發(fā)布時間：2017-04-03 06:12

  本文關(guān)鍵詞：EGCG結(jié)構(gòu)類似物與Aβ蛋白和α-淀粉酶相互作用機(jī)理研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究表明,表沒食子兒茶素沒食子酸酯(Epigallocatechin gallate, EGCG)對阿爾茲海默病(老年癡呆癥)和肥胖癥表現(xiàn)出一定的防治功效。至今,EGCG與上述疾病中關(guān)鍵蛋白：淀粉樣β蛋白(Amyloid β protein, Aβ42)和α-淀粉酶的相互作用機(jī)理仍不十分清楚。針對這一科學(xué)問題,從分子水平和動物個體組織水平,系統(tǒng)研究了EGCG結(jié)構(gòu)類似物對Aβ42和α-淀粉酶的活性、構(gòu)象、表面形態(tài)、熱穩(wěn)定性,以及動物組織免疫等方面的影響。主要研究結(jié)果如下：1.采用ThT、CD、AFM、DSC等手段,在分子水平上,闡明了EGCG結(jié)構(gòu)類似物與Aβ42蛋白的相互作用機(jī)理。結(jié)果表明,EGCG結(jié)構(gòu)類似物具有抑制Aβ42聚集與解聚效果,依次為EGCGGCGECGEGC,表現(xiàn)出較強(qiáng)的構(gòu)效和量效關(guān)系；EGCG分子結(jié)構(gòu)功能基團(tuán)對這一抑制作用的貢獻(xiàn)表現(xiàn)為沒食子�；�3'-OH差向異構(gòu)體。2.從熱力學(xué)、動力學(xué)和蛋白質(zhì)構(gòu)象變化的分子水平上,探明了EGCG與α-淀粉酶的相互作用機(jī)制。結(jié)果表明,EGCG可以降低α-淀粉酶達(dá)到Tm的熱焓和穩(wěn)定性。EGCG對α-淀粉酶活力抑制屬于非競爭性抑制,熒光淬滅類型為動態(tài)淬滅。EGCG改變α-淀粉酶蛋白構(gòu)象,降低二級結(jié)構(gòu)中α螺旋含量。EGCG可降低α-淀粉酶的聚集程度,改變α-淀粉酶的聚集方式,減小聚集體的水力學(xué)半徑。3.動物實驗結(jié)果表明,EGCG對老年癡呆癥和肥胖癥的防治有一定療效。患老年癡呆癥小鼠喂食EGCG30天,能改善Aβ42聚集導(dǎo)致的小鼠海馬區(qū)和大腦皮層中ChAT和AchE活力異常,以及MDA引起的氧化應(yīng)激損傷,能抑制小鼠海馬區(qū)Aβ42的過表達(dá)和積累。患肥胖癥小鼠喂食EGCG30天,肥胖小鼠體重下降37.93%,組織切片發(fā)現(xiàn)小鼠脂肪細(xì)胞的橫截面積降低54.8%,肝組織空泡化、脂肪浸潤程度也有所降低。
【關(guān)鍵詞】：EGCG結(jié)構(gòu)類似物 Aβ42蛋白 α-淀粉酶 老年癡呆癥 肥胖癥 相互作用機(jī)理 組織免疫學(xué)
【學(xué)位授予單位】：北京化工大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R96
【目錄】：

• 學(xué)位論文數(shù)據(jù)集4-5
• 摘要5-7
• abstract7-18
• 第一章 緒論18-25
• 1.1 Aβ蛋白與人類健康18-19
• 1.1.1 Aβ概述18
• 1.1.2 Aβ42聚集與阿爾茲海默病18-19
• 1.1.3 Aβ聚集抑制劑的研究現(xiàn)狀19
• 1.2 α-淀粉酶與肥胖癥19-21
• 1.2.1 α-淀粉酶概述19-20
• 1.2.2 α-淀粉酶與肥胖癥20-21
• 1.3 表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)結(jié)構(gòu)類似物21-23
• 1.3.1 EGCG類似物結(jié)構(gòu)與理化特性21-22
• 1.3.2 EGCG的生理活性及其應(yīng)用22-23
• 1.4 本文研究目的和研究內(nèi)容23-25
• 1.4.1 研究目的與意義23
• 1.4.2 主要研究內(nèi)容23-25
• 第二章 EGCG結(jié)構(gòu)類似物與Aβ42相互作用機(jī)理研究25-46
• 2.1 引言25-26
• 2.2 實驗儀器和試劑26-27
• 2.2.1 實驗儀器26
• 2.2.2 試劑26-27
• 2.3 實驗方法27-30
• 2.3.1 Aβ42蛋白聚集體的去除27
• 2.3.2 Aβ42蛋白溶液及其與EGCG結(jié)構(gòu)類似物共培養(yǎng)液的配制27-28
• 2.3.3 參數(shù)r引入28
• 2.3.4 ThT熒光分析28
• 2.3.5 圓二色測定28-29
• 2.3.6 原子力顯微鏡分析29
• 2.3.7 差示掃描微量量熱儀分析29
• 2.3.8 蛋白溶解度測定29-30
• 2.4 結(jié)果與討論30-45
• 2.4.1 Aβ42自聚成纖動力學(xué)30
• 2.4.2 EGCG結(jié)構(gòu)類似物對Aβ42聚集動力學(xué)的影響30-33
• 2.4.3 EGCG結(jié)構(gòu)類似物抑制Aβ42聚集的IC50值33-34
• 2.4.4 EGCG結(jié)構(gòu)類似物對Aβ42蛋白二級結(jié)構(gòu)的影響34-37
• 2.4.5 EGCG結(jié)構(gòu)類似物對Aβ42形態(tài)學(xué)的影響37-42
• 2.4.6 EGCG結(jié)構(gòu)類似物對Aβ42聚集熱力學(xué)的影響42-44
• 2.4.7 EGCG結(jié)構(gòu)類似物對Aβ42蛋白溶解度的影響44-45
• 2.5 本章小結(jié)45-46
• 第三章 從組織個體,研究EGCG對老年癡呆鼠的影響46-54
• 3.1 引言46
• 3.2 實驗材料與設(shè)備46-47
• 3.2.1 實驗動物46
• 3.2.2 實驗儀器46-47
• 3.2.3 試劑47
• 3.3 實驗方法47-49
• 3.3.1 動物分組47
• 3.3.2 飼養(yǎng)條件47
• 3.3.3 體長、體重的測定47-48
• 3.3.4 腦組織樣品的分離與稱重48
• 3.3.5 腦組織生化指標(biāo)檢測48
• 3.3.6 蛋白組織免疫學(xué)分析48
• 3.3.7 統(tǒng)計學(xué)分析48-49
• 3.4 結(jié)果與討論49-53
• 3.4.1 EGCG喂食對老年癡呆小鼠體長和體重的影響49
• 3.4.2 EGCG對老年癡呆小鼠腦組織生化指標(biāo)的影響49-51
• 3.4.3 蛋白組織免疫學(xué)分析51-53
• 3.5 本章小結(jié)53-54
• 第四章 EGCG與α-淀粉酶相互作用的生化基礎(chǔ)54-74
• 4.1 引言54
• 4.2 實驗儀器和試劑54-55
• 4.2.1 實驗儀器54-55
• 4.2.2 實驗試劑55
• 4.3 實驗方法55-58
• 4.3.1 EGCG對α-淀粉酶活力影響及其抑制類型55-56
• 4.3.2 EGCG與α-淀粉酶相互作用動力學(xué)研究56-57
• 4.3.3 EGCG對α-淀粉酶熱力學(xué)的影響57
• 4.3.4 AFM測定EGCG對α-淀粉酶形貌的影響57
• 4.3.5 DLS測定EGCG對α-淀粉酶粒徑的影響57
• 4.3.6 EGCG對α-淀粉酶二級結(jié)構(gòu)的影響57-58
• 4.3.7 EGCG對α-淀粉酶溶解度的影響58
• 4.4 結(jié)果與討論58-73
• 4.4.1 EGCG對α-淀粉酶活性的抑制及其抑制類型58-61
• 4.4.2 EGCG對α-淀粉酶的熒光淬滅作用61-66
• 4.4.3 EGCG對α-淀粉酶熱力學(xué)穩(wěn)定性的影響66-67
• 4.4.4 EGCG對α-淀粉酶水力學(xué)半徑的影響67-68
• 4.4.5 EGCG對α-淀粉酶形態(tài)的影響68-70
• 4.4.6 EGCG對α-淀粉酶二級結(jié)構(gòu)的影響70-71
• 4.4.7 EGCG對α-淀粉酶溶解度的影響71-73
• 4.5 本章小結(jié)73-74
• 第五章 EGCG對肥胖小鼠的減肥功效74-84
• 5.1 引言74
• 5.2 實驗材料與設(shè)備74-75
• 5.2.1 實驗動物74
• 5.2.2 實驗儀器74-75
• 5.2.3 實驗試劑75
• 5.3 實驗方法75-77
• 5.3.1 動物分組75
• 5.3.2 飼養(yǎng)條件75
• 5.3.3 測定指標(biāo)75-76
• 5.3.4 形態(tài)學(xué)分析76
• 5.3.5 統(tǒng)計學(xué)分析76-77
• 5.4 結(jié)果與分析77-83
• 5.4.1 EGCG對肥胖小鼠體長、體重、Lee's小鼠指數(shù)的影響77-78
• 5.4.2 EGCG對肥胖小鼠脂肪組織重量的影響78-79
• 5.4.3 EGCG對肥胖小鼠血脂的影響79-80
• 5.4.4 EGCG對肥胖小鼠淀粉酶和脂肪酶活力的影響80
• 5.4.5 EGCG對肥胖小鼠脂肪組織形態(tài)的影響80-83
• 5.5 本章小結(jié)83-84
• 第六章 全文結(jié)論與展望84-86
• 6.1 全文總結(jié)84-85
• 6.2 展望85-86
• 參考文獻(xiàn)86-93
• 符號說明93-94
• 致謝94-95
• 研究成果及發(fā)表的學(xué)術(shù)論文95-96
• 作者和導(dǎo)師簡介96-97
• 附件97-98

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3 陳偉強(qiáng);李樹田;侯s

本文編號：283846