;2.按照前期實(shí)驗(yàn)確定的多層載藥緩釋微球的制備方法,選擇試劑最優(yōu)配比,探索無菌環(huán)境中多層載藥緩釋微球的制備;將制備好的微球與HPMSCs共同培養(yǎng),CCK-8試劑盒檢測細(xì)胞增殖能力,茜素紅染色及ALP試劑盒檢測細(xì)胞成骨能力變化。研究結(jié)果:1.從人足月胎盤組織中分離培養(yǎng)的細(xì)胞呈成纖維細(xì)胞樣貼壁生長,生長曲線呈“S”形,成骨誘導(dǎo)后可見胞外鈣鹽沉積、茜素紅染色陽性,成脂誘導(dǎo)后油紅O染色陽性;2.經(jīng)改良后制得的多層載藥緩釋微球大小均勻、表面光滑圓整,細(xì)菌學(xué)檢測結(jié)果證明其符合無菌標(biāo)準(zhǔn);3.共培養(yǎng)后的HPMSCs增殖能力無明顯改變(P0.05),成骨誘導(dǎo)后茜素紅染色顯示載藥微球組鈣鹽沉積明顯多于空載微球組及對(duì)照組,ALP試劑盒測試結(jié)果證實(shí)加入載藥微球后細(xì)胞內(nèi)堿性磷酸酶含量明顯增高(P0.05),空載組與無球組相比也有顯著性差異(P0.05)。研究結(jié)論:1.成功從人胎盤組織中分離培養(yǎng)出HPMSCs,對(duì)其生物學(xué)特征鑒定后證明其符合干細(xì)胞特性;2.成功制備出符合實(shí)驗(yàn)要求的載VEGF/萬古霉素的海藻酸-殼聚糖多層載藥緩釋微球。3.通過多層載藥緩釋微球與HPMSCs共培養(yǎng),成功證明其對(duì)HPMSCs增殖活性無明顯影響,但能顯著改善HPMSCs的成骨活性。
【關(guān)鍵詞】：人胎盤源間充質(zhì)干細(xì)胞 生物學(xué)特性 多層載藥緩釋微球 VEGF
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R943
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 英文縮略詞表10-11
• 第1章 引言11-16
• 1.1 人胎盤源間充質(zhì)干細(xì)胞11-12
• 1.2 多藥載藥緩釋系統(tǒng)的研究進(jìn)展12-16
• 第2章 人胎盤源間充質(zhì)干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)及鑒定16-24
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料17-18
• 2.1.1 細(xì)胞來源17
• 2.1.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器及試劑17-18
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法18-20
• 2.2.1 主要試劑配制18-19
• 2.2.2 人胎盤源間充質(zhì)干細(xì)胞的分離及培養(yǎng)19
• 2.2.3 生長曲線繪制19
• 2.2.4 成骨誘導(dǎo)分化19
• 2.2.5 成脂誘導(dǎo)分化19-20
• 2.3 結(jié)果20-22
• 2.3.1 人胎盤源間充質(zhì)干細(xì)胞的分離及培養(yǎng)20
• 2.3.2 生長曲線繪制20-21
• 2.3.3 成骨誘導(dǎo)分化21
• 2.3.4 成脂誘導(dǎo)分化21-22
• 2.4 討論22-24
• 第3章 多層載藥微球?qū)PMSCS生物學(xué)活性影響24-33
• 3.1 實(shí)驗(yàn)材料24-26
• 3.2 實(shí)驗(yàn)方法26-28
• 3.2.1 多層載藥緩釋微球的制備26-27
• 3.2.2 多層載藥緩釋微球與HPMSCs共培養(yǎng)27
• 3.2.3 共培養(yǎng)后的HPMSCs增殖活性檢測27
• 3.2.4 共培養(yǎng)后的HPMSCs成骨誘導(dǎo)活性檢測27-28
• 3.2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析28
• 3.3 結(jié)果28-31
• 3.3.1 多層載藥緩釋微球的制備28
• 3.3.2 多層載藥緩釋微球與HPMSCs共培養(yǎng)28-29
• 3.3.3 共培養(yǎng)后的HPMSCs增殖活性檢測29
• 3.3.4 共培養(yǎng)后的HPMSCs成骨誘導(dǎo)活性檢測29-31
• 3.4 討論31-33
• 第4章 結(jié)論33-34
• 參考文獻(xiàn)34-38
• 作者簡介及在學(xué)期間取得的科研成果38-39
• 致謝39

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  本文關(guān)鍵詞：多層載藥微球型骨修復(fù)材料的制備及其對(duì)HPMSCs生物學(xué)活性影響的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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