本文關(guān)鍵詞：違禁添加降壓、降糖類藥物化學(xué)發(fā)光免疫分析方法的建立，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：在保健品中曝光的違禁添加藥物逐漸增多,由于高血壓、糖尿病患者數(shù)量巨大,不法商販將過量的速效降壓、降糖藥物添加到保健品中,長期不合理的服用這類化學(xué)藥物會導(dǎo)致嚴(yán)重的不良后果,甚至危及生命,因此有必要開發(fā)出快速、靈敏的檢測方法用于保健品的市場監(jiān)控。目前,降壓、降糖類違禁添加藥物的分析方法主要為儀器分析,如HPLC. LC/MS等,儀器分析具有許多應(yīng)用局限,如儀器昂貴,樣品處理復(fù)雜,不適合現(xiàn)場檢測,需要專業(yè)技術(shù)人員。而化學(xué)發(fā)光免疫分析法由于其靈敏、快速、特異性等優(yōu)點(diǎn),有望成為降壓、降糖類保健品現(xiàn)場快速檢測的有效手段。本實(shí)驗(yàn)中針對降壓類藥物卡托普利,降糖類藥物瑞格列奈、那格列奈建立了化學(xué)發(fā)光免疫分析法。針對卡托普利分子上的巰基,瑞格列奈、那格列奈分子上的羧基合成了免疫原,得到多克隆抗體,酶聯(lián)免疫分析法對抗體和包被原組合進(jìn)行了篩選,分別得到最優(yōu)組合,在ELISA中卡托普利、瑞格列奈、那格列奈的靈敏度分別為1110.92、40.05、72.33 ng/mL。運(yùn)用控制變量法對化學(xué)發(fā)光法的各個(gè)因素進(jìn)行優(yōu)化,發(fā)現(xiàn)化學(xué)發(fā)光法明顯優(yōu)于ELISA,卡托普利、瑞格列奈、那格列奈的靈敏度和線性范圍分別為193.54ng/mL,10.16-3685.54 ng/mL.28.58 ng/mL,1-180 ng/mL.4.68 ng/mL,0.1-100 ng/mL,化學(xué)發(fā)光法的靈敏度相對于酶聯(lián)免疫法都有所提高,線性范圍更寬。將建立的化學(xué)發(fā)光法用于檢測市售保健品,所得結(jié)果與儀器法一致�？偨Y(jié)：本研究為檢測降壓降糖類違禁添加藥物提供了靈敏、快速、特異性、高效的方法,可用于現(xiàn)場高通量的篩選檢測。
【關(guān)鍵詞】：化學(xué)發(fā)光免疫分析 多克隆抗體 違禁添加藥物 瑞格列奈 那格列奈 卡托普利
【學(xué)位授予單位】：南開大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R917
【目錄】：

• 中文摘要5-6
• Abstract6-12
• 縮略詞12-13
• 第一章 前言13-26
• 第一節(jié) 降壓、降糖類藥物概述13-18
• 1.1.1 降壓類化學(xué)藥物13-14
• 1.1.2 降糖類化學(xué)藥物14-16
• 1.1.3 降壓、降糖類藥物檢測意義16-18
• 第二節(jié) 降壓、降糖類藥物分析現(xiàn)狀18-25
• 1.2.1 儀器分析18-19
• 1.2.2 生物分析19-25
• 第三節(jié) 本研究的設(shè)計(jì)思路25-26
• 第二章 多克隆抗體的制備26-38
• 第一節(jié) 實(shí)驗(yàn)材料與設(shè)備26-27
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)試劑與耗材26
• 2.1.2 主要儀器設(shè)備26-27
• 2.1.3 緩沖液的配制27
• 第二節(jié) 瑞格列奈免疫原及包被抗原的合成與鑒定27-31
• 2.2.1 活化卵清蛋白和牛血清白蛋白27
• 2.2.2 瑞格列奈免疫原及包被抗原的合成27-29
• 2.2.3 瑞格列奈的免疫原和包被原的鑒定29-31
• 第三節(jié) 那格列奈免疫原及包被抗原的合成與鑒定31-33
• 2.3.1 那格列奈免疫原及包被原的合成31-32
• 2.3.2 那格列奈免疫原及包被原的鑒定32-33
• 第四節(jié) 卡托普利免疫原及包被抗原的合成與鑒定33-36
• 2.4.1 卡托普利免疫原及包被抗原的合成33-34
• 2.4.2 卡托普利免疫原及包被抗原的鑒定34-36
• 第五節(jié) 免疫方案及血清處理36-38
• 第三章 酶聯(lián)免疫分析方法篩選抗體38-46
• 第一節(jié) 實(shí)驗(yàn)材料與儀器38-39
• 3.1.1 實(shí)驗(yàn)試劑及耗材38
• 3.1.2 主要儀器設(shè)備38
• 3.1.3 溶液的配制38-39
• 第二節(jié) 瑞格列奈ELISA檢測體系的建立39-41
• 3.2.1 方陣法優(yōu)選瑞格列奈抗體及包被抗原的最佳測定濃度39
• 3.2.2 瑞格列奈多克隆抗體效價(jià)的測定39-40
• 3.2.3 間接競爭ELISA測定抗體的靈敏度40-41
• 第三節(jié) 那格列奈ELISA檢測體系的建立41-44
• 3.3.1 方陣法優(yōu)選那格列奈抗體及包被抗原的最佳測定濃度41-42
• 3.3.2 那格列奈多克隆抗體效價(jià)的測定42
• 3.3.3 間接競爭ELISA測定抗體的靈敏度42-44
• 第四節(jié) 卡托普利ELISA檢測體系的建立44-46
• 3.4.1 方陣法優(yōu)選卡托普利抗體及包被抗原的最佳測定濃度44
• 3.4.2 卡托普利多克隆抗體效價(jià)的測定44
• 3.4.3 間接競爭ELISA測定抗體的靈敏度44-46
• 第四章 化學(xué)發(fā)光免疫分析方法的建立46-72
• 第一節(jié) 實(shí)驗(yàn)材料與儀器46-47
• 4.1.1 實(shí)驗(yàn)試劑及耗材46
• 4.1.2 主要儀器設(shè)備46
• 4.1.3 溶液的配制46-47
• 第二節(jié) 瑞格列奈CLIA檢測體系的建立47-56
• 4.2.1 瑞格列奈化學(xué)發(fā)光檢測法檢測流程47
• 4.2.2 瑞格列奈化學(xué)發(fā)光檢測體系動(dòng)力學(xué)過程47-48
• 4.2.3 瑞格列奈包被原濃度及抗體濃度的優(yōu)化48-49
• 4.2.4 間接競爭CLIA法測定瑞格列奈的靈敏度49-50
• 4.2.5 瑞格列奈抗體交叉反應(yīng)(CR)率的測定50-52
• 4.2.6 CLIA法測定瑞格列奈精密度與回收率的測定52-55
• 4.2.7 CLIA法測定瑞格列奈在實(shí)際體系中的應(yīng)用55-56
• 第三節(jié) 那格列奈CLIA檢測體系的建立56-64
• 4.3.1 那格列奈化學(xué)發(fā)光檢測流程56
• 4.3.2 那格列奈化學(xué)發(fā)光檢測體系動(dòng)力學(xué)過程56-57
• 4.3.3 那格列奈包被原濃度及抗體濃度的優(yōu)化57-58
• 4.3.4 間接競爭CLIA法測定那格列奈的靈敏度58-59
• 4.3.5 那格列奈抗體交叉反應(yīng)(CR)率的測定59-60
• 4.3.6 CLIA法測定那格列奈回收率的測定60-61
• 4.3.7 CLIA法測定那格列奈在實(shí)際體系中的應(yīng)用61-63
• 4.3.8 CLIA法與HPLC法測定那格列奈的對比63-64
• 第四節(jié) 卡托普利CLIA檢測體系的建立64-72
• 4.4.1 卡托普利化學(xué)發(fā)光檢測體實(shí)驗(yàn)步驟64-65
• 4.4.2 卡托普利化學(xué)發(fā)光檢測體系動(dòng)力學(xué)過程65
• 4.4.3 卡托普利CLIA條件的優(yōu)化65-68
• 4.4.4 間接競爭CLIA法測定卡托普利的靈敏度68-69
• 4.4.5 卡托普利抗體交叉反應(yīng)(CR)率的測定69
• 4.4.6 CLIA法測定卡托普利回收率的測定69-70
• 4.4.7 CLIA法測定卡托普利在實(shí)際體系中的應(yīng)用70-72
• 第五章 結(jié)論72-73
• 參考文獻(xiàn)73-77
• 致謝77-78
• 個(gè)人簡歷、在學(xué)期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文及研究成果78

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1 徐冰心;王普艷;;那格列奈臨床應(yīng)用進(jìn)展[J];實(shí)用糖尿病雜志;2006年02期

2 張環(huán)宇;曲有樂;張玲;;那格列奈H晶型的合成[J];黑龍江醫(yī)藥科學(xué);2006年02期

3 朱小嫻;陳萬中;;S晶型那格列奈降血糖作用的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究[J];臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2011年19期

4 李鋼,蘇國強(qiáng),徐群為,朱崇泉;那格列奈的新晶型(英文)[J];藥學(xué)學(xué)報(bào);2001年07期

5 秦華,金華;新型2型糖尿病治療藥那格列奈[J];中國新藥與臨床雜志;2002年01期

6 譚少珍,周智廣,唐煒立,朱旭萍,彭健,王建平,黃干;那格列奈治療2型糖尿病的臨床試驗(yàn)[J];中國醫(yī)師雜志;2003年06期

7 孫建緒,高永良;那格列奈片的穩(wěn)定性研究[J];中國新藥雜志;2003年11期

8 孫建緒,高永良;那格列奈片的質(zhì)量評價(jià)研究[J];科學(xué)技術(shù)與工程;2004年01期

9 殷琦,李鵬,郭理博,李可欣,孫春華,李長齡;那格列奈的藥理特性與臨床應(yīng)用[J];中國醫(yī)院用藥評價(jià)與分析;2004年04期

10 王長江,馮憑,閻勝利,羅佐杰,王德全,孫海燕,劉樹琴,楊明功;那格列奈片治療2型糖尿病的多中心隨機(jī)雙盲平行對照臨床試驗(yàn)[J];中國臨床藥理學(xué)雜志;2004年06期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李鋼;龔文和;徐群為;蘇國強(qiáng);陳家英;;那格列奈晶體形貌與結(jié)構(gòu)測定[A];第三屆全國掃描電子顯微學(xué)會議論文集[C];2003年

2 張偉;賀毅憬;韓春婷;周宏灝;;SLC01B1 521T>C基因多態(tài)對降糖藥那格列奈藥代動(dòng)力學(xué)和藥效動(dòng)力學(xué)的影響[A];第八次全國藥物與化學(xué)異物代謝學(xué)術(shù)會議論文摘要[C];2006年

3 任國飛;;那格列奈的新劑型研究進(jìn)展[A];2013年浙江省醫(yī)院藥學(xué)學(xué)術(shù)年會會議報(bào)告與論文匯編[C];2013年

4 詹偉彬;;那格列奈(唐力)治療新診斷2型糖尿病臨床效果觀察[A];浙江省中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會糖尿病專業(yè)委員會第一次學(xué)術(shù)會議材料匯編[C];2006年

5 李保會;呂運(yùn)開;秦新英;;毛細(xì)管區(qū)帶電泳同時(shí)分離那格列奈幾何異構(gòu)和旋光異構(gòu)體[A];中國化學(xué)會第26屆學(xué)術(shù)年會分析化學(xué)分會場論文集[C];2008年

6 劉天;魏愛生;郎江明;陳蘋;王甫能;陳發(fā)勝;郅敏;;那格列奈對葡萄糖耐量低減胰島素早期分泌時(shí)相的影響[A];廣東省第五屆中醫(yī)、中西醫(yī)結(jié)合防治糖尿病學(xué)術(shù)大會論文匯編[C];2005年

7 魏世杰;;替米沙坦與那格列奈在比格犬體內(nèi)藥物相互作用研究[A];西北地區(qū)第七屆色譜學(xué)術(shù)報(bào)告會甘肅省第十二屆色譜年會論文集[C];2012年

8 劉天;魏愛生;郎江明;陳蘋;王甫能;陳發(fā)勝;郅敏;;那格列奈對葡萄糖耐量低減胰島素早期分泌時(shí)相的影響[A];第八次全國中醫(yī)糖尿病學(xué)術(shù)大會論文匯編[C];2005年

9 宗文漪;高妍;袁申元;馮憑;羅佐杰;汪寅章;郭曉蕙;柴瑞敏;鄭寶忠;秦映芬;潘長玉;;那格列奈和瑞格列奈治療2型糖尿病有效性和安全性的多中心、雙盲、對照臨床研究[A];2006年中華醫(yī)學(xué)會糖尿病分會第十次全國糖尿病學(xué)術(shù)會議論文集[C];2006年

10 李海;劉娟;陳靄玲;李延兵;;那格列奈與阿卡波糖對2型糖尿病患者標(biāo)準(zhǔn)碳水化合物餐及混合餐后血糖的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會糖尿病學(xué)分會第十六次全國學(xué)術(shù)會議論文集[C];2012年

中國重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 馮友根;治療2型糖尿病新藥那格列奈[N];中國醫(yī)藥報(bào);2004年

2 董耀平;那格列奈仿制藥市場尋路[N];中國醫(yī)藥報(bào);2005年

3 李苗;遼寧9項(xiàng)專利成功出讓[N];中國商報(bào);2007年

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1 成瑜;CYP2C9和SLCO1B1基因多態(tài)性對那格列奈的代謝和藥物相互作用的影響[D];中南大學(xué);2012年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 崔文寧;那格列奈對利伐沙班在大鼠體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)及藥效學(xué)的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

2 鄭磊;違禁添加降壓、降糖類藥物化學(xué)發(fā)光免疫分析方法的建立[D];南開大學(xué);2015年

3 李志偉;分子烙印及相關(guān)技術(shù)分離分析那格列奈和氨基安替比林[D];河北大學(xué);2003年

4 李妍;自組裝膜調(diào)控那格列奈結(jié)晶[D];天津大學(xué);2012年

5 湯世國;米格列奈鈣分散片和那格列奈治療初診2型糖尿病的療效和安全性觀察[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2012年

6 殷霞;那格列奈和瑞格列奈對2型糖尿病患者血清丙二醛、超氧化物歧化酶影響的比較研究[D];四川大學(xué);2004年

7 程永科;那格列奈多晶型的研究[D];南京師范大學(xué);2008年

  本文關(guān)鍵詞：違禁添加降壓、降糖類藥物化學(xué)發(fā)光免疫分析方法的建立，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：303702