本文關(guān)鍵詞：中國南海新型A-超家族芋螺多肽的合成及功能研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:本課題開展中國南海新型A-超家族芋螺多肽的合成、結(jié)構(gòu)測定及功能研究,該工作可為這些多肽新功能的發(fā)現(xiàn)、新型鎮(zhèn)痛藥物及神經(jīng)生物學(xué)工具藥研制奠定基礎(chǔ)。方法:(1)使用ABI433A合成儀,用Fmoc-固相合成的方法,再通過裂解、空氣氧化一步折疊、富集、純化等合成新型A-超家族芋螺多肽及其突變體。(2)雙電極電壓鉗測定A-超家族芋螺多肽對(duì)煙堿型乙酰膽堿受體的作用靶點(diǎn)。(3)兩步氧化折疊法測定A-超家族芋螺多肽的二硫鍵配對(duì)方式。結(jié)果:(1)合成了14種A-超家族芋螺多肽的純品,分別是:Bt1.8、Vi1.6、Bt1.10、Lt1.1、Lt1.2、Lt1.3、Lt1.4、Im1.2、Bt14.10、Bt14.11、Bt14.14、Bt14.15、Bt14.19、Em14.1。(2)對(duì)其中11種A-超家族芋螺多肽進(jìn)行了煙堿型乙酰膽堿受體靶點(diǎn)的初篩,發(fā)現(xiàn)α-芋螺毒素Bt1.10和Lt1.3作用于煙堿型乙酰膽堿受體α3β2亞型,IC50分別為52.94 n M和44.78 n M,而Bt1.8、Lt1.1和Lt1.2作用于α3β2和α3β4亞型,IC50分別為9.36 n M、166.76 n M和164.74 n M。(3)設(shè)計(jì)合成了Bt1.8的4個(gè)突變體,分別為:Bt1.8[N5H]、Bt1.8[I9A]、Bt1.8[N11E]和Bt1.8[Q15A],發(fā)現(xiàn)Bt1.8及其4個(gè)突變體對(duì)α3β2亞型的活性順序?yàn)?Bt1.8[N5H]異構(gòu)體1Bt1.8Bt1.8[Q15A]Bt1.8[N5H]異構(gòu)體2Bt1.8[I9A]Bt1.8[N11E]。(4)設(shè)計(jì)合成了Vi1.6的4個(gè)突變體,分別為:Vi1.6[R1A]、Vi1.6[D2A]、Vi1.6[H11A]和Vi1.6[+16L],發(fā)現(xiàn)Vi1.6及其4個(gè)突變體對(duì)α3β2亞型的活性順序?yàn)?Vi1.6[+16L]Vi1.6[R1A]Vi1.6Vi1.6[D2A]Vi1.6[H11A]。(5)對(duì)Bt1.8和Vi1.6進(jìn)行了二硫鍵的測定,兩者二硫鍵均為“C1-C3,C2-C4”。結(jié)論:(1)α-芋螺多肽Bt1.8對(duì)n ACh Rα3β2亞型抑制作用很強(qiáng),其中9位的異亮氨酸、11位的天冬酰胺和15位的谷氨酰胺在其與α3β2的結(jié)合中起關(guān)鍵作用。(2)Vi1.6對(duì)α3β2亞型有選擇性抑制作用,其第1位的精氨酸和第11位的組氨酸是功能氨基酸,在其第16位引入疏水殘基能顯著增強(qiáng)其對(duì)α3β2亞型的抑制作用。(3)α-芋螺多肽Lt1.1和Lt1.2選擇性作用于神經(jīng)元n ACh Rs的α3β2和α3β4亞型,而Bt1.10和Lt1.3則只作用于神經(jīng)元n ACh R的α3β2亞型。(4)含四個(gè)單半胱氨酸結(jié)構(gòu)的新型A-超家族芋螺多肽:Bt14.11、Bt14.14、Bt14.15和Bt14.19對(duì)神經(jīng)元n ACh Rs的各亞型活性較弱。
【關(guān)鍵詞】：A-超家族芋螺多肽 多肽合成 靶點(diǎn)鑒定 神經(jīng)元煙堿型乙酰膽堿受體
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R914
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-11
• 符號(hào)說明11-12
• 第1章 緒論12-20
• 1.1 前言12-13
• 1.2 作用于nAChRs的芋螺毒素13-18
• 1.3 A-超家族芋螺毒素18-19
• 1.4 本實(shí)驗(yàn)研究的目的、內(nèi)容和意義19-20
• 第2章 新型A-超家族芋螺多肽的合成20-36
• 2.1 引言20-21
• 2.2 實(shí)驗(yàn)材料21
• 2.3 實(shí)驗(yàn)方法21-22
• 2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果22-34
• 2.5 討論34-36
• 第3章 新型A-超家族芋螺多肽對(duì)nAchRs的抑制作用研究36-54
• 3.1 引言36
• 3.2 實(shí)驗(yàn)材料36-37
• 3.3 實(shí)驗(yàn)方法37-41
• 3.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果41-52
• 3.5 討論52-54
• 第4章 兩個(gè)新型A-超家族芋螺多肽的二硫鍵配對(duì)方式及CD譜測定54-60
• 4.1 引言54
• 4.2 實(shí)驗(yàn)材料54-55
• 4.3 實(shí)驗(yàn)方法55-56
• 4.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果56-59
• 4.5 討論59-60
• 第5章 結(jié)論60-62
• 參考文獻(xiàn)62-70
• 文獻(xiàn)綜述70-80
• 參考文獻(xiàn)76-80
• 作者攻讀學(xué)位期間的科研成果80-82
• 致謝82

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1 隋黎明;呂寶璋;;甾體激素受體超家族[J];國外醫(yī)學(xué)(分子生物學(xué)分冊);1990年04期

2 袁多多;王春光;;M-超家族芋螺毒素研究進(jìn)展[J];生命科學(xué);2006年05期

3 陳偉華;王志強(qiáng);韓禹宏;;A-超家族芋螺毒素研究進(jìn)展[J];生命科學(xué);2006年04期

4 邱惠,張友元;胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白7的研究進(jìn)展[J];武漢科技大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2002年04期

5 桂朗;王兵;李富花;相建海;;四跨膜蛋白超家族tetraspanins的免疫功能研究進(jìn)展[J];生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展;2008年11期

6 軒東英 ,張建波;胚胎發(fā)育期TGF-β超家族成員與腭裂發(fā)生的關(guān)系[J];國外醫(yī)學(xué).口腔醫(yī)學(xué)分冊;2004年02期

7 胡杰;楊曉宇;;TGF-β抑制型結(jié)合蛋白FLRG的研究進(jìn)展[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2008年09期

8 孫瑞珍;程琳;單智焱;劉春佳;張家新;雷蕾;劉忠華;;卵泡發(fā)生過程中GDF-9和BMP-15(GDF-9B)的作用[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2009年17期

9 季海濤,張萬年,周有駿,呂加國,朱駒,朱杰;細(xì)胞色素P450超家族4種蛋白質(zhì)晶體結(jié)構(gòu)比較研究[J];生物化學(xué)與生物物理學(xué)報(bào);1998年05期

10 魏守剛;硒對(duì)糖皮質(zhì)激素等三種核受體的影響[J];國外醫(yī)學(xué)(衛(wèi)生學(xué)分冊);2000年04期

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1 季星來;孫之榮;;基于結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)超家族進(jìn)化研究[A];第九次全國生物物理大會(huì)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要集[C];2002年

2 黃京飛;Tom L.Blundell;;酪氨酸磷酸酶超家族序列與結(jié)構(gòu)的比較研究[A];生命科學(xué)與生物技術(shù)：中國科協(xié)第三屆青年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];1998年

3 袁多多;劉麗;郭占云;戚正武;;新型I3-超家族芋螺毒素的分離純化及基因克隆[A];第八屆中國生物毒素學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要集[C];2007年

4 袁多多;劉麗;郭占云;戚正武;;新型I3-超家族芋螺毒素的分離純化及基因克隆[A];第八屆中國生物毒素學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要[C];2007年

5 曹瑛;隋媛媛;蔣輝;范崇旭;代先東;劉尚義;陳冀勝;;新結(jié)構(gòu)T-超家族芋螺毒素的基因克隆及序列分析[A];第八屆中國生物毒素學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要[C];2007年

6 曹瑛;隋媛媛;蔣輝;范崇旭;代先東;劉尚義;陳冀勝;;新結(jié)構(gòu)T-超家族芋螺毒素的基因克隆及序列分析[A];第八屆中國生物毒素學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要集[C];2007年

7 黃京飛;;蛋白質(zhì)超家族的序列識(shí)別[A];西部大開發(fā) 科教先行與可持續(xù)發(fā)展——中國科協(xié)2000年學(xué)術(shù)年會(huì)文集[C];2000年

8 郎大田;張亞平;于黎;;胰核糖核酸酶超家族(RNASE A)的分子進(jìn)化[A];中國遺傳學(xué)會(huì)第九次全國會(huì)員代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要匯編（2009-2013）[C];2013年

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1 董秀華;Necl-1 Ig like V domain的晶體學(xué)研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2005年

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1 孫亭亭;煙草分枝異常類型突變體基因鑒定及相關(guān)家族分析[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2015年

2 劉長軍;雷氏大疣蛛毒腺轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究[D];湖南師范大學(xué);2012年

3 李靚;中國南海新型A-超家族芋螺多肽的合成及功能研究[D];南華大學(xué);2015年

4 劉芬;基于不同氨基酸分布的蛋白質(zhì)超家族的識(shí)別[D];內(nèi)蒙古大學(xué);2006年

5 馬淑杰;蛋白質(zhì)超家族模體特征的分析與超家族的識(shí)別[D];內(nèi)蒙古大學(xué);2009年

6 李業(yè)龍;玉米生殖組織中小分泌蛋白的分析[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

  本文關(guān)鍵詞：中國南海新型A-超家族芋螺多肽的合成及功能研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號(hào)：337137