本文關(guān)鍵詞：安菲博肽對(duì)小鼠局灶性腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：缺血性腦血管疾病是指由于多種因素引起腦血流中斷,造成局部區(qū)域缺血缺氧,從而導(dǎo)致神經(jīng)功能障礙的一類(lèi)中樞神經(jīng)系統(tǒng)常見(jiàn)病和多發(fā)病。臨床采用的溶栓治療和機(jī)械再通可及時(shí)恢復(fù)血液供應(yīng),但不可避免會(huì)繼發(fā)嚴(yán)重的缺血再灌注損傷(cerebral ischemia-reperfusion injury),進(jìn)一步加重病情。本課題所用的安菲博肽(Anfibatide,ANF)是從我國(guó)皖南尖吻蝮蛇蛇毒中分離純化得到的多肽,是一種特異性血小板膜糖蛋白(glycoprotein,GP)Ib受體拮抗劑。本課題組已報(bào)道了ANF可以有效降低腦缺血再灌注損傷模型小鼠的腦梗死體積并且促進(jìn)神經(jīng)功能恢復(fù)。本課題進(jìn)一步研究了ANF對(duì)腦缺血再灌注損傷小鼠的保護(hù)作用及其可能的作用機(jī)制。目的:探討安菲博肽(ANF)對(duì)急性局灶性腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及其可能的作用機(jī)制。方法:使用改良線(xiàn)栓法制備小鼠右側(cè)大腦中動(dòng)脈阻塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)致局灶性腦缺血再灌注模型。雄性昆明小鼠隨機(jī)分為:假手術(shù)組,模型組,ANF(1,2,4 ug/kg)組和陽(yáng)性藥替羅非班(Tirofiban,TRF,0.5 mg/kg)組。缺血90 min再灌注1 h后尾靜脈給藥。再灌注24 h,分別檢測(cè)各組小鼠以下指標(biāo):磁共振T2加權(quán)成像法(T2-weighted imaging,MRI-T2WI)測(cè)腦梗死體積;改良神經(jīng)功能缺損評(píng)分法(modified neurological severity score,m NSS)進(jìn)行神經(jīng)功能評(píng)分;爬板實(shí)驗(yàn)觀察平衡和運(yùn)動(dòng)功能;尼氏染色和蘇木素-伊紅染色(hematoxylin and eosin,HE)染色分別觀察缺血腦組織神經(jīng)元完整性和微血栓數(shù)量變化;伊文思藍(lán)法(evans blue,EB)觀察血腦屏障通透性改變;免疫熒光雙標(biāo)法(immunofluorescence,IF)檢測(cè)缺血腦組織血小板膜糖蛋白(platelet membrane glycoprotein,GP)Ibα和血管假性血友病因子(von Willebrand Factor,v WF)的表達(dá);免疫組織化學(xué)法(immunohistochemistry,IHC)檢測(cè)缺血腦組織P-選擇素(P-selectin)和巨噬細(xì)胞分化抗原-1(macrophage-1 antigen,MAC-1)蛋白的表達(dá);IHC和免疫印跡法(western blotting,WB)檢測(cè)缺血腦組織纖維蛋白(Fibrin(ogen))的表達(dá);測(cè)定尾靜脈出血時(shí)間觀察止血功能;darkbin’s法觀察缺血腦組織出血含量;測(cè)定血小板計(jì)數(shù)觀察血小板數(shù)量變化。結(jié)果:ANF能明顯降低缺血再灌注小鼠腦梗死體積,改善神經(jīng)功能和運(yùn)動(dòng)協(xié)調(diào)功能;提高完整神經(jīng)元數(shù)量以及減少腦內(nèi)微血栓數(shù)量;降低血腦屏障通透性,降低腦內(nèi)GPIbα和v WF的豐度,抑制P-selectin,MAC-1以及Fibrin(ogen)蛋白的表達(dá)。與TRF組相比,ANF不僅縮短出血時(shí)間,而且明顯減少腦出血。ANF對(duì)血小板數(shù)量無(wú)明顯影響。結(jié)論:ANF對(duì)線(xiàn)栓法所致小鼠局灶性腦缺血再灌注損傷具有較好的保護(hù)作用,且有效減少腦出血并發(fā)癥。其機(jī)制可能與抑制GPIbα與v WF,P-selectin和MAC-1的結(jié)合而阻止血小板的粘附與聚集,減少Fibrin(ogen)的聚積而降低微血栓形成有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：腦缺血再灌注損傷 安菲博肽 血小板膜糖蛋白Ib 作用機(jī)制
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R965
【目錄】：

• 英文縮略詞對(duì)照表5-7
• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-11
• 1 前言11-12
• 2 實(shí)驗(yàn)材料12-15
• 3 實(shí)驗(yàn)方法15-23
• 4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果23-37
• 5 討論37-44
• 6 結(jié)論44-45
• 參考文獻(xiàn)45-52
• 附錄52-53
• 致謝53-54
• 綜述54-65
• 參考文獻(xiàn)61-65

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 孫艷;張洹;譚廣銷(xiāo);;小鼠線(xiàn)栓法局灶性腦缺血再灌注模型的改良[J];暨南大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)與醫(yī)學(xué)版);2005年06期

2 魏爾清,朱朝陽(yáng),徐秋琴,俞月萍,朱也飛,鄭敏之;一種改進(jìn)的小鼠局灶性腦缺血神經(jīng)癥狀定量評(píng)價(jià)方法[J];生理學(xué)報(bào);2003年06期

3 王家驥,王取南,徐德祥,孫美芳,李兆羿,承新;抗血小板溶栓素的生物相容性及免疫毒性實(shí)驗(yàn)研究[J];衛(wèi)生毒理學(xué)雜志;1999年04期

  本文關(guān)鍵詞：安菲博肽對(duì)小鼠局灶性腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：315421