本文關(guān)鍵詞：重組靈芝免疫調(diào)節(jié)蛋白的安全性初步研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：重組靈芝免疫調(diào)節(jié)蛋白（rLZ-8）是從靈芝子實體中分離得到的一種真菌蛋白，，具有免疫調(diào)節(jié)功能�，F(xiàn)已研究發(fā)現(xiàn)，rLZ-8具有抗腫瘤和升高體內(nèi)白細胞數(shù)量的生物學活性。白細胞減少癥，作為癌癥化學藥物治療后的一種常見并發(fā)癥，時刻困擾著全球近千萬患者。目前臨床使用的常見白細胞減少癥治療藥物，均存在或多或少的缺點，而rLZ-8相比于這幾種藥物，具有毒副作用低等的優(yōu)點。因此，rLZ-8作為治療白細胞減少癥的藥物的研發(fā)，具備較為廣闊的發(fā)展前景。 在rLZ-8研發(fā)的過程中，其安全性的研究與評價是十分重要的部分，也是進一步開發(fā)的基礎�；谝陨蠁栴}，本論文以白細胞減少癥為適應癥，進行了rLZ-8的急性毒性實驗和長期毒性實驗研究，具體內(nèi)容總結(jié)如下： 本論文利用基因工程方法，在畢赤酵母中重組表達了rLZ-8，并通過與本課題組其他研究人員合作，在中試規(guī)模上進行了rLZ-8的發(fā)酵生產(chǎn)及分離純化，獲得到純度達到99%的rLZ-8樣品，為接下來的急性毒性實驗和長期毒性試驗提供了滿足要求的受試藥物。 本論文對rLZ-8進行了小鼠急性毒性實驗，觀察不同劑量作用下小鼠的病理反應，探求rLZ-8最大耐受量。研究發(fā)現(xiàn)，雄性小鼠和雌性小鼠的中毒劑量均為起效劑量的381.73倍，致死劑量存在性別差異，雄性小鼠為457.99倍，雌性小鼠耐受較強達到572.60倍，可見rLZ-8中毒劑量和致死劑量與起效劑量差距極大，其毒性較低，安全性頗具保障。 本論文還進行了rLZ-8大鼠長期毒性實驗，觀察不同劑量用藥過程中大鼠各個指標的變化趨勢，找出最合適用藥劑量并觀察rLZ-8對大鼠肝臟、腎臟等重要臟器的影響。研究發(fā)現(xiàn)，rLZ-8中低劑量為較合適用量，且rLZ-8未對大鼠肝臟、腎臟等重要臟器產(chǎn)生有害作用。 綜上所述，在治療白細胞減少癥的過程中，rLZ-8的毒副作用極低，未對動物肝臟、腎臟等重要臟器產(chǎn)生有害作用。初步的研究表明，rLZ-8具備較高的安全性。
【關(guān)鍵詞】：重組靈芝免疫調(diào)節(jié)蛋白 安全性 急性毒性 長期毒性 白細胞減少癥
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R915
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-12
• 第一章 緒論12-21
• 1.1 靈芝免疫調(diào)節(jié)蛋白研究進展12-15
• 1.1.1 靈芝基本特征12
• 1.1.2 靈芝的分布與發(fā)現(xiàn)概況12
• 1.1.3 靈芝的藥理作用12-14
• 1.1.4 靈芝免疫調(diào)節(jié)蛋白的發(fā)現(xiàn)與研究的開展14-15
• 1.1.5 免疫調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)生物藥品發(fā)展現(xiàn)狀15
• 1.2 白細胞減少癥研究進展15-20
• 1.2.1 白細胞的生理15-16
• 1.2.2 白細胞總數(shù)升高及異常病癥16-17
• 1.2.3 白細胞減少癥發(fā)病病因17
• 1.2.4 白細胞減少癥常用治療方法17-20
• 1.3 論文的立題依據(jù)和內(nèi)容20-21
• 第二章 rLZ-8 的制備21-31
• 2.1 實驗儀器與試劑21-23
• 2.1.1 實驗儀器21
• 2.1.2 實驗試劑21-22
• 2.1.3 試劑配制22-23
• 2.2 實驗方法23-28
• 2.2.1 rLZ-8 基因的克隆23-25
• 2.2.2 重組質(zhì)粒的構(gòu)建25-26
• 2.2.3 重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化酵母感受態(tài)及線性化制備篩選26
• 2.2.4 rLZ-8 酵母菌在搖瓶中的表達26
• 2.2.5 rLZ-8 中試發(fā)酵工藝的生產(chǎn)26-27
• 2.2.6 rLZ-8 蛋白純化27-28
• 2.3 實驗結(jié)果28-30
• 2.3.1 rLZ-8 基因克隆 PCR 結(jié)果28-29
• 2.3.2 rLZ-8 搖瓶篩選經(jīng)電泳鑒定表達量29
• 2.3.3 rLZ-8 中試發(fā)酵經(jīng)電泳鑒定表達量29-30
• 2.3.4 rLZ-8 蛋白純化結(jié)果30
• 2.4 小結(jié)30-31
• 第三章 rLZ-8 小鼠急性毒性實驗31-42
• 3.1 實驗儀器與試劑31-32
• 3.1.1 實驗儀器31
• 3.1.2 實驗試劑31
• 3.1.3 試劑配制31-32
• 3.1.4 實驗動物32
• 3.2 實驗方法32-35
• 3.2.1 實驗目的32-33
• 3.2.2 給藥途徑33-34
• 3.2.3 給藥劑量34
• 3.2.4 觀察時間及指標34-35
• 3.3 實驗結(jié)果35-40
• 3.3.1 尾靜脈給藥途徑急性毒性實驗結(jié)果35-37
• 3.3.2 急性毒性實驗最大耐受量檢測37-40
• 3.4 討論40-41
• 3.5 小結(jié)41-42
• 第四章 rLZ-8 大鼠長期毒性實驗42-51
• 4.1 實驗儀器與試劑42
• 4.1.1 實驗儀器42
• 4.1.2 實驗試劑42
• 4.1.3 實驗動物42
• 4.2 實驗方法42-43
• 4.2.1 實驗目的42-43
• 4.2.2 實驗周期43
• 4.2.3 實驗分組43
• 4.2.4 給藥方式43
• 4.2.5 觀察指標43
• 4.3 實驗結(jié)果43-49
• 4.3.1 SD 大鼠進食和體重增長43-44
• 4.3.2 肝腎功能檢測44-47
• 4.3.3 免疫功能檢測47-49
• 4.3.4 病理學檢測49
• 4.4 討論49-50
• 4.5 小結(jié)50-51
• 第五章 結(jié)論51-52
• 參考文獻52-57
• 致謝57

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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  本文關(guān)鍵詞：重組靈芝免疫調(diào)節(jié)蛋白的安全性初步研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：282365