本文關(guān)鍵詞：力竭運(yùn)動及鈍挫傷對大鼠骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞體外增殖及MSTN含量的影響

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【摘要】：目的：研究力竭運(yùn)動及鈍挫傷對大鼠骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞以及肌肉生長抑制素(MSTN)影響。 方法：選取24只wistar雄性大鼠,隨機(jī)分為4組,每組6只。分別是安靜對照組(control,C);力竭運(yùn)動組(Exhaustive exercise group):力竭運(yùn)動組進(jìn)行一次力竭性下坡跑運(yùn)動均達(dá)到力竭狀態(tài),并取即刻組(Exhaustive,EO)、力竭后24h組(E24)、力竭后48h組(E48)。力竭運(yùn)動組和安靜對照組分別于末次力竭運(yùn)動后不同時問點(diǎn)和安靜狀態(tài)下進(jìn)行麻醉,宰殺并取下心肌和左側(cè)腓腸肌,腓腸肌一分為二,一份立即進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn),另一份腓腸肌和心肌放在液氮保存待檢測肌肉生長抑制素(MSTN)的變化。鈍挫傷組：選取3只wistar雄性大鼠,分別鈍挫傷即刻組(Contusion,D0)、24h組(D24)、48h組(D48),進(jìn)行鈍挫傷的操作后,將三組分別在即刻、24h、48h進(jìn)行麻醉,摘取左側(cè)腓腸肌,即刻進(jìn)行肌衛(wèi)星細(xì)胞培養(yǎng)；另取新生鼠1只,宰殺后取下左側(cè)腓腸肌,同樣進(jìn)行肌衛(wèi)星細(xì)胞培養(yǎng)。 結(jié)果：(1)肌衛(wèi)星細(xì)胞培養(yǎng)的結(jié)果：通過分離消化大鼠肌組織,‘可在體外獲得高純度的具有成肌能力的肌衛(wèi)星細(xì)胞。 在培養(yǎng)初始階段除了新生組各組的肌衛(wèi)星細(xì)胞增殖速度較慢,第五天時開始大量增殖,到第七天時增殖達(dá)到高峰,基本布滿大部分培養(yǎng)皿,之后增殖速度下降。從各組之間比較看出,新生鼠組肌衛(wèi)星細(xì)胞含量最高,增殖速度最快,在培養(yǎng)第二天便可見少量紡錘形的單核細(xì)胞出現(xiàn)；在第四天就大量增殖,當(dāng)培養(yǎng)5天后,衛(wèi)星細(xì)胞相互融合形成多核的肌管；安靜對照組肌衛(wèi)星細(xì)胞含量最少，，且增殖速度最慢；而鈍挫傷組和力竭運(yùn)動組介于新生鼠組和對照組之間,且鈍挫傷組肌衛(wèi)星細(xì)胞數(shù)量相對較多。 (2)ELISA結(jié)果顯示：一次力竭訓(xùn)練后與安靜對照組相比,力竭組E0、E24、E48骨骼肌和心肌中MSTN的含量均下降,均具有顯著性差異(P0.01)。而力竭組E0、E24、E48之間沒有顯著性差異。 結(jié)論：(1)鈍挫傷組和力竭運(yùn)動組骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞增殖比安靜對照組快,數(shù)量繁殖更多。并且鈍挫傷組比力竭運(yùn)動組肌衛(wèi)星細(xì)胞數(shù)量更多。鈍挫傷和力竭運(yùn)動導(dǎo)致的肌衛(wèi)星細(xì)胞激活和損傷修復(fù)途徑基本一致,但程度有所不同；新生鼠在沒有外力條件下,其肌衛(wèi)星細(xì)胞數(shù)量較多、增殖能力較強(qiáng)。說明新生鼠體內(nèi)的肌衛(wèi)星細(xì)胞并未處于靜息狀態(tài)。 (2)力竭運(yùn)動和恢復(fù)期間的大鼠骨骼肌和心肌內(nèi)的MSTN含量明顯低于安靜對照組,而力竭各組(E0、E24、E48)之間無顯著性差異。提示力竭運(yùn)動可以下調(diào)MSTN含量,MSTN可能在肌衛(wèi)星細(xì)胞激活及骨骼肌和心肌修復(fù)中起著負(fù)調(diào)節(jié)作用。
【關(guān)鍵詞】：力竭運(yùn)動 鈍挫傷 肌衛(wèi)星細(xì)胞 肌肉生長抑制素
【學(xué)位授予單位】：揚(yáng)州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：G804.2;R87
【目錄】：

• 中文摘要2-4
• ABSTRACT4-6
• 縮略詞表6-10
• 前言10-12
• 第一部分 文獻(xiàn)綜述12-28
• 1 骨骼肌概述12-16
• 1.1 骨骼肌的解剖生理12
• 1.2 骨骼肌運(yùn)動性微損傷的研究進(jìn)展12-15
• 1.2.1 機(jī)械損傷假說13
• 1.2.2 自由基損傷假說13-14
• 1.2.3 細(xì)胞內(nèi)鈣穩(wěn)態(tài)失調(diào)學(xué)說14
• 1.2.4 急性炎癥反應(yīng)學(xué)說14
• 1.2.5 能量代謝紊亂學(xué)說14-15
• 1.3 骨骼肌損傷后修復(fù)再生的生物學(xué)基礎(chǔ)15-16
• 2 運(yùn)動訓(xùn)練對骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞的影響16-22
• 2.1 骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞概述16
• 2.2 骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞的分離純化16-18
• 2.2.1 組織塊培養(yǎng)法16-17
• 2.2.2 混合分離法17
• 2.2.3 聯(lián)合酶消化法17
• 2.2.4 純化17-18
• 2.3 骨路肌衛(wèi)星細(xì)胞培養(yǎng)18-19
• 2.3.1 細(xì)胞貼壁培養(yǎng)18
• 2.3.2 肌衛(wèi)星細(xì)胞培養(yǎng)條件18-19
• 2.4 肌衛(wèi)星細(xì)胞的鑒定19
• 2.5 肌衛(wèi)星細(xì)胞在肌肉修復(fù)中的作用19-20
• 2.6 肌衛(wèi)星細(xì)胞激活與成肌分化的調(diào)控20-21
• 2.6.1 成肌調(diào)節(jié)因子對SC增殖與成肌分化的調(diào)節(jié)20
• 2.6.2 生長因子對SC增殖與成肌分化的調(diào)節(jié)20-21
• 2.7 運(yùn)動訓(xùn)練對骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞的影響21-22
• 2.7.1 長期運(yùn)動訓(xùn)練對骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞的影響21-22
• 2.7.2 短期運(yùn)動訓(xùn)練對骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞的影響22
• 2.7.3 一次急性運(yùn)動對骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞的影響22
• 3 鈍挫傷對骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞及其損傷修復(fù)的影響22-23
• 4 運(yùn)動訓(xùn)練對MSTN的影響23-28
• 4.1 MSTN概述23-24
• 4.2 MSTN的生物功能24-25
• 4.2.1 對肌肉的影響24
• 4.2.2 參與脂肪累積24
• 4.2.3 影響細(xì)胞類型和器官系統(tǒng)的分化24-25
• 4.3 MSTN的作用機(jī)制25-26
• 4.3.1 MSTN加工的蛋白水解過程25
• 4.3.2 MSTN調(diào)控成肌細(xì)胞細(xì)胞周期抑制肌肉生長25-26
• 4.3.3 MSTN調(diào)節(jié)骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞的機(jī)制26
• 4.4 運(yùn)動訓(xùn)練對MSTN的影響26-28
• 第二部分 實(shí)驗(yàn)部分28-53
• 1 實(shí)驗(yàn)對象與方法28-30
• 1.1 實(shí)驗(yàn)對象28
• 1.2 動物分組28
• 1.3 動物模型28-29
• 1.3.1 鈍挫傷模型28-29
• 1.3.2 力竭運(yùn)動模型29
• 1.4 實(shí)驗(yàn)取材29-30
• 1.4.1 安靜對照組取材29
• 1.4.2 鈍挫傷組取材29-30
• 1.4.3 力竭運(yùn)動組取材30
• 1.4.4 新生鼠組取材30
• 2 實(shí)驗(yàn)儀器、試劑及方法30-35
• 2.1 實(shí)驗(yàn)儀器30-31
• 2.2 實(shí)驗(yàn)試劑31
• 2.3 培養(yǎng)基的新配制31-32
• 2.4 大鼠骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞的培養(yǎng)方法32-34
• 2.4.1 大鼠骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞培養(yǎng)的條件要求32-33
• 2.4.2 大鼠骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞的分離及培養(yǎng)方法33-34
• 2.5 酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)的方法(ELISA)34-35
• 2.6 測定蛋白含量的方法35
• 2.6.1 蛋白測定條件要求35
• 2.6.2 蛋白含量的測定35
• 3 數(shù)據(jù)處理35-36
• 4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析36-49
• 4.1 大鼠一般情況觀察36
• 4.2 對力竭運(yùn)動及鈍挫傷不同期間大鼠和新生鼠SC體外培養(yǎng)的結(jié)果36-47
• 4.2.1 各組培養(yǎng)1天后的衛(wèi)星細(xì)胞狀況36-38
• 4.2.2 各組培養(yǎng)3天后的衛(wèi)星細(xì)胞狀況38-41
• 4.2.3 各組培養(yǎng)5天后的衛(wèi)星細(xì)胞狀況41-44
• 4.2.4 各組培養(yǎng)第7天后的衛(wèi)星細(xì)胞狀況44-47
• 4.3 力竭運(yùn)動及恢復(fù)期間大鼠骨骼肌MSTN的變化情況47-48
• 4.4 力竭運(yùn)動及恢復(fù)期間大鼠心肌中MSTN的變化情況48-49
• 5 討論與分析49-53
• 5.1 骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞的培養(yǎng)49-50
• 5.2 力竭運(yùn)動、鈍挫傷和新生鼠SC體外培養(yǎng)增殖和分化的情況對比50-51
• 5.3 力竭運(yùn)動對大鼠骨骼肌MSTN的影響51-52
• 5.4 力竭運(yùn)動對大鼠心肌MSTN的影響52-53
• 6 結(jié)論53
• 參考文獻(xiàn)53-62
• 致謝62-63

【參考文獻(xiàn)】

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10 馮毅

本文編號：736114