發(fā)布時(shí)間：2017-04-28 07:14

  本文關(guān)鍵詞：長(zhǎng)效GLP-1-IgG2σ Fc融合蛋白的真核表達(dá)與生物活性鑒定，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:在真核細(xì)胞中融合表達(dá)胰高血糖素樣肽1(GLP-1),純化后探究產(chǎn)物的生物學(xué)活性。方法:通過預(yù)留酶切位點(diǎn)將合成的GLP-1-Ig G2σFc融合蛋白表達(dá)序列連入表達(dá)載體質(zhì)粒,用電轉(zhuǎn)方法將線性化質(zhì)粒穩(wěn)定轉(zhuǎn)染CHO-K1細(xì)胞,通過亞克隆篩選出蛋白高表達(dá)細(xì)胞株;收集高表達(dá)細(xì)胞株培養(yǎng)上清并初步純化,采用口服葡萄糖耐量試驗(yàn)(OGTT)探究GLP-1融合蛋白降低血糖的生物學(xué)活性。結(jié)果:經(jīng)過一輪亞克隆,篩選得到的細(xì)胞株的GLP-1融合蛋白產(chǎn)量達(dá)1 g/L,OGTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明GLP-1融合蛋白具有降血糖生物活性。結(jié)論:GLP-1變體和Ig G2σ的Fc段連接是一種可行的融合蛋白形式,融合蛋白具有GLP-1受體激動(dòng)劑的降糖作用,并且細(xì)胞株的篩選方式和初步純化方法也具有可行性,為后續(xù)的體內(nèi)、外活性研究和純化方法確定提供了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 安徽醫(yī)科大學(xué);軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院放射與輻射醫(yī)學(xué)研究所;
【關(guān)鍵詞】： 胰高血糖素樣肽 受體激動(dòng)劑 融合蛋白 真核表達(dá) 口服葡萄糖耐量試驗(yàn)
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(81272701)
【分類號(hào)】：R392;Q78
【正文快照】： 胰高血糖素樣肽1(glucagon like peptide-1,GLP-1)是由胰高血糖素原基因編碼的一種腸促胰島素激素,由腸道L細(xì)胞在接受進(jìn)食刺激后合成分泌[1]�；谄溲且蕾囆缘拇龠M(jìn)胰島素分泌作用和抑制胰高血糖素釋放作用,GLP-1成為一種極具潛力的糖尿病治療藥物。然而,制約GLP-1成藥的主

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本文編號(hào)：332359