本文關(guān)鍵詞：多層載藥微球型骨修復材料的制備及其對HPMSCs生物學活性影響的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究目的:1.人胎盤來源的間充質(zhì)干細胞(HPMSCs)已成為間充質(zhì)干細胞的重要獲得途徑,并被證明與其他來源間充質(zhì)干細胞相比有明顯的優(yōu)勢。本實驗嘗試從胎盤中分離培養(yǎng)HPMSCs,并對其生物學特征進行鑒定;2.在無菌環(huán)境中制備裝載VEGF/萬古霉素的藻酸鹽-殼聚糖多層緩釋微球,并檢測其對共培養(yǎng)的HPMSCs增殖活性及成骨活性有何影響。研究方法:1.將無菌條件下獲取的人足月胎盤組織帶回實驗室,采用組織塊貼壁法分離培養(yǎng)原代HPMSCs,MTT檢測細胞生長曲線,對HPMSCs進行成骨及成脂誘導驗證其多向分化潛能;2.按照前期實驗確定的多層載藥緩釋微球的制備方法,選擇試劑最優(yōu)配比,探索無菌環(huán)境中多層載藥緩釋微球的制備;將制備好的微球與HPMSCs共同培養(yǎng),CCK-8試劑盒檢測細胞增殖能力,茜素紅染色及ALP試劑盒檢測細胞成骨能力變化。研究結(jié)果:1.從人足月胎盤組織中分離培養(yǎng)的細胞呈成纖維細胞樣貼壁生長,生長曲線呈“S”形,成骨誘導后可見胞外鈣鹽沉積、茜素紅染色陽性,成脂誘導后油紅O染色陽性;2.經(jīng)改良后制得的多層載藥緩釋微球大小均勻、表面光滑圓整,細菌學檢測結(jié)果證明其符合無菌標準;3.共培養(yǎng)后的HPMSCs增殖能力無明顯改變(P0.05),成骨誘導后茜素紅染色顯示載藥微球組鈣鹽沉積明顯多于空載微球組及對照組,ALP試劑盒測試結(jié)果證實加入載藥微球后細胞內(nèi)堿性磷酸酶含量明顯增高(P0.05),空載組與無球組相比也有顯著性差異(P0.05)。研究結(jié)論:1.成功從人胎盤組織中分離培養(yǎng)出HPMSCs,對其生物學特征鑒定后證明其符合干細胞特性;2.成功制備出符合實驗要求的載VEGF/萬古霉素的海藻酸-殼聚糖多層載藥緩釋微球。3.通過多層載藥緩釋微球與HPMSCs共培養(yǎng),成功證明其對HPMSCs增殖活性無明顯影響,但能顯著改善HPMSCs的成骨活性。
【關(guān)鍵詞】：人胎盤源間充質(zhì)干細胞 生物學特性 多層載藥緩釋微球 VEGF
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R943
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 英文縮略詞表10-11
• 第1章 引言11-16
• 1.1 人胎盤源間充質(zhì)干細胞11-12
• 1.2 多藥載藥緩釋系統(tǒng)的研究進展12-16
• 第2章 人胎盤源間充質(zhì)干細胞的分離、培養(yǎng)及鑒定16-24
• 2.1 實驗材料17-18
• 2.1.1 細胞來源17
• 2.1.2 主要實驗儀器及試劑17-18
• 2.2 實驗方法18-20
• 2.2.1 主要試劑配制18-19
• 2.2.2 人胎盤源間充質(zhì)干細胞的分離及培養(yǎng)19
• 2.2.3 生長曲線繪制19
• 2.2.4 成骨誘導分化19
• 2.2.5 成脂誘導分化19-20
• 2.3 結(jié)果20-22
• 2.3.1 人胎盤源間充質(zhì)干細胞的分離及培養(yǎng)20
• 2.3.2 生長曲線繪制20-21
• 2.3.3 成骨誘導分化21
• 2.3.4 成脂誘導分化21-22
• 2.4 討論22-24
• 第3章 多層載藥微球?qū)PMSCS生物學活性影響24-33
• 3.1 實驗材料24-26
• 3.2 實驗方法26-28
• 3.2.1 多層載藥緩釋微球的制備26-27
• 3.2.2 多層載藥緩釋微球與HPMSCs共培養(yǎng)27
• 3.2.3 共培養(yǎng)后的HPMSCs增殖活性檢測27
• 3.2.4 共培養(yǎng)后的HPMSCs成骨誘導活性檢測27-28
• 3.2.5 統(tǒng)計學分析28
• 3.3 結(jié)果28-31
• 3.3.1 多層載藥緩釋微球的制備28
• 3.3.2 多層載藥緩釋微球與HPMSCs共培養(yǎng)28-29
• 3.3.3 共培養(yǎng)后的HPMSCs增殖活性檢測29
• 3.3.4 共培養(yǎng)后的HPMSCs成骨誘導活性檢測29-31
• 3.4 討論31-33
• 第4章 結(jié)論33-34
• 參考文獻34-38
• 作者簡介及在學期間取得的科研成果38-39
• 致謝39

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  本文關(guān)鍵詞：多層載藥微球型骨修復材料的制備及其對HPMSCs生物學活性影響的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：338462