本文關(guān)鍵詞：小分子與血清白蛋白相互作用的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《中南大學(xué)》 2009年

光譜法研究三種黃酮類藥物小分子與牛血清白蛋白的相互作用

董念  

【摘要】： 血清白蛋白是血漿中含量最為豐富的蛋白質(zhì),它作為許多內(nèi)源性和外源性化合物的存儲(chǔ)和轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白,可以與許多藥物分子發(fā)生相互作用。黃酮類藥物小分子具有廣泛的藥理活性,如抗氧化、抗腫瘤、抗病毒、抗菌抗炎癥等活性,因此研究血清白蛋白與黃酮類藥物小分子的相互作用,對(duì)了解黃酮類藥物小分子在人體內(nèi)的吸收、分布、排泄、藥理活性和毒性都有十分重要的意義。本論文采用熒光光譜法、紫外可見(jiàn)吸收光譜法和紅外光譜法,研究了血清白蛋白分子與黃酮類藥物小分子芹菜素、高良姜素和染料木素分子之間的相互作用,得出了藥物與蛋白質(zhì)相互作用的機(jī)理、結(jié)合常數(shù)和結(jié)合位點(diǎn)數(shù)、熱力學(xué)結(jié)合參數(shù)、分子之間的結(jié)合距離、藥物小分子對(duì)蛋白質(zhì)構(gòu)象的變化和其他環(huán)境因素(如溶液的pH值和金屬離子的影響),并且從上述結(jié)論中得到了藥物與蛋白質(zhì)作用的生物活性基團(tuán)。所得結(jié)果對(duì)生物化學(xué)、制藥學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)和藥代動(dòng)力學(xué)具有一定的指導(dǎo)意義。 本論文工作主要從以下方面進(jìn)行研究: 1.采用熒光光譜法,利用藥物對(duì)牛血清白蛋白自身內(nèi)源熒光的猝滅,研究了芹菜素、高良姜素和染料木素這三種黃酮藥物小分子與牛血清白蛋白分子間的相互作用,研究發(fā)現(xiàn)藥物分子與牛血清白蛋白分子之間發(fā)生了有效的靜態(tài)猝滅,并探討了藥物小分子與牛血清白蛋白的結(jié)合位點(diǎn),求得不同溫度下的結(jié)合常數(shù),確定了分子間作用力主要是疏水作用力。 2.通過(guò)同步熒光技術(shù)、紫外-可見(jiàn)吸收光譜法和紅外光譜法,研究了牛血清白蛋白與這三種黃酮類藥物小分子作用前后,蛋白質(zhì)構(gòu)象所發(fā)生得改變,結(jié)果表明:蛋白質(zhì)在結(jié)合后,色氨酸殘基所處的微環(huán)境疏水性發(fā)生了改變,蛋白質(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu)也發(fā)生了改變,從而進(jìn)一步說(shuō)明這三種黃酮類藥物小分子與牛血清白蛋白發(fā)生了相互作用。 3.全面考察了pH值和金屬離子存在下對(duì)結(jié)合反應(yīng)的影響,反復(fù)論證了這三種黃酮藥物小分子與牛血清白蛋白之間的結(jié)合力還存在靜電作用力。從理論上推測(cè)了這些條件對(duì)相互作用影響的機(jī)理。 4.分別從熒光猝滅、結(jié)合常數(shù)和位點(diǎn)數(shù)、結(jié)合力、pH和金屬離子影響等方面,重點(diǎn)對(duì)比了這三種黃酮藥物小分子與牛血清白蛋白的結(jié)合情況。并結(jié)合這三種藥物分子結(jié)構(gòu)上的比較和分析,初步推斷這三種藥物小分子A環(huán)上5,7位酚羥基是藥物決定性的生物活性基團(tuán),B環(huán)上的酚羥基也是一重要的生物活性基團(tuán)。結(jié)果表明,這3種黃酮類化合物分子中的羥基數(shù)目以及位置對(duì)各藥物小分子與牛血清白蛋白的作用有重要影響,導(dǎo)致這3種黃酮類化合物與牛血清白蛋白發(fā)生相互作用的強(qiáng)弱不同,其作用力順序?yàn)榍鄄怂兀靖吡冀兀救玖夏舅�。這三種黃酮類小分子的疏水性大小依次為:芹菜素＞高良姜素＞染料木素,與作用力順序一致,從而也可證明這三種藥物小分子與牛血清白蛋白以疏水作用力為主。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：中南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2009
【分類號(hào)】：R96
【目錄】：

摘要3-5

ABSTRACT5-11

第一章 緒論11-30

1.1 血清白蛋白11-15

1.1.1 血清白蛋白的結(jié)構(gòu)11-13

1.1.2 血清白蛋白的生理結(jié)構(gòu)13-14

1.1.3 BSA的體外應(yīng)用14-15

1.2 藥物小分子與血清白蛋白相互作用的研究15-20

1.2.1 猝滅類型15-16

1.2.2 結(jié)合位點(diǎn)16

1.2.3 結(jié)合常數(shù)和結(jié)合位點(diǎn)數(shù)的測(cè)定16-17

1.2.4 結(jié)合距離17-18

1.2.5 作用力類型18-19

1.2.6 藥物分子對(duì)蛋白構(gòu)象的影響19-20

1.2.7 金屬離子的影響20

1.3 藥物小分子與血清白蛋白相互作用的光譜研究20-25

1.3.1 熒光光譜法21-22

1.3.2 紫外-可見(jiàn)吸收光譜22-23

1.3.3 紅外光譜法23

1.3.4 圓二色光譜法23-24

1.3.5 拉曼光譜24

1.3.6 瑞利共振散射技術(shù)24-25

1.3.7 其他方法25

1.4 黃酮類藥物小分子25-27

1.5 黃酮類藥物小分子與BSA研究現(xiàn)狀27-28

1.6 本文研究目的意義和主要內(nèi)容28-30

1.6.1 研究目的意義28

1.6.2 主要研究?jī)?nèi)容28-30

第二章 實(shí)驗(yàn)部分30-32

2.1 儀器與試劑30

2.1.1 儀器30

2.1.2 試劑30

2.2 實(shí)驗(yàn)方法30-32

2.2.1 熒光猝滅光譜和同步熒光光譜法30-31

2.2.2 紫外-可見(jiàn)吸收光譜法31

2.2.3 紅外光譜31-32

第三章 芹菜素與牛血清白蛋白相互作用的光譜法研究32-45

3.1 引言32-33

3.2 結(jié)果與討論33-38

3.2.1 Api對(duì)BSA熒光光譜的影響33-34

3.2.2 熒光猝滅類型34-35

3.2.3 結(jié)合常數(shù)和結(jié)合位點(diǎn)數(shù)35-37

3.2.4 結(jié)合距離37

3.2.5 作用力類型37-38

3.3 Api對(duì)BSA分子構(gòu)象的影響38-42

3.3.1 同步熒光光譜38-40

3.3.2 紫外-可見(jiàn)吸收光譜40

3.3.3 紅外光譜40-42

3.4 其他條件的影響42-43

3.4.1 pH值對(duì)結(jié)合反應(yīng)的影響42

3.4.2 金屬離子對(duì)結(jié)合反應(yīng)的影響42-43

3.5 小結(jié)43-45

第四章 高良姜素與牛血清白蛋白相互作用的光譜法研究45-55

4.1 引言45-46

4.2 結(jié)果與討論46-50

4.2.1 Gal對(duì)BSA熒光光譜的影響46-47

4.2.2 熒光猝滅類型47-48

4.2.3 結(jié)合常數(shù)和結(jié)合位點(diǎn)數(shù)48

4.2.4 結(jié)合距離48-49

4.2.5 作用力類型49-50

4.3 Gal對(duì)BSA分子構(gòu)象的影響50-52

4.3.1 同步熒光光譜50-51

4.3.2 紫外-可見(jiàn)吸收光譜51

4.3.3 紅外光譜51-52

4.4 其他條件的影響52-54

4.4.1 pH值對(duì)結(jié)合反應(yīng)的影響52-53

4.4.2 金屬離子對(duì)結(jié)合反應(yīng)的影響53-54

4.5 小結(jié)54-55

第五章 染料木素與牛血清白蛋白相互作用的光譜法研究55-65

5.1 引言55-56

5.2 結(jié)果與討論56-59

5.2.1 Gen對(duì)BSA熒光光譜的影響56-57

5.2.2 熒光猝滅類型57-58

5.2.3 結(jié)合常數(shù)和結(jié)合位點(diǎn)數(shù)58

5.2.4 結(jié)合距離58-59

5.2.5 作用力類型59

5.3 Gen對(duì)BSA分子構(gòu)象的影響59-62

5.3.1 同步熒光光譜59-61

5.3.2 紫外-可見(jiàn)吸收光譜61

5.3.3 紅外光譜61-62

5.4 其他條件的影響62-64

5.4.1 pH值對(duì)結(jié)合反應(yīng)的影響62-63

5.4.2 金屬離子對(duì)結(jié)合反應(yīng)的影響63-64

5.5 小結(jié)64-65

第六章 三種黃酮類藥物小分子與牛血清白蛋白相互作用比較65-71

6.1 引言65

6.2 三種黃酮類藥物小分子與BSA作用的比較65-67

6.2.1 熒光猝滅光譜的比較65-66

6.2.2 結(jié)合常數(shù)K_a與結(jié)合位點(diǎn)數(shù)n的比較66

6.2.3 結(jié)合距離的比較66-67

6.2.4 結(jié)合作用力的比較67

6.3 牛血清白蛋白構(gòu)象的研究67-68

6.3.1 同步熒光光譜的測(cè)定67-68

6.3.2 紫外-可見(jiàn)吸收光譜68

6.3.3 紅外光譜的測(cè)定68

6.4 其他條件對(duì)結(jié)合反應(yīng)的影響68-69

6.4.1 溶液pH的影響68

6.4.2 外加金屬離子的影響68-69

6.5 三種黃酮類藥物小分子與BSA的作用的構(gòu)效關(guān)系69-71

結(jié)論與展望71-72

參考文獻(xiàn)72-81

致謝81-82

碩士期間發(fā)表論文82

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6 楊睿,劉紹璞;某些分子光譜分析法測(cè)定蛋白質(zhì)的進(jìn)展[J];分析化學(xué);2001年02期

7 李核,李攻科,張展霞;影響微波輔助萃取虎杖中白藜蘆醇產(chǎn)率的一些重要操作參數(shù)[J];分析化學(xué);2003年11期

8 謝顯傳;王曉蓉;張幼寬;鄭建中;吳穎欣;薛銀剛;;十溴聯(lián)苯醚與牛血清白蛋白相互作用的熒光光譜研究[J];分析化學(xué);2010年10期

9 姜萍;武利慶;熱娜古力·嘎依提;李勤;胡曉明;戴榮繼;耿利娜;鄧玉林;;毛細(xì)管電泳前沿分析法及分子模擬輔助研究牛血清白蛋白與熒光素鈉的相互作用[J];分析化學(xué);2011年05期

10 張勇,張貴珠,王月梅,盧繼新;光譜法研究絲裂霉素、血清白蛋白以及金屬離子間的相互作用[J];分析科學(xué)學(xué)報(bào);2000年06期

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 周大煒;藥物-蛋白結(jié)合作用的HPCE和HPLC法研究[D];沈陽(yáng)藥科大學(xué);2003年

2 唐江宏;有機(jī)小分子與人血清白蛋白的相互作用研究[D];蘭州大學(xué);2006年

3 汪寶和;熒光探針的合成及表征[D];天津大學(xué);2005年

4 李穎;中藥有效成分與人血清白蛋白相互作用研究[D];蘭州大學(xué);2007年

5 關(guān)曉琳;新型溫度/pH熒光雙重響應(yīng)性高分子發(fā)光材料的合成及發(fā)光性能研究[D];蘭州大學(xué);2007年

6 周能;中藥活性成分與血清蛋白的相互作用及其對(duì)藥物結(jié)合影響的研究[D];中南大學(xué);2007年

7 胡葉碧;改性玉米皮膳食纖維的酶法制備及其降血脂機(jī)理研究[D];江南大學(xué);2008年

8 賀懷貞;新型Ca~（2+）熒光探針的設(shè)計(jì)、合成及胞內(nèi)信使作用研究[D];西北大學(xué);2009年

9 閆文娟;c-di-GMP信號(hào)通路在變形鏈球菌致齲過(guò)程中作用的初步研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2009年

10 李金華;某些中藥活性組分與蛋白質(zhì)相互作用研究[D];蘭州大學(xué);2009年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 郝娟;香豆素類和查爾酮類化合物與生物大分子的相互作用及其構(gòu)效關(guān)系研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2011年

2 黃茜;六種擬腎上腺素藥與三種球蛋白相互作用的研究及其應(yīng)用[D];山西醫(yī)科大學(xué);2011年

3 吳新虎;氯氮平和馬兜鈴酸I與人血清白蛋白的相互作用[D];蘭州大學(xué);2011年

4 李娜娜;光譜法和原子力顯微鏡研究小分子藥物與人血清白蛋白相互作用[D];汕頭大學(xué);2011年

5 李強(qiáng);黃酮類化合物與牛血清白蛋白的相互作用研究[D];南昌大學(xué);2011年

6 康倩倩;拉曼光譜法研究抗炎藥、抗生素及其與DNA的相互作用[D];西南大學(xué);2012年

7 郭建宇;拉曼光譜研究人血清白蛋白與藥物的相互作用[D];華東師范大學(xué);2004年

8 王婷;稀土離子與抗生素類藥物的相互作用及其在生命科學(xué)研究中的應(yīng)用[D];山東師范大學(xué);2006年

9 廖衛(wèi)平;熒光法研究中藥中有效成分與牛血清白蛋白的相互結(jié)合作用[D];山東大學(xué);2007年

10 李道金;藥物與蛋白質(zhì)的相互作用研究[D];蘭州大學(xué);2007年

【二級(jí)引證文獻(xiàn)】

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 張曉靜;膽酸類成分穩(wěn)定性及與蛋白相互作用研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2014年

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 朱峰,劉新光,梁念慈;大黃素、芹菜素抑制人卵巢癌細(xì)胞侵襲的體外實(shí)驗(yàn)研究[J];癌癥;2003年04期

2 D.Annanie,黃玉瑤;氯化二丁基錫對(duì)雄性小鼠睪丸和精子質(zhì)量的影響[J];動(dòng)物學(xué)報(bào);2000年04期

3 王亞俐,王海芳;光譜法研究苯甲酸鈉與牛血清白蛋白的作用[J];北京大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2002年02期

4 張義;趙春燕;孫亞芹;馬麗娟;張舵舵;;大豆異黃酮的抗腫瘤研究[J];長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2006年01期

5 謝明杰,陸敏,鄒翠霞,劉長(zhǎng)江,盧明春,金鳳燮;大豆異黃酮的抑菌作用[J];大豆科學(xué);2004年02期

6 王杰松,張俊平,張珉,錢定華;芹菜素抑制IL-1和脂多糖誘導(dǎo)軟骨細(xì)胞產(chǎn)生NO[J];第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);1999年06期

7 田燕;黃酮類化合物在聚酰胺上的層析行為[J];大連醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2002年02期

8 湯雪明,戴書文;生物樣品的環(huán)境掃描電鏡觀察[J];電子顯微學(xué)報(bào);2001年03期

9 江云寶,許金鉤,陳國(guó)珍;一類新的表面活性劑——長(zhǎng)鏈烷基三苯基鏻——Ⅵ.穩(wěn)態(tài)熒光猝滅法測(cè)定十二烷基三苯基溴化鏻膠束的平均簇集數(shù)[J];分析化學(xué);1992年10期

10 馮喜增,何錫文;生理液中金屬血卟啉絡(luò)合物的光譜研究[J];分析化學(xué);1993年11期

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 李瑞光;陳歷俊;姜鐵民;徐晨;;應(yīng)用平衡透析法分析藥物小分子與蛋白質(zhì)相互作用[J];生物技術(shù)通報(bào);2010年06期

2 周慧;宋鳳瑞;劉志強(qiáng);劉淑瑩;;超濾質(zhì)譜技術(shù)在藥物小分子與生物靶分子相互作用研究中的應(yīng)用[J];化學(xué)進(jìn)展;2010年11期

3 ;[J];;年期

4 ;[J];;年期

5 ;[J];;年期

6 ;[J];;年期

7 ;[J];;年期

8 ;[J];;年期

9 ;[J];;年期

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中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 蔡鎧陽(yáng);芯片高效液相色譜飛行時(shí)間質(zhì)譜聯(lián)用系統(tǒng)性能評(píng)價(jià)及藥物小分子分析[D];南京理工大學(xué);2009年

2 楊朝霞;幾種藥物小分子與蛋白質(zhì)作用的光譜研究[D];湖南師范大學(xué);2008年

3 霍彩霞;牛血清白蛋白與藥物分子相互作用研究[D];西北師范大學(xué);2007年

4 闕青民;幾種藥物小分子與生物大分子相互作用的研究[D];南昌大學(xué);2007年

相關(guān)機(jī)構(gòu)

>西北師范大學(xué)

>南昌大學(xué)

>南京理工大學(xué)

>湖南師范大學(xué)

相關(guān)作者

>闕青民 >蔡鎧陽(yáng)

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