藥物小分子與牛血清白蛋白的光譜法研究
本文關(guān)鍵詞：小分子與血清白蛋白相互作用的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
《南昌大學(xué)》 2010年
藥物小分子與牛血清白蛋白的光譜法研究
汪雙雙
【摘要】： 本論文分別采用紫外-可見(jiàn)吸收光譜、熒光光譜為研究手段,研究了幾種有機(jī)小分子與牛血清白蛋白(bovine serum albumin, BSA)的相互作用。主要包括兩個(gè)方面的內(nèi)容：一、綜述了有機(jī)小分子與血清白蛋白相互作用的研究現(xiàn)狀及意義；二、在模擬人體生理?xiàng)l件下研究了幾種有機(jī)小分子與BSA相互作用的光譜信息,并結(jié)合化學(xué)計(jì)量學(xué)對(duì)其數(shù)據(jù)進(jìn)行解析。光譜法在小分子與生物大分子相互作用的研究領(lǐng)域的應(yīng)用日益廣泛,但是光譜法結(jié)合化學(xué)計(jì)量學(xué)來(lái)探討小分子與血清白蛋白的結(jié)合作用的文章還比較少。本論文嘗試將多種化學(xué)計(jì)量學(xué)方法用于解析實(shí)驗(yàn)得到的光譜數(shù)據(jù),討論了方法的原理和實(shí)際應(yīng)用,并探討了化學(xué)計(jì)量學(xué)在復(fù)雜的生物化學(xué)體系中實(shí)現(xiàn)同時(shí)解析多組分平衡濃度和純光譜的可行性。 論文第一部分首先簡(jiǎn)要的介紹了蛋白質(zhì)的定義、結(jié)構(gòu)、功能和性質(zhì)等,然后依次對(duì)小分子與血清白蛋白相互作用的研究方法、研究?jī)?nèi)容和存在的問(wèn)題等方面展開(kāi)了評(píng)述,探討了化學(xué)計(jì)量學(xué)在小分子與血清白蛋白相互作用研究中的應(yīng)用。最后還展望了小分子與血清白蛋白相互作用研究的發(fā)展趨勢(shì),將新探針的開(kāi)發(fā)、各種儀器方法的聯(lián)用及化學(xué)計(jì)量學(xué)方法的引入作為研究重點(diǎn)。 論文第二部分運(yùn)用熒光,紫外-可見(jiàn)以及同步熒光光譜研究了山姜素(APT)與BSA的相互作用。把所測(cè)得的混合物的一系列光潛數(shù)據(jù)用化學(xué)計(jì)量學(xué)方法—多元曲線解析-交替最小二乘法(MCR-ALS)來(lái)解析,得到混合物中純物質(zhì)光譜圖和濃度圖,這是一般方法所得不到的信息。而且,體系中生成的APT-BSA復(fù)合物被解析出來(lái),這也進(jìn)一步說(shuō)明APT對(duì)BSA的內(nèi)源熒光的猝滅是屬于靜態(tài)猝滅,并且形成了APT-BSA復(fù)合物。本文還計(jì)算出反應(yīng)的結(jié)合常數(shù)(Ka(ave)＝2.34×106 L mol-1)、結(jié)合位點(diǎn)數(shù)(n=1)以及熱力學(xué)常數(shù)(ΔH0,ΔS0和ΔG0),數(shù)據(jù)表明APT與BSA之間的作用力主要是疏水作用。通過(guò)把APT與BSA相互作用的熱力學(xué)參數(shù)與具有類似分子結(jié)構(gòu)的柯因和wogonin與BSA相互作用的熱力學(xué)參數(shù)進(jìn)行比較,結(jié)果表明焓變隨分子結(jié)構(gòu)的變化影響不大,此為熵驅(qū)動(dòng)反應(yīng)。BSA與APT相互作用的同步熒光光譜表明APT與BSA結(jié)合之后對(duì)BSA的空間構(gòu)象有一定影響。APT與位點(diǎn)探針的競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合實(shí)驗(yàn)說(shuō)明APT在BSA上的結(jié)合位點(diǎn)是在Ⅰ位。 論文第三部分是運(yùn)用熒光光譜法來(lái)研究溴鼠靈(BDF)與牛血清白蛋白(BSA)的相互作用。所測(cè)得的熒光光譜用SIMPLISMA進(jìn)行解析,這也是SIMPLISMA首次被用于小分子與BSA相互作用的研究,從中抽取了BDF-BSA混合體系中單個(gè)組分的純光譜圖。解析所得的光譜圖中含有BDF-BSA復(fù)合物的光譜,這也就說(shuō)明BDF與BSA相互作用機(jī)制是靜態(tài)猝滅。通過(guò)做BSA對(duì)BDF熒光敏化作用的實(shí)驗(yàn),結(jié)果表明BDF濃度越高,體系中的熒光量子產(chǎn)率就越大,導(dǎo)致BSA對(duì)BDF的敏化效應(yīng)越強(qiáng)。同步熒光光譜和三維熒光光譜是用于研究BSA構(gòu)象變化較好的方法,實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)BDF的加入很明顯的改變了BSA的空間構(gòu)象,使得BSA分子中色氨酸殘基的極性增加,疏水性下降,而B(niǎo)DF的加入并不會(huì)導(dǎo)致BSA分子中酪氨酸殘基周圍的環(huán)境發(fā)生變化。曙紅Y是一種新的Ⅰ位探針,本文利用曙紅Y來(lái)研究BDF在BSA上的結(jié)合位點(diǎn),結(jié)果表明曙紅Y與BDF并不會(huì)同時(shí)結(jié)合在BSA上,而是發(fā)生競(jìng)爭(zhēng)作用,曙紅Y把BDF競(jìng)爭(zhēng)來(lái)。 論文第四部分用熒光光譜法研究了克百威(carbofuran, CF)及其降解產(chǎn)物(carbofuran catabolite,CFP)與BSA結(jié)合反應(yīng)的光譜行為。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),CFP比CF對(duì)BSA有更強(qiáng)的熒光猝滅作用。本為采用了MCR-ALS來(lái)解析所得到的熒光光譜圖,得出溶液中存在三個(gè)組分,也就是說(shuō)CF(CFP)與BSA都發(fā)生了靜態(tài)猝滅作用產(chǎn)生了復(fù)合物。同時(shí)用三維熒光光譜和同步熒光光譜法探討了CF及CFP對(duì)BSA構(gòu)象的影響,為預(yù)防和醫(yī)治CF及CFP中毒提供了重要的依據(jù)。最后本文還研究了金屬離子對(duì)它們之間作用的影響。 論文第五部分在生理pH條件下用熒光光譜法和紫外光譜法結(jié)合化學(xué)計(jì)量學(xué)來(lái)研究10-羥基喜樹(shù)堿(10-HCPT)與BSA的相互作用,結(jié)果發(fā)現(xiàn)10-HCPT對(duì)BSA的內(nèi)源熒光有靜態(tài)猝滅作用。本文以華法林作為標(biāo)記藥物,采用三維熒光技術(shù),分別對(duì)競(jìng)爭(zhēng)實(shí)驗(yàn)過(guò)程進(jìn)行掃描,進(jìn)而用平行因子法(PARAFAC)處理所得三維數(shù)據(jù),并根據(jù)蛋白質(zhì)結(jié)合位上藥物的置換作用確定了10-HCPT的結(jié)合位置是BSA的siteⅠ。利用同步熒光光譜,考察了10-HCPT對(duì)BSA構(gòu)象的影響,結(jié)果發(fā)現(xiàn),10-HCPT的加入使BSA構(gòu)象發(fā)生變化,BSA內(nèi)部氨基酸殘基所處環(huán)境的疏水性下降。
【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號(hào)】：R96
【目錄】：
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8 畢淑云;藥物與生物分子相互作用的光譜法研究[D];吉林大學(xué);2006年
9 郭金家;海中有色可溶有機(jī)物熒光光譜現(xiàn)場(chǎng)探測(cè)技術(shù)研究[D];中國(guó)海洋大學(xué);2011年
10 吳丹;陽(yáng)離子型Gemini表面活性劑與蛋白質(zhì)的相互作用[D];山東大學(xué);2007年
中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條
1 吳慧琴;水消毒副產(chǎn)物三氯甲烷及金屬離子與蛋白質(zhì)的作用研究[D];山西大學(xué);2006年
2 汪雙雙;藥物小分子與牛血清白蛋白的光譜法研究[D];南昌大學(xué);2010年
3 任國(guó)發(fā);牛血清白蛋白的電化學(xué)研究及信息分析[D];河北師范大學(xué);2005年
4 劉欣;幾種黃酮類藥物小分子與牛血清白蛋白相互作用的研究[D];中南大學(xué);2010年
5 楊艷;鈾與牛血清白蛋白/七肽相互作用研究[D];南華大學(xué);2013年
6 倪永標(biāo);光譜法研究8Q5SAC與牛血清白蛋白相互作用[D];江西師范大學(xué);2011年
7 劉秋紅;幾種抗菌藥物與牛血清白蛋白相互作用的光譜法研究[D];南昌大學(xué);2011年
8 王斌;中藥小分子與牛血清白蛋白的相互作用[D];中南民族大學(xué);2011年
9 李凱;卡鉑白蛋白微球的制備及體外性質(zhì)研究[D];昆明醫(yī)學(xué)院;2005年
10 金艷紅;印染織品和廢水中直接染料的色譜與熒光分析研究[D];南昌大學(xué);2010年
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本文編號(hào)：234076
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