本文關(guān)鍵詞：重組靈芝免疫調(diào)節(jié)蛋白的安全性初步研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：重組靈芝免疫調(diào)節(jié)蛋白（rLZ-8）是從靈芝子實(shí)體中分離得到的一種真菌蛋白，，具有免疫調(diào)節(jié)功能�，F(xiàn)已研究發(fā)現(xiàn)，rLZ-8具有抗腫瘤和升高體內(nèi)白細(xì)胞數(shù)量的生物學(xué)活性。白細(xì)胞減少癥，作為癌癥化學(xué)藥物治療后的一種常見并發(fā)癥，時刻困擾著全球近千萬患者。目前臨床使用的常見白細(xì)胞減少癥治療藥物，均存在或多或少的缺點(diǎn)，而rLZ-8相比于這幾種藥物，具有毒副作用低等的優(yōu)點(diǎn)。因此，rLZ-8作為治療白細(xì)胞減少癥的藥物的研發(fā)，具備較為廣闊的發(fā)展前景。 在rLZ-8研發(fā)的過程中，其安全性的研究與評價是十分重要的部分，也是進(jìn)一步開發(fā)的基礎(chǔ)。基于以上問題，本論文以白細(xì)胞減少癥為適應(yīng)癥，進(jìn)行了rLZ-8的急性毒性實(shí)驗(yàn)和長期毒性實(shí)驗(yàn)研究，具體內(nèi)容總結(jié)如下： 本論文利用基因工程方法，在畢赤酵母中重組表達(dá)了rLZ-8，并通過與本課題組其他研究人員合作，在中試規(guī)模上進(jìn)行了rLZ-8的發(fā)酵生產(chǎn)及分離純化，獲得到純度達(dá)到99%的rLZ-8樣品，為接下來的急性毒性實(shí)驗(yàn)和長期毒性試驗(yàn)提供了滿足要求的受試藥物。 本論文對rLZ-8進(jìn)行了小鼠急性毒性實(shí)驗(yàn)，觀察不同劑量作用下小鼠的病理反應(yīng)，探求rLZ-8最大耐受量。研究發(fā)現(xiàn)，雄性小鼠和雌性小鼠的中毒劑量均為起效劑量的381.73倍，致死劑量存在性別差異，雄性小鼠為457.99倍，雌性小鼠耐受較強(qiáng)達(dá)到572.60倍，可見rLZ-8中毒劑量和致死劑量與起效劑量差距極大，其毒性較低，安全性頗具保障。 本論文還進(jìn)行了rLZ-8大鼠長期毒性實(shí)驗(yàn)，觀察不同劑量用藥過程中大鼠各個指標(biāo)的變化趨勢，找出最合適用藥劑量并觀察rLZ-8對大鼠肝臟、腎臟等重要臟器的影響。研究發(fā)現(xiàn)，rLZ-8中低劑量為較合適用量，且rLZ-8未對大鼠肝臟、腎臟等重要臟器產(chǎn)生有害作用。 綜上所述，在治療白細(xì)胞減少癥的過程中，rLZ-8的毒副作用極低，未對動物肝臟、腎臟等重要臟器產(chǎn)生有害作用。初步的研究表明，rLZ-8具備較高的安全性。
【關(guān)鍵詞】：重組靈芝免疫調(diào)節(jié)蛋白 安全性 急性毒性 長期毒性 白細(xì)胞減少癥
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R915
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-12
• 第一章 緒論12-21
• 1.1 靈芝免疫調(diào)節(jié)蛋白研究進(jìn)展12-15
• 1.1.1 靈芝基本特征12
• 1.1.2 靈芝的分布與發(fā)現(xiàn)概況12
• 1.1.3 靈芝的藥理作用12-14
• 1.1.4 靈芝免疫調(diào)節(jié)蛋白的發(fā)現(xiàn)與研究的開展14-15
• 1.1.5 免疫調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)生物藥品發(fā)展現(xiàn)狀15
• 1.2 白細(xì)胞減少癥研究進(jìn)展15-20
• 1.2.1 白細(xì)胞的生理15-16
• 1.2.2 白細(xì)胞總數(shù)升高及異常病癥16-17
• 1.2.3 白細(xì)胞減少癥發(fā)病病因17
• 1.2.4 白細(xì)胞減少癥常用治療方法17-20
• 1.3 論文的立題依據(jù)和內(nèi)容20-21
• 第二章 rLZ-8 的制備21-31
• 2.1 實(shí)驗(yàn)儀器與試劑21-23
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器21
• 2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑21-22
• 2.1.3 試劑配制22-23
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法23-28
• 2.2.1 rLZ-8 基因的克隆23-25
• 2.2.2 重組質(zhì)粒的構(gòu)建25-26
• 2.2.3 重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化酵母感受態(tài)及線性化制備篩選26
• 2.2.4 rLZ-8 酵母菌在搖瓶中的表達(dá)26
• 2.2.5 rLZ-8 中試發(fā)酵工藝的生產(chǎn)26-27
• 2.2.6 rLZ-8 蛋白純化27-28
• 2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果28-30
• 2.3.1 rLZ-8 基因克隆 PCR 結(jié)果28-29
• 2.3.2 rLZ-8 搖瓶篩選經(jīng)電泳鑒定表達(dá)量29
• 2.3.3 rLZ-8 中試發(fā)酵經(jīng)電泳鑒定表達(dá)量29-30
• 2.3.4 rLZ-8 蛋白純化結(jié)果30
• 2.4 小結(jié)30-31
• 第三章 rLZ-8 小鼠急性毒性實(shí)驗(yàn)31-42
• 3.1 實(shí)驗(yàn)儀器與試劑31-32
• 3.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器31
• 3.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑31
• 3.1.3 試劑配制31-32
• 3.1.4 實(shí)驗(yàn)動物32
• 3.2 實(shí)驗(yàn)方法32-35
• 3.2.1 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/span>32-33
• 3.2.2 給藥途徑33-34
• 3.2.3 給藥劑量34
• 3.2.4 觀察時間及指標(biāo)34-35
• 3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果35-40
• 3.3.1 尾靜脈給藥途徑急性毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果35-37
• 3.3.2 急性毒性實(shí)驗(yàn)最大耐受量檢測37-40
• 3.4 討論40-41
• 3.5 小結(jié)41-42
• 第四章 rLZ-8 大鼠長期毒性實(shí)驗(yàn)42-51
• 4.1 實(shí)驗(yàn)儀器與試劑42
• 4.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器42
• 4.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑42
• 4.1.3 實(shí)驗(yàn)動物42
• 4.2 實(shí)驗(yàn)方法42-43
• 4.2.1 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/span>42-43
• 4.2.2 實(shí)驗(yàn)周期43
• 4.2.3 實(shí)驗(yàn)分組43
• 4.2.4 給藥方式43
• 4.2.5 觀察指標(biāo)43
• 4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果43-49
• 4.3.1 SD 大鼠進(jìn)食和體重增長43-44
• 4.3.2 肝腎功能檢測44-47
• 4.3.3 免疫功能檢測47-49
• 4.3.4 病理學(xué)檢測49
• 4.4 討論49-50
• 4.5 小結(jié)50-51
• 第五章 結(jié)論51-52
• 參考文獻(xiàn)52-57
• 致謝57

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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  本文關(guān)鍵詞：重組靈芝免疫調(diào)節(jié)蛋白的安全性初步研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：282365