發(fā)布時間：2017-11-30 07:06

  本文關鍵詞：火藥煙霧刺激損傷氣道上皮及葛根素防護作用的機制研究

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【摘要】：目的：1.構建火藥煙霧誘導氣道上皮細胞損傷實驗體系。2.通過火藥煙霧誘導氣道上皮細胞（BEAS-2B）上調炎性細胞因子基因表達、合成并釋放炎性細胞因子蛋白質以及不同劑量葛根素的干預研究，，探討火藥煙霧損傷氣道上皮及葛根素防護作用的發(fā)生機制。方法：1.在前期實驗基礎上構建火藥煙霧誘導氣道上皮細胞損傷實驗體系；2. MTT法檢測黑火藥煙霧作用一定時間后氣道上皮細胞存活率；3.根據(jù)細胞存活率將實驗隨機分為五組：①正常對照組（支氣管上皮細胞常規(guī)培養(yǎng)），②煙霧刺激組（黑火藥煙霧刺激10min），③煙霧刺激+葛根素防護組（分別用濃度為25，50，100μg/ml的葛根素于細胞培養(yǎng)12h后對其進行干預）；4.應用ELISA方法定量上述各組細胞培養(yǎng)上清液中炎性細胞因子濃度；5.應用實時熒光定量（Real-time）PCR方法檢測上述各組細胞培養(yǎng)2、6、8、12h后支氣管上皮細胞中炎性細胞因子基因表達水平。結果：1.黑火藥煙霧可導致氣道上皮細胞存活率下降（P0.05），加入葛根素后細胞存活率明顯提高，且呈劑量依賴性（P0.01）；2.黑火藥煙霧作用后，氣道上皮細胞培養(yǎng)上清液中炎性細胞因子IL-8（P0.05）、IL-6（P0.01）濃度顯著高于正常對照組，葛根素可有效抑制黑火藥煙霧誘導氣道上皮細胞分泌炎性細胞因子（IL-8、IL-6，P均0.01）并呈濃度依賴性；3.黑火藥煙霧作用氣道上皮細胞中IL-8和IL-6基因表達顯著增加（P均0.01），而培養(yǎng)體系中加入不同濃度葛根素干預，可有效抑制氣道上皮細胞中IL-8和IL-6基因的表達（P均0.01）。結論：1.火藥煙霧可通過誘導氣道上皮細胞中炎性細胞因子基因表達、蛋白質合成和釋放而導致其損傷的發(fā)生。2.葛根素可通過抑制火藥煙霧作用氣道上皮細胞中炎性細胞因子基因表達、蛋白質合成和釋放而防護火藥煙霧所致氣道上皮細胞的損傷。
【學位授予單位】：中國人民解放軍醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2012
【分類號】：R285.5;R82

【參考文獻】

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本文編號：1238443