模擬微重力對肺T淋巴細(xì)胞激活功能的影響
本文選題:模擬微重力 + 旋轉(zhuǎn)生物反應(yīng)器 ; 參考:《免疫學(xué)雜志》2007年05期
【摘要】:目的探討模擬微重力對肺T淋巴細(xì)胞活化功能的影響及機理。方法分離肺T淋巴細(xì)胞,利用的旋轉(zhuǎn)式細(xì)胞組織培養(yǎng)系統(tǒng)(RCCS,即旋轉(zhuǎn)生物反應(yīng)器)模擬微重力條件。培養(yǎng)T淋巴細(xì)胞后,采用PepTag非放射性PKC檢測試劑盒測定PKC活性;采用免疫組織化學(xué)染色觀察表達(dá)核因子-κB(NF-κB);酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)(雙抗體夾心ELISA法)測定白介素-2(IL-2)生成;采用流式細(xì)胞技術(shù)檢測表面抗原CD25。結(jié)果普通細(xì)胞培養(yǎng)容器組培養(yǎng)的T淋巴細(xì)胞,刀豆素蛋白A(ConA)組與對照組比較,T淋巴細(xì)胞PKC活性增強,NF-κB的免疫組化染色陽性細(xì)胞的百分比增加,IL-2生成增加,表面表達(dá)CD25的細(xì)胞增多(P0.01);模擬微重力條件下,與普通細(xì)胞培養(yǎng)容器培養(yǎng)的T淋巴細(xì)胞相比較,ConA刺激后,PKC活性降低,NF-κB免疫組化染色陽性細(xì)胞百分比減低,IL-2生成下降,表面表達(dá)CD25細(xì)胞減少(P0.01);模擬微重力條件下,加入PKC特異的激動劑PMA,和ConA共同培養(yǎng)的T淋巴細(xì)胞組,與同樣條件下ConA組相比,PKC活性略增強、NF-κB的免疫組化染色陽性細(xì)胞百分比、IL-2生成的量、表面表達(dá)CD25增加(P0.01)。結(jié)論模擬微重力條件下,T淋巴細(xì)胞的激活受到抑制;PKC的活性降低,表達(dá)NF-κB細(xì)胞數(shù)減少,表面表達(dá)CD25的細(xì)胞數(shù)降低,T淋巴細(xì)胞分泌的IL-2降低;同樣條件下,PMA對T淋巴細(xì)胞的上述指標(biāo)有部分恢復(fù)作用。
[Abstract]:Objective to investigate the effect and mechanism of simulated microgravity on the activation of lung T lymphocytes. Methods Lung T lymphocytes were isolated and the rotating cell tissue culture system (RCCS) was used to simulate microgravity conditions. After T lymphocytes were cultured, the activity of PKC was detected by PepTag non-radioactive PKC assay kit, the expression of nuclear factor- 魏 B (NF- 魏 B) was observed by immunohistochemical staining, the production of interleukin-2 (IL-2) was detected by enzyme-linked immunosorbent assay (Elisa). Surface antigen CD25 was detected by flow cytometry. Results compared with the control group, the percentage of PKC activity of T lymphocytes in the normal cell culture container group and concanavalin A Cona group was increased, and the percentage of the positive cells of NF- 魏 B immunocytochemical staining increased with the increase of IL-2 production. The number of cells expressing CD25 on the surface was increased, and the percentage of CD25 positive cells decreased after stimulation with Cona compared with that of T lymphocytes cultured in normal cell culture container under simulated microgravity, and the production of IL-2 was decreased in the cells that were positive for NF- 魏 B immunohistochemical staining. The surface expression of CD25 cells was reduced by P0.01G, and PKC specific agonist PMA and ConA co-cultured T lymphocytes were added under simulated microgravity. Compared with the same condition, the activity of ConA increased slightly the percentage of positive cells of NF- 魏 B and the amount of IL-2, and the expression of CD25 on the surface increased P0.01. Conclusion under simulated microgravity, the activation of T lymphocytes was inhibited, the number of NF- 魏 B cells was decreased, the number of cells expressing CD25 was decreased, and the IL-2 secreted by T lymphocytes was decreased. Under the same conditions, PMA can partially restore the above indexes of T lymphocytes.
【作者單位】: 武警總醫(yī)院博士后流動站 中國人民解放軍總醫(yī)院南樓呼吸科 武警總醫(yī)院醫(yī)學(xué)急救中心 武警總醫(yī)院呼吸科 武警總醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科
【分類號】:R85
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本文編號:1889835
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