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模擬微重力抑制間充質(zhì)干細(xì)胞增殖及成骨分化機制的研究

發(fā)布時間:2017-09-09 12:26

  本文關(guān)鍵詞:模擬微重力抑制間充質(zhì)干細(xì)胞增殖及成骨分化機制的研究


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【摘要】:微重力對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖和成骨分化的抑制可能是太空飛行過程中骨形成降低的原因之一,其機制可能涉及與細(xì)胞生長和分化的信號傳導(dǎo)相關(guān)的細(xì)胞粘附性和細(xì)胞骨架的變化。 本課題以小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)為實驗對象,利用隨機定位儀(RPM)模擬微重力(SMG),研究模擬微重力對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖,細(xì)胞骨架,細(xì)胞核,成骨分化,以及對細(xì)胞的粘附,增殖和成骨分化的重要信號分子的表達(dá)的影響。 實驗內(nèi)容包括:BMSCs生長曲線的測定,免疫熒光染色法研究細(xì)胞微管和微絲骨架的變化、細(xì)胞核骨架成分LaminA和SUN1的改變、粘著斑蛋白VCL的變化,,免疫印跡法檢測增殖相關(guān)重要信號分子ERK、p-ERK、AKT、p-AKT、p85α、p85β的蛋白表達(dá)量和活性的變化。免疫熒光染色法和免疫印跡法結(jié)合檢測粘附相關(guān)分子粘著斑激酶FAK蛋白表達(dá)量和活性的變化。在SMG和1G條件下用成骨誘導(dǎo)液定向誘導(dǎo)培養(yǎng)小鼠BMSCs,采用茜素紅染色、堿性磷酸酶ALP測定BMSCs向成骨細(xì)胞分化的情況,RT-PCR法測定分化相關(guān)基因OC的表達(dá),免疫印跡法檢測分化相關(guān)重要信號分子ERK、p-ERK、AKT、p-AKT、p85β的蛋白表達(dá)量和活性的變化 實驗結(jié)果顯示,在模擬微重力條件下,骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖和成骨分化受到抑制;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞微絲結(jié)構(gòu)和分布異常;細(xì)胞形態(tài)改變;細(xì)胞粘附性降低,粘著斑蛋白VCL和黏著斑激酶FAK的表達(dá)下降;細(xì)胞生長和分化信號分子ERK1/2和AKT的磷酸化水平以及p85β表達(dá)下降。 上述研究結(jié)果表明,模擬微重力條件下的細(xì)胞骨架改變、細(xì)胞粘附性降低和細(xì)胞增殖以及成骨分化的信號通路相互作用,導(dǎo)致對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖和成骨分化的抑制作用。
【關(guān)鍵詞】:模擬微重力 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 小鼠 細(xì)胞增殖 成骨分化 信號通路
【學(xué)位授予單位】:北京理工大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R85
【目錄】:
  • 摘要5-6
  • Abstract6-8
  • 目錄8-10
  • 注釋表10-11
  • 第1章 緒論11-20
  • 1.1 研究背景及目的11
  • 1.2 國內(nèi)外研究現(xiàn)狀及發(fā)展趨勢11-15
  • 1.2.1 微重力及地面模擬微重力的模型11-13
  • 1.2.2 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)13
  • 1.2.3 微重力對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞影響的研究進(jìn)展13-15
  • 1.3 課題的研究內(nèi)容和意義15-20
  • 1.3.1 課題的研究內(nèi)容15-17
  • 1.3.2 技術(shù)路線17-19
  • 1.3.3 課題的研究意義19-20
  • 第2章 模擬微重力(SMG)對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)增殖的影響及機制研究20-43
  • 引言20-21
  • 2.1 模擬微重力(SMG)對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)增殖的影響21-32
  • 2.1.1 實驗材料21-22
  • 2.1.2 實驗方法22-24
  • 2.1.3 實驗結(jié)果24-32
  • 2.2 模擬微重力(SMG)影響骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)增殖的機制32-41
  • 2.2.1 實驗材料32-34
  • 2.2.2 實驗方法34-37
  • 2.2.3 實驗結(jié)果37-41
  • 2.3 本章小結(jié)41-43
  • 第3章 模擬微重力(SMG)對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)向成骨分化的影響及機制研究43-62
  • 引言43-44
  • 3.1 模擬微重力(SMG)對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)向成骨分化的影響44-53
  • 3.1.1 實驗材料44-45
  • 3.1.2 實驗方法45-50
  • 3.1.3 實驗結(jié)果50-53
  • 3.2 模擬微重力(SMG)影響骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)向成骨分化的機制 .53-60
  • 3.2.1 實驗材料53-55
  • 3.2.2 實驗方法55-58
  • 3.2.3 實驗結(jié)果58-60
  • 3.3 本章小結(jié)60-62
  • 結(jié)論與展望62-64
  • 結(jié)論62-63
  • 展望63-64
  • 參考文獻(xiàn)64-70
  • 致謝70

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號:820439

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