本文關(guān)鍵詞：高氨損傷肝細(xì)胞中CPS-Ⅱ特異性表達(dá)變化的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的為了研究肝衰竭病理過程中血氨的代謝特點(diǎn),尤其是血氨通過氨基甲酰磷酸合酶Ⅱ(human carbamyi phosphate synthetase-Ⅱ, CPS-Ⅱ)途徑的基本機(jī)制,探索血氨升高對(duì)肝細(xì)胞損傷的基本規(guī)律,為高血氨在肝衰竭發(fā)生中的分子生物學(xué)機(jī)制提供理論基礎(chǔ)。方法體外構(gòu)建細(xì)胞高血氨模型,設(shè)定不同梯度濃度的氯化銨(NH4C1)干預(yù)肝細(xì)胞混合孵育,光鏡下觀察肝細(xì)胞形態(tài)變化,流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡率,Real-time PCR (RT-PCR)檢測(cè)CPS-Ⅱ基因表達(dá)情況,Western blot檢測(cè)CPS-Ⅱ蛋白定量。結(jié)果光鏡下干預(yù)組與對(duì)照組相比,隨著氨濃度的升高,肝細(xì)胞均出現(xiàn)不同程度的損傷、壞死和凋亡,對(duì)照組肝細(xì)胞形態(tài)良好。流式細(xì)胞儀分析發(fā)現(xiàn)肝細(xì)胞凋亡率逐漸增高,干預(yù)組細(xì)胞凋亡率(24.7%±2.39%)明顯上升,顯著高于對(duì)照組(4.1%±0.78%, q=8.06, P0.01). RT-PCR結(jié)果表明肝細(xì)胞中CPS-Ⅱ的mRNA的表達(dá)隨著氨濃度梯度呈升高的趨勢(shì),對(duì)照組與干預(yù)組CPS-Ⅱ的mRNA的灰度值分別為1.040±0.045、1.641±0.123、2.285±0.167、3.347±0.124與正常對(duì)照組相比,干預(yù)組CPS-Ⅱ的mRNA的表達(dá)逐漸增強(qiáng)(F=191.881, P0.01)。 Western blot結(jié)果顯示CPS-Ⅱ蛋白表達(dá)水平顯著增強(qiáng),CPS-Ⅱ蛋白與內(nèi)參GAPDH灰度值比值：0.099±0.0130,0.143±0.025、0.161±0.036和0.223±0.042,干預(yù)組均明顯高于對(duì)照組(t值分別為3.825、3.968和6.908,P0.01)。結(jié)論隨著肝細(xì)胞外氨濃度升高,CPS-Ⅱ在肝細(xì)胞損傷中mRNA水平和蛋白表達(dá)均增強(qiáng),表明在高氨情況下除鳥氨酸循環(huán)外,CPS-Ⅱ在參與氨代謝中可能發(fā)揮著重要作用。
【關(guān)鍵詞】：CPS-Ⅱ 氨代謝 氨
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R96
【目錄】：

• 摘要4-6
• abstract6-9
• 中英文縮略詞對(duì)照表9-10
• 研究背景10-17
• 前言17-21
• 1 材料和試劑21-24
• 2 實(shí)驗(yàn)方法24-28
• 結(jié)果28-31
• 討論31-34
• 參考文獻(xiàn)34-37
• 綜述37-48
• 參考文獻(xiàn)46-48
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷及在研期間發(fā)表論文48-49
• 致謝49

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 李夢(mèng)東,聶青和;糖皮質(zhì)激素治療重型肝炎的臨床及實(shí)驗(yàn)研究[J];實(shí)用肝臟病雜志;2005年01期

2 張曉群,孫聰;幽門螺桿菌與肝硬化肝性腦病關(guān)系的研究進(jìn)展[J];臨床消化病雜志;2005年02期

3 石家瑾;;氨的產(chǎn)生及其在運(yùn)動(dòng)中的作用和變化[J];貴州師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);1987年02期

4 Kazuyuki Matsumoto;Yasuhiro Miyake;Hirokazu Miyatake;Masahiro Takahara;Takayuki Imada;Satoru Yagi;Tatsuya Toyokawa;Morihito Nakatsu;Masaharu Ando;Mamoru Hirohata;;A combination treatment of entecavir and early-phase corticosteroid in severe exacerbation of chronic hepatitis B[J];World Journal of Gastroenterology;2009年13期

  本文關(guān)鍵詞：高氨損傷肝細(xì)胞中CPS-Ⅱ特異性表達(dá)變化的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號(hào)：337364