本文關(guān)鍵詞：封閉負壓引流對軟組織爆炸創(chuàng)面的影響

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【摘要】：一、研究背景 自20世紀(jì)90年代,全球性的新軍事變革蓬勃興起,現(xiàn)代多發(fā)的局部戰(zhàn)爭中,由于作戰(zhàn)防護裝備精良及救治措施的及時有效,傷員的死亡率大大降低,但爆炸所致的軟組織傷仍是導(dǎo)致部隊減員、戰(zhàn)斗力削弱的重要原因。爆炸所引起的沖擊波及熱氣浪對人體組織可造成嚴重的損傷,可引起組織缺損,并殘留異物,引起感染。封閉負壓引流(vacuum sealing drainage,VSD)是一種新型創(chuàng)面治療技術(shù),具有價格低廉、操作相對簡單、顯著降低醫(yī)護人員工作量、可有效控制和減輕感染等優(yōu)點,但目前VSD用于戰(zhàn)場中的爆炸傷研究比較少。本課題模擬戰(zhàn)場中爆炸所致的軟組織創(chuàng)傷在前方醫(yī)院進行徹底清創(chuàng),然后對傷口進行封閉負壓引流治療,在術(shù)后3天、6天觀察創(chuàng)面的細菌數(shù)量、膠原和VEGF含量的變化。進一步探討VSD對爆炸所致的軟組織創(chuàng)傷的愈合作用,為現(xiàn)代戰(zhàn)爭中爆炸所致的軟組織創(chuàng)傷治療提供一個科學(xué)和有效的方法。 二、研究目的 觀察封閉負壓引流(vacuum sealing drainage,VSD)對軟組織爆炸創(chuàng)面早期愈合的影響,為戰(zhàn)場中所致的爆炸傷初級救治提供新的思路。同時研制便攜式手動負壓吸引裝置。 三、研究內(nèi)容和方法 1研制便攜式手動負壓吸引裝置 研發(fā)便攜式手動負壓引流裝置,設(shè)計上要求體積小、攜帶方便,不依賴電源,操作簡單且維持負壓效果好,由專業(yè)廠家按設(shè)計要求制作。產(chǎn)品用于臨床安全可靠。 2創(chuàng)面細菌計數(shù) 實驗組和對照組于治療前、治療后3d和6d分別選取創(chuàng)面表面不同的5個位置切取約0.1cm×0.1cm×0.1cm的組織,稱重后用眼科剪刀剪碎,加入99倍重量的無菌生理鹽水,用玻璃勻漿器勻漿。將勻漿液按10倍比例稀釋(10×,100×,1000×…),取100μL稀釋液接種到10cm的血瓊脂糖平板上,37℃孵育24h,計數(shù)平板上的細菌菌落數(shù)。每克組織內(nèi)的細菌數(shù)=菌落數(shù)×103×稀釋倍數(shù)。 3 Masson染色的病理組織學(xué)制備: 在治療3d和6d后分別對每個創(chuàng)面進行矢狀面病理取材,將所取的新鮮標(biāo)本置于體積分數(shù)10%的中性甲醛溶液(0.1mol/L,PH=7.4)中固定3d。固定好之后取材,逐級脫水至二甲苯透明,石蠟包埋,切片后脫蠟至水,進行Masson氏染色。光學(xué)顯微鏡觀察,用Image-Pro plus6.0圖像軟件對Masson染色的肉芽組織中膠原(綠色)含量進行掃描測定,即:膠原含量%=膠原面積/總面積×100%。 4 VEGF蛋白質(zhì)印跡分析 各組治療3d和6d后在創(chuàng)面下部切取約100mg的組織,4℃預(yù)冷的PBS漂洗新鮮組織兩遍后,將組織充分研磨后加入0.5ml的裂解液于冰上冰浴30min。4℃,14000g離心20min,取上清即為總蛋白。采用BCA法對蛋白樣品進行定量,8%SDS-PAGE凝膠電泳分離后,將蛋白轉(zhuǎn)至PVDF膜上,封閉2h,然后加入一抗,4°C過夜;次日加入二抗37℃孵育2h;用增強化學(xué)發(fā)光法檢測目的蛋白,X光片的曝光時間視實驗效果而定,灰度值使用Image-Pro plus6.0軟件掃描測定。 5統(tǒng)計學(xué)處理 數(shù)據(jù)統(tǒng)計采用SPSS16.0統(tǒng)計軟件進行分析,測定結(jié)果均以均數(shù)標(biāo)準(zhǔn)差( x±SD)表示,組間比較采用配對t檢驗,P值0.05為差異顯著有統(tǒng)計學(xué)意義。 四、結(jié)果 1便攜式負壓引流裝置成品用于臨床及動物實驗,效果良好,且已申請專利。 2可視下創(chuàng)面的改變 爆炸后創(chuàng)面大小在85～105cm2之間,創(chuàng)面燒焦,污染嚴重,周邊皮緣2.5cm范圍內(nèi)水腫,皮膚呈哆開狀,最大哆開距離5cm,傷口有明顯的出血,爆炸后在創(chuàng)面周邊皮膚形成清晰的紅色暈圈。治療3d后,實驗組創(chuàng)面有大量的顆粒狀肉芽組織,創(chuàng)面清潔,無異味,觸之易出血,無明顯的水腫和繼發(fā)性壞死組織;對照組創(chuàng)面表面有灰色的繼發(fā)性壞死組織和乳黃色黏稠狀滲出物,創(chuàng)面有腥臭味,創(chuàng)面周圍的皮膚組織水腫,并有些紅。治療6d后,實驗組創(chuàng)面顆粒狀肉芽組織豐富,色澤鮮紅,血運豐富,創(chuàng)面清潔,無異味,創(chuàng)面深度明顯減小,無水腫和繼發(fā)性壞死組織,周圍皮膚組織正常;對照組創(chuàng)面表面有大量黑色的繼發(fā)性壞死組織和乳黃色黏稠狀滲出物,肌肉組織形成裂痕,創(chuàng)面惡臭,明顯感染和水腫。 3細菌學(xué)檢測的結(jié)果 爆炸后3h和徹底清創(chuàng)后在實驗組和對照組間細菌數(shù)無明顯差異(P0.05),治療3d后和治療6d后在實驗組和對照組間細菌數(shù)差異極顯著(P 0.01)。實驗組始終沒有達到感染臨界值105,治療3d后細菌數(shù)達到104,但治療6d后細菌數(shù)有所下降。對照組3d后細菌數(shù)就已超過感染臨界值10~5,6d后的細菌數(shù)竟達到10~9,表面創(chuàng)面明顯發(fā)生感染。 4 Masson染色的結(jié)果 治療3d后,實驗組和對照組創(chuàng)面中新生肉芽組織的膠原含量有顯著性差異(P0.01),實驗組的膠原合成量明顯高于對照組的量;治療6d后,實驗組和對照組的膠原含量差異極顯著(P0.01)。隨著治療時間的推移,實驗組和對照組新生肉芽組織的膠原含量的差異越來越明顯。 5蛋白質(zhì)印跡分析 治療后,創(chuàng)面中的VEGF含量隨時間的增加不斷積累,A組與B組的變化趨勢一致,治療3d和6d后,A組VEGF的含量明顯高于B組的含量,各檢測時間點差異顯著,有統(tǒng)計學(xué)意義。 五、結(jié)論 1、由VSD創(chuàng)面?zhèn)诘目梢曈^察與細菌學(xué)比較實驗均證實爆炸創(chuàng)面早期運用VSD療法,可抑制細菌增殖,降低感染率。 2、通過Masson染色的結(jié)果得出,VSD可促進創(chuàng)面中新生肉芽組織的膠原含量上升。 3、由VEGF蛋白質(zhì)印跡分析實驗證實實驗組的膠原含量明顯高于對照組,并隨著時間推移,實驗組和對照組新生肉芽組織的膠原含量的差異越來越明顯。 4、VSD在軟組織爆炸創(chuàng)面修復(fù)過程中具有廣闊的應(yīng)用前景。
【關(guān)鍵詞】：爆炸傷 封閉負壓引流 細菌學(xué) 膠原 血管內(nèi)皮生長因子
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號】：R641
【目錄】：

• 縮略語表5-6
• 中文摘要6-10
• 英文摘要10-16
• 前言16-18
• 文獻回顧18-24
• 一、VSD 發(fā)展歷史18
• 二、相關(guān)實驗研究18-22
• 小結(jié)22-24
• 第一部分 便攜式封閉負壓引流系統(tǒng)的研制及應(yīng)用24-28
• 1 設(shè)計方案24-26
• 2 材料及制作26
• 3 應(yīng)用情況26
• 4 小結(jié)26-28
• 第二部分 軟組織爆炸創(chuàng)面研究28-36
• 1 材料和方法29-30
• 2 結(jié)果30-32
• 3 討論32-34
• 4 小結(jié)34-36
• 第三部分 軟組織爆炸創(chuàng)面蛋白質(zhì)印跡分析的比較研究36-48
• 1 材料與方法36-44
• 2 結(jié)果44-45
• 3 討論45-47
• 4 小結(jié)47-48
• 小結(jié)48-49
• 參考文獻49-53
• 附錄53-57
• 個人簡歷和研究成果57-58
• 致謝58

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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本文編號：1051267