本文關(guān)鍵詞：功能高分子納米微球的制備及在生物醫(yī)藥方面的應(yīng)用，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:制備聚甲基丙烯酸縮水甘油酯(PGMA)材質(zhì)的有機(jī)高分子微球,研究不同的反應(yīng)溫度、轉(zhuǎn)速、單體和引發(fā)劑濃度、乳化劑用量、交聯(lián)劑用量對(duì)PGMA粒徑、粒度分布系數(shù)(PDI)以及穩(wěn)定性的影響規(guī)律;研究PGMA微球與毛細(xì)管內(nèi)壁的化學(xué)鍵合方法,制備PGMA納米粒子(PGMA NPs)涂層毛細(xì)管柱,以提高毛細(xì)管內(nèi)壁比表面積,研究制備的新型納米顆粒涂層毛細(xì)管柱的開(kāi)管毛細(xì)管電色譜(OTCEC)分離性能。探索制備羧化的磁性納米微球(MNPs)的新方法,并采用點(diǎn)擊化學(xué)的抗體定向固定化方法對(duì)其表面進(jìn)行修飾,制備免疫磁性微球�？疾烀庖叽判晕⑶�?qū)в邢鄳?yīng)抗原的腫瘤細(xì)胞的磁分離性能,以期開(kāi)發(fā)出新型的腫瘤靶向免疫制劑。研究了合成和純化對(duì)疊氮苯甲酰肼的方法,并將其作為交聯(lián)劑用于抗體定向固定化中。方法:采用乳液聚合法,以過(guò)硫酸鉀(KPS)為引發(fā)劑,十二烷基硫酸鈉(SDS)為乳化劑,二甲基丙烯酸乙二醇酯(EDMA)為交聯(lián)劑,甲基丙烯酸縮水甘油酯(GMA)為聚合單體制備PGMA高分子微球。通過(guò)系列地改變條件,在不同的溫度、轉(zhuǎn)速及引發(fā)劑濃度等條件下進(jìn)行聚合反應(yīng)。然后用粒度分析儀測(cè)定所得微球的粒徑及粒度分布系數(shù)(PDI),用掃描電子顯微鏡(SEM)觀察微球形貌,考察聚合體系的成球性能以及各種因素對(duì)微球粒徑的影響規(guī)律。利用PGMA微球表面的環(huán)氧基與氨基修飾的毛細(xì)管內(nèi)表面之間的開(kāi)環(huán)反應(yīng),將PGMA微球固定到毛細(xì)管內(nèi)壁上。用SEM觀測(cè)納米粒子涂覆在毛細(xì)管內(nèi)壁的情況。隨后,PGMA NPs涂層柱用賴氨酸活化,用于氨基酸混合物的分離。考察了制得的納米顆粒涂層管柱的批內(nèi)、批間分離結(jié)果重現(xiàn)性,并將結(jié)果與賴氨酸直接修飾的毛細(xì)管柱取得的相應(yīng)結(jié)果進(jìn)行比較。以溶劑熱法制備單分散的羧化的MNPs,考察了反應(yīng)溫度,反應(yīng)時(shí)間,丙烯酸鈉/醋酸鈉等對(duì)成球的影響,得到了最佳反應(yīng)條件。用紅外分析光譜(IR)和透射電子顯微鏡(TEM)以及X射線衍射(XRD)對(duì)其性能和結(jié)構(gòu)進(jìn)行表征。采用點(diǎn)擊化學(xué)的方法將抗體定向固定化于MNPs的表面,將其應(yīng)用于腫瘤細(xì)胞磁分離的實(shí)驗(yàn)中,并將分離結(jié)果與采用非定向抗體固定化方法修飾的MNPs的細(xì)胞磁分離結(jié)果進(jìn)行了比較。以對(duì)疊氮苯甲酸和水合肼為原料合成對(duì)疊氮苯甲酰肼,考察純化條件。采用IR和核磁共振光譜(NMR)對(duì)合成純化產(chǎn)物進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。結(jié)果:本實(shí)驗(yàn)使用乳液聚合法制備了PGMA微球,通過(guò)優(yōu)化制備條件,可以實(shí)現(xiàn)對(duì)微球粒徑的調(diào)控。通過(guò)SEM觀察可知,所制得的微球具有良好的球形度和單分散性。開(kāi)發(fā)了納米微球涂層毛細(xì)管柱,即把納米微球作為OTCEC的固定相。通過(guò)電滲流(EOF)的觀測(cè)及SEM結(jié)果比較,說(shuō)明PGMA NPs涂層毛細(xì)管柱已成功制備。采用賴氨酸(Lys)作為色譜配基對(duì)制備的的毛細(xì)管柱進(jìn)行表面修飾制得PGMA/Lys NPs涂層管柱,使用該管柱成功的實(shí)現(xiàn)了對(duì)氨基酸混合物的毛細(xì)管電色譜(CEC)分離,分離結(jié)果重現(xiàn)性較好。探明了基于溶劑熱法制備羧化的MNPs的最佳條件,首次提出來(lái)基于點(diǎn)擊化學(xué)的抗體定向固定化方法,經(jīng)IR測(cè)定得知抗體成功的固定化到MNPs表面,通過(guò)對(duì)比抗體定向固定化與非定向固定化的磁性微球腫瘤細(xì)胞去除率,初步說(shuō)明定向固定化抗體的方法優(yōu)于非定向固定化抗體的方法。本實(shí)驗(yàn)合成出對(duì)疊氮苯甲酰肼,并得到最優(yōu)純化條件。結(jié)論:采用乳液聚合法成功的制備了PGMA納米微球,粒徑在70 nm至200 nm范圍內(nèi)可控,制得微球呈明顯單分散性且粒度分布均勻。成功的將PGMA納米微球固定到毛細(xì)管內(nèi)壁上將其用于OTCEC的固定相。通過(guò)與單層配基修飾的管柱相比,PGMA NPs涂層的毛細(xì)管柱管柱可以提供更大的色譜保留和較高的分辨率。成功的制備出單分散、磁性強(qiáng)、粒徑適宜的羧化的MNPs,采用點(diǎn)擊化學(xué)反應(yīng)將抗體定向固定化到MNPs表面,初步實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:與抗體非定向固定的微球相比,抗體定向固定修飾的MNPs具有更高的腫瘤細(xì)胞清除率。本實(shí)驗(yàn)以對(duì)疊氮苯甲酸和水合肼為原料成功合成了對(duì)疊氮苯甲酰肼,同時(shí)優(yōu)化了制備方法及純化條件。
【關(guān)鍵詞】：PGMA微球 開(kāi)管毛細(xì)管電色譜 MNPs微球 點(diǎn)擊化學(xué) 抗體定向固定化 細(xì)胞分離
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R943
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 縮略語(yǔ)10-11
• 前言11-13
• 研究現(xiàn)狀、成果11-12
• 研究目的、方法12-13
• 一、PGMA微球的制備及其應(yīng)用13-33
• 1.1 試劑及儀器14-15
• 1.1.1 試劑14
• 1.1.2 儀器14-15
• 1.2 試驗(yàn)方法15-19
• 1.2.1 原料預(yù)處理15-16
• 1.2.2 PGMA微球的純化16
• 1.2.3 PGMA微球制備影響因素考察16-18
• 1.2.4 賴氨酸固定化的PGMA NPs涂層的毛細(xì)管柱的制備及表征18-19
• 1.2.5 賴氨酸固定化的PGMA NPs涂層的毛細(xì)管柱的應(yīng)用19
• 1.3 結(jié)果19-29
• 1.3.1 原料預(yù)處理結(jié)果與意義19-20
• 1.3.2 PGMA微球純化結(jié)果與意義20-21
• 1.3.3 PGMA微球制備影響因素考察21-27
• 1.3.4 賴氨酸固定化的PGMA NPs涂層的毛細(xì)管柱的制備及表征27-28
• 1.3.5 賴氨酸固定化的PGMA NPs涂層的毛細(xì)管柱的應(yīng)用28-29
• 1.4 討論29-32
• 1.4.1 PGMA微球制備影響因素29-31
• 1.4.2 賴氨酸固定化的PGMA NPs涂層的毛細(xì)管柱的表征31
• 1.4.3 賴氨酸固定化的PGMA NPs涂層的毛細(xì)管柱的應(yīng)用31-32
• 1.5 小結(jié)32-33
• 二、MNPs的制備及在細(xì)胞分離中的應(yīng)用33-55
• 2.1 試劑及儀器34-35
• 2.1.1 試劑34-35
• 2.1.2 儀器35
• 2.2 試驗(yàn)方法35-40
• 2.2.1 對(duì)疊氮苯甲酰肼的合成及純化35-37
• 2.2.2 羧化Fe3O4 MNPs的制備37
• 2.2.3 MNPs的功能基化改性37
• 2.2.4 利妥昔單抗的前處理37-38
• 2.2.5 利妥昔單抗固定化于MNPs38-39
• 2.2.6 MNPs性能表征及結(jié)構(gòu)鑒定39-40
• 2.2.7 免疫磁分離細(xì)胞40
• 2.3 結(jié)果40-51
• 2.3.1 對(duì)疊氮苯甲酰肼的合成和純化40-44
• 2.3.2 羧化Fe3O4 MNPs制備條件的考察和優(yōu)化44-47
• 2.3.3 羧化MNPs的結(jié)構(gòu)形貌及性能的表征47-50
• 2.3.4 不同偶聯(lián)抗體方法的考察50
• 2.3.5 免疫磁分離細(xì)胞50-51
• 2.4 討論51-54
• 2.4.1 對(duì)疊氮苯甲酰肼的合成及純化51-53
• 2.4.2 MNPs的結(jié)構(gòu)形貌及性能的表征53
• 2.4.3 免疫磁分離細(xì)胞53-54
• 2.5 小結(jié)54-55
• 結(jié)論55-56
• 參考文獻(xiàn)56-61
• 發(fā)表論文和參加科研情況說(shuō)明61-62
• 附錄62-63
• 綜述 高分子微球的制備及應(yīng)用研究63-77
• 綜述參考文獻(xiàn)73-77
• 致謝77

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 吳偉;賀全國(guó);陳洪;;磁性納米粒子在生物傳感器中的應(yīng)用研究進(jìn)展[J];化學(xué)通報(bào);2007年04期

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 曹欣祥;水性油墨用水性丙烯酸樹(shù)脂的制備及性能研究[D];哈爾濱工程大學(xué);2007年

  本文關(guān)鍵詞：功能高分子納米微球的制備及在生物醫(yī)藥方面的應(yīng)用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：312895