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敵百蟲代謝產(chǎn)物分析與檢測的方法研究

發(fā)布時(shí)間:2017-04-12 01:12

  本文關(guān)鍵詞:敵百蟲代謝產(chǎn)物分析與檢測的方法研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的:通過分析敵百蟲在SD大鼠體內(nèi)的代謝產(chǎn)物,探討其在大鼠體內(nèi)可能的代謝途徑。方法:1.動(dòng)物模型建立:36只SD大鼠分為對(duì)照組(n=9)及低(n=9)、中(n=9)、高(n=9)三個(gè)染毒組,敵百蟲以2mg/kg、10mg/kg、50mg/kg染毒劑量經(jīng)口染毒,蒸餾水飼喂為對(duì)照組,連續(xù)灌胃30天,于實(shí)驗(yàn)結(jié)束當(dāng)天留取給藥后24h尿液、EDTA抗凝全血、心、肝、脾、肺、腎及腦組織。2.利用GC/MS技術(shù)鑒定敵百蟲在大鼠尿液、血液及組織中的代謝產(chǎn)物。3.建立GC-ECD對(duì)尿液及組織中三氯乙醇、2,2-二氯乙酰胺的定量分析方法:尿液經(jīng)乙腈液液萃取,組織經(jīng)勻漿后超聲波萃取,以1,3-二氯-2-丙醇和2-氯乙酰胺作為雙內(nèi)標(biāo),采用HP-INNOWAX(30 m×0.32 mm×0.25μm)色譜柱,ECD檢測器,檢測器溫度為280℃。進(jìn)樣口溫度為200℃,不分流進(jìn)樣,進(jìn)樣量為1μL。程序升溫為初始溫度120℃保持2 min,以10℃/min升至150℃保持1 min,再以10℃/min升至200℃保持1 min,最后以5℃/min升至240℃保持2 min。4.利用GC-FPD分析尿液、血液及組織中的DMP。5.將尿液、血液及組織中敵百蟲代謝產(chǎn)物的數(shù)據(jù)使用SPSS21.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,初步探討其可能代謝途徑。結(jié)果:1.利用GC/MS在肝臟中檢出三氯乙醇,尿液和腎臟中檢出三氯乙醇、2,2-二氯乙酰胺,其中2,2-二氯乙酰胺是首次發(fā)現(xiàn)的代謝產(chǎn)物。2.建立GC-ECD分析尿液及組織中三氯乙醇、2,2-二氯乙酰胺的定量方法,三氯乙醇、2,2-二氯乙酰胺分別在2.84 ng/ml~210.52 ng/ml、42.51 ng/ml~411 ng/ml質(zhì)量濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,相關(guān)系數(shù)均在0.99以上,最低檢測限分別為0.82 ng/ml、13.23ng/ml,回收率在75.09%~109.55%之間。3.尿液、血液及組織中的代謝產(chǎn)物含量隨著敵百蟲的暴露劑量的增加而增加,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05),且均與敵百蟲的暴露水平顯著相關(guān)(p0.01),尿液、血液中的代謝產(chǎn)物含量與各個(gè)組織中的DMP含量均顯著相關(guān)(p0.05)。4.敵百蟲在體內(nèi)的代謝途徑,一為敵百蟲P-C鏈斷裂生成DMP和三氯乙醇,二為敵百蟲代謝為敵敵畏,再水解為磷酸二甲酯和二氯乙醛,二氯乙醛進(jìn)一步代謝為2,2-二氯乙酰胺。結(jié)論:1.通過GC/MS鑒定出敵百蟲的代謝產(chǎn)物三氯乙醇、2,2-二氯乙酰胺。2.GC-ECD對(duì)尿液、組織中三氯乙醇、2,2-二氯乙酰胺的定量分析方法所涉及的樣品前處理手段簡單、快速、可操作性強(qiáng),且能較好的提取分離出待測物質(zhì),測定數(shù)據(jù)可靠,可用于尿液、組織中三氯乙醇、2,2-二氯乙酰胺的含量分析。3.三氯乙醇和2,2-二氯乙酰胺可以作為接觸標(biāo)志物反應(yīng)敵百蟲的暴露情況。4.根據(jù)GC/MS、GC-ECD、GC-FPD的測定結(jié)果對(duì)敵百蟲在大鼠體內(nèi)的代謝途徑做了初步推斷。
【關(guān)鍵詞】:敵百蟲 代謝產(chǎn)物 三氯乙醇 2 2-二氯乙酰胺 氣相色譜法
【學(xué)位授予單位】:貴陽醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R965;R927
【目錄】:
  • 中文摘要4-6
  • 英文摘要6-10
  • 縮略詞表10-11
  • 引言11-14
  • 一、敵百蟲暴露動(dòng)物模型的建立14-16
  • 二、GC/MS鑒定尿液、血液及組織中敵百蟲代謝產(chǎn)物16-22
  • 三、建立GC-ECD對(duì)尿液中三氯乙醇、2,2-二氯乙酰胺的定量分析方法22-31
  • 四、建立GC-ECD對(duì)組織樣品中三氯乙醇、2,2-二氯乙酰胺的定量分析方法31-40
  • 無、GC-FPD測定尿液、血液及組織樣品中的DMP40-47
  • 六、敵百蟲代謝產(chǎn)物的分析及體內(nèi)代謝的探討47-53
  • 結(jié)論53-54
  • 參考文獻(xiàn)54-59
  • 綜述59-69
  • 參考文獻(xiàn)66-69
  • 作者簡歷69-70
  • 致謝70-71
  • 學(xué)位論文數(shù)據(jù)集71

【參考文獻(xiàn)】

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  本文關(guān)鍵詞:敵百蟲代謝產(chǎn)物分析與檢測的方法研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號(hào):300388

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