本文關鍵詞：大鼠心肌分泌ANP增加可能致胰島素抵抗

  更多相關文章： 尾部懸吊模型 腹主動脈縮窄模型 ANP GLUT4 SNARE蛋白家族 胰島素抵抗

【摘要】：本世紀以來我國航天事業(yè)取得了驕人的成績，在快速發(fā)展的同時也面臨許多亟待解決的醫(yī)學難題，在失重狀態(tài)下發(fā)生的肌肉、骨骼和循環(huán)系統(tǒng)的變化尤為明顯。中長期失重狀態(tài)下骨骼肌發(fā)生萎縮，心臟的結構和功能、循環(huán)血量也會發(fā)生變化。這些變化會嚴重影響人類的航天活動，對航天員的健康與工作能力造成威脅。盡管對在失重狀態(tài)下的心臟結構和功能變化已經(jīng)做了大量的研究，但是，針對與體液調(diào)節(jié)有關的ANP的研究，國內(nèi)外尚缺乏一致的結論。含有ANP的囊泡與含有GLUT4的囊泡在轉(zhuǎn)運的過程中都需要SNARE蛋白家族的參與和調(diào)節(jié)。在心臟結構變化的基礎上，ANP分泌的變化對葡萄糖的轉(zhuǎn)運有何影響目前尚未發(fā)現(xiàn)相關研究報道，因此，對失重狀態(tài)下心臟ANP分泌的變化和ANP對葡萄糖轉(zhuǎn)運影響的研究，在航天醫(yī)學領域具有一定的應用價值，對于臨床相關疾病如糖尿病的防治亦具有一定的參考價值。 本實驗通過尾部懸吊(SUS)4w模擬失重和腹主動脈縮窄(TAC)20w大鼠模型，觀察了不同動物模型中ANP分泌的變化，相關SNARE家族蛋白表達的變化；在整體水平上胰島素敏感性的變化，在器官水平上心臟葡萄糖攝取量的變化；在心肌細胞水平上ANP、GLUT4與相關SNARE家族蛋白的共定位情況。本研究主要結果如下： (1)尾部懸吊和腹主動脈縮窄大鼠整體胰島素敏感性的變化 與同步對照組相比，尾部懸吊和腹主動脈縮窄模型大鼠整體的葡萄糖輸注率（glucose infusion rates, GIR）均低于同步對照組，表明兩個模型大鼠的胰島素敏感性均降低。 (2)尾部懸吊與腹主動脈縮窄大鼠心臟葡萄糖攝取的變化 在尾部懸吊模型中，心臟葡萄糖標準化攝取值（SUV值）較同步對照組降低。在加用胰島素的情況下，尾部懸吊模型（SUS+INS）心臟的SUV值亦低于同步對照組（CON+INS）。在未給予胰島素以及給予胰島素的兩種情況下，，尾部懸吊4w的大鼠心肌攝取葡萄糖的能力均較同步對照組降低。表明尾部懸吊大鼠心肌的葡萄糖轉(zhuǎn)運能力較同步對照組降低，對胰島素的敏感性亦降低。 在腹主動脈縮窄模型中，心臟葡萄糖標準化攝取值（SUV值）較同步對照組呈顯著性降低。在胰島素刺激條件下，腹主動脈縮窄模型（TAC+INS）心臟的SUV值與同步對照組（CON+INS）相比，亦呈顯著性降低。在未給予胰島素以及給予胰島素的兩種情況下，腹主動脈縮窄20w的大鼠心肌攝取葡萄糖的能力均較同步對照組降低。也表明了腹主動脈縮窄大鼠的心肌葡萄糖轉(zhuǎn)運的能力較同步對照組降低，對胰島素的敏感性亦降低。 (3)尾部懸吊與腹主動脈縮窄大鼠心肌ANP分泌及相關SNARE家族蛋白表達的變化 與同步對照組相比，尾部懸吊模型中：心房肌ANP表達增加，心室肌呈現(xiàn)ANP表達；v-SNARE即VAMP-1/-2在心房肌和心室肌中表達均增加；t-SNARE中SNAP-23在心房肌中表達增加，心室肌中表達未顯示明顯改變；SNARE調(diào)節(jié)蛋白即Synip和Munc-18c在心房肌和心室肌中的表達均未改變。 與同步對照組相比，腹主動脈縮窄模型中：心房肌ANP表達增加，心室肌呈現(xiàn)ANP表達；VAMP-1/-2在心房肌和心室肌中表達均增加；SNAP-23在心房肌中表達增加，心室肌中表達未見明顯改變；SNARE調(diào)節(jié)蛋白即Synip和Munc-18c在心房肌和心室肌中的表達均未改變。 (4)尾部懸吊與腹主動脈縮窄大鼠心肌細胞中ANP、GLUT4與相關SNARE家族蛋白的定位關系 在CON與SUS組大鼠左心室心肌細胞，ANP與VAMP-1/-2、ANP與Syntaxin-4之間均存在共定位關系；與CON組相比，SUS組的共定位明顯增強。GLUT4與VAMP-1/-2、GLUT4與Syntaxin-4之間也均存在共定位關系；與CON組相比，SUS組的共定位減弱。CON組與SUS組之間，ANP與GLUT4均無共定位。 在CON與TAC組大鼠左心室心肌細胞，ANP與VAMP-1/-2存在共定位關系；與CON組相比，TAC組的共定位明顯增強。ANP與Syntaxin-4也存在共定位關系；與CON組相比，TAC組的共定位無明顯變化。GLUT4與VAMP-1/-2、GLUT4與Syntaxin-4之間均存在共定位關系；與CON組相比，TAC組的共定位減弱。CON組與TAC組之間，ANP與GLUT4均無共定位。 綜上所述，尾部懸吊與腹主動脈縮窄兩種大鼠模型的實驗結果，均提示含ANP的囊泡與含GLUT4的囊泡在轉(zhuǎn)運過程中存在競爭關系，ANP分泌的增加會使含有ANP的囊泡所“占用”的VAMP-1/-2增多，導致含GLUT4的囊泡所“占用”的VAMP-1/-2減少，從而導致葡萄糖轉(zhuǎn)運效能降低，出現(xiàn)心肌局部的胰島素抵抗。
【關鍵詞】：尾部懸吊模型 腹主動脈縮窄模型 ANP GLUT4 SNARE蛋白家族 胰島素抵抗
【學位授予單位】：第四軍醫(yī)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R852.22
【目錄】：

• 縮略語表5-6
• 中文摘要6-9
• Abstract9-12
• 前言12-13
• 文獻回顧13-19
• 實驗一 尾部懸吊與腹主動脈縮窄大鼠心肌胰島素敏感性的變化19-28
• 1 引言19-20
• 2 材料與方法20-22
• 2.1 實驗動物20
• 2.2 懸吊模型與腹主動脈縮窄模型20
• 2.3 大鼠尾動脈血壓測量20-21
• 2.4 試劑21
• 2.5 正常血糖-高胰島素鉗夾實驗21-22
• 2.6 心肌葡萄糖攝取實驗22
• 2.7 圖像分析及數(shù)據(jù)統(tǒng)計22
• 3 結果22-26
• 3.1 腹主動脈縮窄大鼠血壓變化22
• 3.2 尾部懸吊 4 w 組大鼠與同步對照組大鼠正常血糖-高胰島素鉗夾實驗22-24
• 3.3 腹主動脈縮窄 20 w 大鼠正常血糖-高胰島素鉗夾實驗24-25
• 3.4 尾部懸吊 4 w 組大鼠與同步對照組大鼠心臟葡萄糖攝取率25
• 3.5 腹主動脈縮窄 20 w 組大鼠與同步對照組大鼠心臟葡萄糖攝取率25-26
• 4 討論26-28
• 4.1 尾部懸吊和腹主動脈縮窄大鼠的葡萄糖輸注率均降低26
• 4.2 尾部懸吊和腹主動脈縮窄大鼠心臟葡萄糖攝取的變化26-28
• 實驗二 心肌 ANP 與 SNARE 蛋白表達的變化28-43
• 1 引言28
• 2 材料與方法28-31
• 2.1 實驗動物28-29
• 2.2 懸吊模型及腹主動脈縮窄模型29
• 2.3 抗體與試劑29
• 2.4 蛋白印跡技術29-30
• 2.5 圖像分析及數(shù)據(jù)統(tǒng)計30-31
• 3 結果31-40
• 3.1 大鼠體重、心臟與比目魚肌質(zhì)量的變化31-32
• 3.2 尾部懸吊 4 w 大鼠心房、心室肌 ANP 與相關 SNARE 蛋白表達的變化32-36
• 3.3 腹主動脈縮窄 20 w 大鼠心房、心室肌 ANP 與相關 SNARE 蛋白表達的變化36-40
• 4 討論40-43
• 實驗三 ANP、GLUT4 與 SNARE 蛋白在心肌細胞中的分布43-56
• 1 引言43
• 2 材料與方法43-46
• 2.1 實驗動物43-44
• 2.2 懸吊模型及腹主動脈縮窄模型44
• 2.3 抗體與試劑44
• 2.4 大鼠心肌細胞分離酶消化法44-45
• 2.5 細胞免疫熒光45
• 2.6 圖像分析及數(shù)據(jù)統(tǒng)計45-46
• 3 結果46-54
• 3.1 尾部懸吊 4 w 大鼠心室肌 ANP 與相關 SNARE 蛋白的共定位情況46-47
• 3.2 尾部懸吊 4 w 大鼠心室肌 GLUT4 與相關 SNARE 蛋白的共定位情況47-49
• 3.3 尾部懸吊 4 w 大鼠 ANP 與 GLUT4 的共定位情況49-50
• 3.5 腹主動脈縮窄 20 w 大鼠心室肌 ANP 與相關 SNARE 蛋白的共定位情況50-51
• 3.6 腹主動脈縮窄 20 w 大鼠 GLUT4 與相關 SNARE 蛋白的共定位情況51-53
• 3.7 尾部懸吊 4 w 大鼠 GLUT4 與 ANP 的共定位情況53-54
• 4 討論54-56
• 4.1 尾部懸吊 4 w 大鼠 ANP 與 GLUT4 及 SNARE 相關蛋白的定位關系54
• 4.2 腹主動脈縮窄 20 w 大鼠 ANP 與 GLUT4 及 SNARE 相關蛋白的定位關系54-56
• 小結56-57
• 參考文獻57-63
• 個人簡歷和研究成果63-64
• 致謝64

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

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本文編號：1133768