本文關鍵詞：羥喜樹堿MePEG-PLA納米粒的制備及其體外抗腫瘤研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的制備羥喜樹堿聚乙二醇單甲醚聚乳酸共聚物納米粒(hydroxyeamptotheeine-loaded MePEG-block-PLA copolymer nanoparticles, HCPT-MePEG-PLA-NPs),對其進行理化性質(zhì)及體外釋藥行為考察,并研究其體外抗腫瘤活性。以期以MePEG-PLA-NPs為載體延長藥物的釋放時間,增強其抗腫瘤活性。 方法選擇HPLC建立HCPT含量測定的分析方法。以聚乙二醇單甲醚聚乳酸共聚物(MePEG-PLA)為載體材料,采用復乳溶劑揮發(fā)法(emulsion/solvent evaporation method)制備羥喜樹堿MePEG-PLA納米粒。以納米粒粒徑、包封率及載藥量等為評價指標進行處方工藝的單因素考察,并用正交設計試驗優(yōu)化處方工藝,通過透射電子顯微鏡觀察HCPT-MePEG-PLA-NPs外觀形態(tài)、激光粒度測定儀測定其粒徑分布、Zeta電位,超速離心法考察其包封率及載藥量,采用透析法考察NPs的體外釋藥行為,并通過MTT染色法考察其對體外腫瘤細胞增殖的抑制作用、細胞形態(tài)結構變化等。 結果建立了HPCP含量測定的HPLC分析方法,在0.2～16.0μg·mL-1范圍內(nèi)呈良好的線性關系(r=0.9997)。經(jīng)過單因素考察和正交優(yōu)化確定的HCPT-MePEG-PLA-NPs最佳處方為MePEG-PLA用量為30mg,乳化劑濃度為2.0%,外水相體積為3mL。NPs外觀呈圓整球形,平均粒徑為(100.13±0.56)nm,多分散系數(shù)(PDI)為(0.08±0.02),Zeta電位為(2.31±0.38)mV。HCPT-MePEG-PLA-NPs包封率和載藥量分別為(61.40±1.65)%和(0.41-0.02)%；NPs在含20%乙醇的pH7.4PBS釋放介質(zhì)中具有明顯的緩釋特征,并能有效抑制腫瘤細胞的生長。 結論采用復乳溶劑揮發(fā)法制備的HCPT-MePEG-PLA-NPs表面圓整光滑,粒徑較小、分布均勻,包封率較高,NPs的體外釋放具有明顯緩釋特征,并有較強的體外抗腫瘤活性。本實驗結果為抗腫瘤藥物緩釋制劑的設計、開發(fā)與評價提供重要的理論和實踐參考。
【關鍵詞】：羥喜樹堿 聚乙二醇單甲醚聚乳酸共聚物 納米粒 制備 正交設計 理化性質(zhì) 體外抗腫瘤
【學位授予單位】：浙江中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R943;R96
【目錄】：

• 目錄3-6
• 中文摘要6-7
• ABSTRACT7-9
• 前言9-12
• 第一部分 羥喜樹堿體外分析方法的建立12-18
• 一、實驗材料12-13
• (一) 實驗藥品與試劑12-13
• (二) 實驗儀器13
• 二、方法與結果13-17
• (一) 吸收波長的選擇13
• (二) 色譜條件13
• (三) 對照品儲備液的配制13-14
• (四) 專屬性實驗14-15
• (五) 標準曲線的繪制15
• (六) 重復性實驗15-16
• (七) 精密度實驗16
• (八) 回收率實驗16-17
• 三、分析與討論17
• 四、小結17-18
• 第二部分 羥喜樹堿MePEG-PLA納米粒的制備18-38
• 一、實驗材料18-19
• (一) 實驗藥品與試劑18
• (二) 實驗儀器18-19
• 二、方法與結果19-32
• (一) 羥喜樹堿MePEG-PLA納米粒的制備19-25
• 1. 制備方法19
• 2. 單因素考察19-22
• 3. 處方工藝優(yōu)化22-25
• (二) 羥喜樹堿MePEG-PLA納米粒的理化性質(zhì)25-28
• 1. 外觀形態(tài)25-26
• 2. 平均粒徑及其分布、PDI和Zeta電位26-27
• 3. 包封率與載藥量27-28
• (三) 羥喜樹堿MePEG-PLA納米粒的體外釋放28-32
• 1. 釋放介質(zhì)的選擇28-29
• 2. 體外釋放分析方法的建立29-31
• 3. 體外釋放測定方法31
• 4. 體外釋放試驗結果31-32
• 三、分析與討論32-37
• (一) 載體材料32-33
• (二) 制備方法33
• (三) 處方工藝因素33-34
• (四) 理化性質(zhì)34-35
• 1. 外觀形態(tài)、平均粒徑、PDI、Zeta電位34-35
• 2. 包封率與載藥量35
• (五) 體外釋放35-37
• 四、小結37-38
• 第三部分 羥喜樹堿MePEG-PLA納米粒的體外抗腫瘤活性38-45
• 一、實驗材料38
• (一) 實驗藥品與試劑38
• (二) 實驗儀器38
• 二、方法與結果38-43
• (一) 主要試劑的配制38-39
• 1. 細胞培養(yǎng)液的配制38-39
• 2. D-Hanks的配制39
• 3. 胰蛋白酶溶液的配制39
• 4. PBS的配制39
• 5. MTT溶液的配制39
• (二) 體外抗腫瘤研究39-43
• 1. BEL-7402細胞株的復蘇與培養(yǎng)39
• 2. 體外抗腫瘤作用39-41
• 3. 細胞形態(tài)學觀察41-43
• 三、分析與討論43
• 四、小結43-45
• 結論45-46
• 參考文獻46-50
• 致謝50-51
• 文獻綜述51-58
• 參考文獻57-58

【參考文獻】

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  本文關鍵詞：羥喜樹堿MePEG-PLA納米粒的制備及其體外抗腫瘤研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號：269880