“Cocktail”探針?biāo)幬锓ㄔu價(jià)丹參酮ⅡA對大鼠肝微粒體細(xì)胞色素P450不同亞型體外代謝活性的影響
本文關(guān)鍵詞：“Cocktail”探針?biāo)幬锓ㄔu價(jià)丹參酮ⅡA對大鼠肝微粒體細(xì)胞色素P450不同亞型體外代謝活性的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】：目的： 建立評價(jià)大鼠肝微粒體藥物代謝酶細(xì)胞色素P450(Cytochrome P450, CYP450)不同亞型CYP1A2、CYP2D6、CYP2C19、CYP2C9、CYP2E1和CYP3A4活性的'Cocktail"探針?biāo)幬锶芤旱母咝б合嗌V檢測方法；優(yōu)化肝微粒體孵育條件,建立肝微粒體體外孵育體系,研究丹參酮IⅡA對大鼠肝微粒體該6種主要CYP450亞型體外代謝活性的影響,為臨床合理用藥提供參考。 方法： 選擇CYP1A2、CYP2D6、CYP2C19、CYP2C9、CYP2E1和CYP3A4的特異性代謝底物咖啡因、美托洛爾、奧美拉唑、甲苯磺丁脲、氯唑沙宗和咪達(dá)唑侖制備成"Cocktail"探針溶液,建立同時(shí)測定該6種探針?biāo)幬镌诟挝⒘ｓw中的高效液相色譜檢測方法。通過優(yōu)化微粒體蛋白濃度和孵育時(shí)間,建立肝微粒體體外孵育體系。研究丹參酮ⅡA對大鼠肝微粒體內(nèi)6種主要CYP亞型活性的影響。實(shí)驗(yàn)分三組進(jìn)行：丹參酮ⅡA組、空白對照組和無活性組(不加大鼠肝微粒體組),每組實(shí)驗(yàn)平行三個(gè)樣本。應(yīng)用高效液相色譜-紫外檢測(HPLC-UV)法檢測大鼠肝微粒體中丹參酮ⅡA對探針底物代謝剩余量的影響,得到酶活性百分?jǐn)?shù),以丹參酮ⅡA濃度的對數(shù)為橫坐標(biāo),以酶活性百分?jǐn)?shù)為縱坐標(biāo),使用GraphPad Prism5.0軟件按照非線性回歸,作圖并計(jì)算IC50值。評價(jià)丹參酮ⅡA在大鼠肝微粒體孵育體系中對CYP1A2、CYP2D6、CYP2C19、CYP2C9、CYP2E1和CYP3A4體外代謝活性的影響。 結(jié)果： 1.本研究所建立的高效液相色譜方法,可以同時(shí)測定6種探針?biāo)幬锟Х纫�、美托洛爾、氯唑沙宗、奧美拉唑、甲苯磺丁脲和咪達(dá)唑侖在肝微粒體中的濃度,各吸收峰分離完全,線性關(guān)系良好,準(zhǔn)確度、精密度及穩(wěn)定性均符合生物樣本檢測要求,操作簡便。 2.低濃度(0.5、1、2、4、8、16μmol·L-1)丹參酮ⅡA對大鼠肝微粒CYP1A2、 CYP2D6、CYP2C19、CYP2C9、CYP2E1和CYP3A4酶活性無顯著性影響(P0.05),而高濃度(32和96μmol·L-1)丹參酮ⅡA對大鼠肝微粒CYP1A2、 CYP2D6、CYP2C19、CYP2C9和CYP2E1酶活性具有抑制作用(P0.05)。丹參酮ⅡA對大鼠肝微粒CYP1A2、CYP2D6、CYP2C19、CYP2C9、CYP2E1的IC50值分別為32.48、34.76、26.12、26.29和26.38μmol·L-1,表示對其具有弱抑制作用。 結(jié)論： 1.本研究建立的大鼠肝微粒體中的'Cocktail"探針?biāo)幬锓ú僮骱啽?精密度、準(zhǔn)確度、靈敏度高,檢測周期短,能夠同時(shí)評價(jià)藥物在體外對大鼠肝微粒體6種主要CYP450亞型CYP1A2、CYP2D6、CYP2C19、CYP2C9、CYP2E1和CYP3A4活性的影響。 2.丹參酮ⅡA在體外大鼠肝微粒孵育體系中對CYP1A2、CYP2D6、 CYP2C19、CYP2C9和CYP2E1的代謝活性具有較弱的抑制作用。臨床上通常不易發(fā)生代謝性藥物相互作用。
【關(guān)鍵詞】：細(xì)胞色素P450 酶(CYP450) 大鼠肝微粒體“Cocktail”探針?biāo)幬锓?/strong> 高效液相色譜 丹參酮ⅡA藥物相互作用
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號】：R96
【目錄】：
- 中文摘要4-6
- ABSTRACT6-10
- ~.略語10-11
- 前言11-15
- 研究現(xiàn)狀、成果11-14
- 研究目的、方法14-15
- 一、“Cocktail”探針?biāo)幬锏闹苽浼癏PLC方法的建立15-31
- 1 實(shí)驗(yàn)材料15-16
- 2 實(shí)驗(yàn)方法16-19
- 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果19-30
- 3.1 方法的專一性19-21
- 3.2 肝微粒體標(biāo)準(zhǔn)曲線21-25
- 3.3 肝微粒體樣品的靈敏度25-26
- 3.4 精密度實(shí)驗(yàn)結(jié)果26-28
- 3.5 回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果28-30
- 3.6 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果30
- 4 小結(jié)30-31
- 二、“Cocktail”探針?biāo)幬锓ㄔu價(jià)丹參酮ⅡA對大鼠肝微粒體CYP450不同亞型體外代謝活性的影響31-41
- 1 實(shí)驗(yàn)材料31-32
- 2 實(shí)驗(yàn)方法32-35
- 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果35-40
- 3.1 不同濃度丹參酮ⅡA對大鼠肝微粒體CYPs酶活性的影響35-36
- 3.2 抑制曲線及IC_(50)結(jié)果36-40
- 4 小結(jié)40-41
- 討論41-48
- 結(jié)論48-49
- 參考文獻(xiàn)49-54
- 發(fā)表論文和參加科研情況說明54-55
- 綜述55-75
- 綜述參考文獻(xiàn)71-75
- 致謝75
【參考文獻(xiàn)】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條
1 梅玫;陸偉;;細(xì)胞色素P450 2E1在脂肪性肝病中致病作用研究進(jìn)展[J];實(shí)用肝臟病雜志;2007年01期
2 周權(quán),姚彤煒,曾蘇;代謝性藥物的相互作用[J];中國臨床藥理學(xué)雜志;2001年04期
3 許振華，周宏灝;細(xì)胞色素氧化酶P4501A2與藥物代謝[J];中國臨床藥理學(xué)雜志;1996年02期
4 Bernstein JE;李軍霞;;辣椒素與P物質(zhì)[J];國外醫(yī)學(xué).皮膚性病學(xué)分冊;1993年03期
5 李健,文思遠(yuǎn),王升啟;細(xì)胞色素P450基因突變及其效應(yīng)的研究進(jìn)展[J];國外醫(yī)學(xué).藥學(xué)分冊;2004年06期
6 潘偉;張磊;習(xí)志剛;楊紅;;細(xì)胞色素氧化酶CYP2C9基因多態(tài)性與藥物代謝[J];廣州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2007年01期
7 李靖濤,張明磊,樸云峰;細(xì)胞色素P4502E1基因在肝臟疾病中的意義[J];臨床肝膽病雜志;2001年02期
8 高志偉;施孝金;鐘明康;;細(xì)胞色素P450酶與藥物相互作用研究進(jìn)展[J];中國臨床藥學(xué)雜志;2006年06期
9 吳育晶;程能能;胡卓漢;陳斌艷;王永銘;;五味子及木脂素成分對肝CYP3A酶活性的影響[J];中國臨床藥學(xué)雜志;2007年05期
10 張巍;王季石;楊遠(yuǎn);方琴;;細(xì)胞色素氧化酶P450 3A4基因聯(lián)合環(huán)磷酰胺的體外抗腫瘤效應(yīng)[J];復(fù)旦學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2009年04期
中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條
1 周江泉;細(xì)胞色素P450酶和抗癌藥物代謝研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2006年
本文關(guān)鍵詞：“Cocktail”探針?biāo)幬锓ㄔu價(jià)丹參酮ⅡA對大鼠肝微粒體細(xì)胞色素P450不同亞型體外代謝活性的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
，本文編號：333958
本文鏈接：http://sikaile.net/yixuelunwen/yxlw/333958.html
