本文關(guān)鍵詞：QIC1抑制EGFR-STAT3-HKⅡ信號(hào)通路誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:表皮生長因子受體(EGFR)對(duì)人類腫瘤增殖具有重要作用,是癌癥治療的有效靶目標(biāo)。本研究將對(duì)以EGFR為靶點(diǎn)合成的20種新的喹諾酮-吲哚酮衍生物單體進(jìn)行抗腫瘤活性篩選,獲得活性最強(qiáng)的化合物,并研究其作用機(jī)制及其對(duì)耐藥腫瘤細(xì)胞的影響。方法:MTT(3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴鹽)法篩選20種喹諾酮-吲哚酮衍生物單體對(duì)人類肝癌Hep G-2細(xì)胞、人類乳腺癌MCF-7細(xì)胞、人類肺腺癌A549細(xì)胞及人類宮頸癌Hela細(xì)胞的活性,獲得抗腫瘤活性最強(qiáng)的單體成分;流式細(xì)胞儀檢測該單體化合物對(duì)腫瘤細(xì)胞周期的影響;高內(nèi)涵活細(xì)胞成像系統(tǒng)分析該單體化合物對(duì)腫瘤細(xì)胞凋亡的影響;Western blotting檢測該單體化合物對(duì)腫瘤細(xì)胞中EGFR、p-EGFR、STAT3、p-STAT3、HKⅡ蛋白及細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)水平的影響。結(jié)果:1、從20種喹諾酮-吲哚酮衍生物單體中篩選出抗腫瘤活性最強(qiáng)的單體成分--QIC1{9-氟-3-甲基-10-(4-甲基哌嗪-1-基)-6-[(Z)-(2-羰基-1,2-二氫-3H-吲哚-3-亞甲基)甲基]-2,3-二氫-7H-[1,4]氧雜聯(lián)氮基[2,3,4-ij]喹啉-7-酮}。2、QIC1對(duì)Hep G-2、MCF-7、A549細(xì)胞的抗增殖作用明顯強(qiáng)于陽性對(duì)照蘇尼替尼(Sunitinib)。QIC1對(duì)Hep G-2、MCF-7、A549細(xì)胞作用48h的IC50分別為:2.44±0.63μmol/L、1.85±0.54μmol/L、2.69±0.03μmol/L;陽性對(duì)照Sunitinib對(duì)Hep G-2、MCF-7、A549作用48 h的IC50分別為:16.66±0.93μmol/L、17.96±1.13μmol/L、8.77±1.38μmol/L。3、而QIC1對(duì)正常肝細(xì)胞QSG7701(IC50=17.91±0.14μmol/L)的毒性與陽性對(duì)照Sunitinib(IC50=17.00±0.16μmol/L)對(duì)正常肝細(xì)胞QSG7701的毒性相似。4、QIC1阻滯Hep G-2細(xì)胞周期于G2/M期,且呈劑量依賴性;QIC1使A549細(xì)胞S期細(xì)胞減少,可能抑制A549細(xì)胞DNA的合成。5、QIC1可呈劑量依賴性地誘導(dǎo)Hep G-2、A549及MCF-7細(xì)胞凋亡,可促使Bax表達(dá)增加,同時(shí)抑制Bcl-2表達(dá)。6、QIC1下調(diào)EGFR的活性進(jìn)而影響下游的STAT3,調(diào)節(jié)HKⅡ信號(hào)通路。7、QIC1抑制人類乳腺癌耐藥細(xì)胞MCF-7/DOX的增殖并增強(qiáng)阿霉素對(duì)MCF-7/DOX細(xì)胞的抗腫瘤活性。結(jié)論:新的喹諾酮-吲哚酮衍生物QIC1可通過EGFR-STAT3-HKⅡ通路抑制腫瘤細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡,并可逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞的耐藥性。
【關(guān)鍵詞】：喹諾酮-吲哚酮衍生物QIC1 EGFR通路 己糖激酶 細(xì)胞增殖 細(xì)胞凋亡
【學(xué)位授予單位】：河南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R96
【目錄】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-11
• 引言11-15
• 第一部分 喹諾酮-吲哚酮衍生物抗腫瘤活性的篩選15-25
• 1.1 實(shí)驗(yàn)材料15-17
• 1.1.1 主要儀器15-16
• 1.1.2 細(xì)胞株16
• 1.1.3 藥品與試劑16
• 1.1.4 藥品與試劑配制方法16-17
• 1.1.5 喹諾酮-吲哚酮衍生物17
• 1.2 實(shí)驗(yàn)方法17-18
• 1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)17
• 1.2.2 MTT法篩選20種喹諾酮-吲哚酮衍生物單體的抗腫瘤活性17-18
• 1.2.3 數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計(jì)學(xué)分析18
• 1.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果18-23
• 1.4 討論23
• 1.5 小結(jié)23-25
• 第二部分 QIC1的抗腫瘤活性及分子機(jī)制研究25-45
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料26-30
• 2.1.1 主要儀器26-27
• 2.1.2 細(xì)胞株27
• 2.1.3 藥品與試劑27-28
• 2.1.4 藥品與試劑配制方法28-30
• 2.1.5 QIC1及陽性對(duì)照蘇尼替尼（Sunitinib）30
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法30-34
• 2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)30
• 2.2.2 MTT法檢測QIC1的抗腫瘤活性30-31
• 2.2.3 細(xì)胞周期檢測31
• 2.2.4 細(xì)胞凋亡檢測31-32
• 2.2.5 Western Blotting32-34
• 2.2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析34
• 2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果34-42
• 2.3.1 QIC1對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖的影響34-36
• 2.3.2 QIC1對(duì)腫瘤細(xì)胞周期的影響36-37
• 2.3.3 QIC1對(duì)腫瘤細(xì)胞凋亡的影響37-40
• 2.3.4 QIC1對(duì)EGFR-STAT3-HKⅡ信號(hào)通路的影響40-42
• 2.4 討論42-44
• 2.5 小結(jié)44-45
• 第三部分 QIC1逆轉(zhuǎn)人類乳腺癌MCF-7/DOX耐藥細(xì)胞的耐藥性45-57
• 3.1 實(shí)驗(yàn)材料46-50
• 3.1.1 主要儀器46
• 3.1.2 細(xì)胞株46
• 3.1.3 藥品與試劑46-47
• 3.1.4 藥品與試劑配制方法47-50
• 3.1.5 QIC1及阿霉素（DOX)50
• 3.2 實(shí)驗(yàn)方法50-53
• 3.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)50
• 3.2.2 RT-PCR50-51
• 3.2.3 Western Blotting51-52
• 3.2.4 MTT法檢測QIC1對(duì)耐藥腫瘤細(xì)胞生長的影響52-53
• 3.2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析53
• 3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果53-55
• 3.4 討論55-56
• 3.5 小結(jié)56-57
• 參考文獻(xiàn)57-61
• 英文縮略詞表（ABBREVIATIONS AND ACRONYMS）61-63
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄63-65
• 致謝65-66

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本文編號(hào)：329851