本文關(guān)鍵詞：有氧運動干預(yù)對大鼠腦衰老及學(xué)習記憶能力和小腦GAP-43基因表達的影響

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【摘要】：目的:本研究通過在大鼠衰老的不同時期進行有氧運動干預(yù),探討在不同衰老時期進行有氧運動干預(yù)對大鼠腦衰老及學(xué)習記憶能力和小腦GAP-43基因表達的影響。方法:選取成年3月齡雄性SPF級Sprague Dawley(SD)大鼠180只,體重400±20g。大鼠購進適應(yīng)性喂養(yǎng)3天,然后隨機分為6個大組:生理鹽水對照組(Na組)、急性衰老組(N1組)、衰老前有氧運動干預(yù)組(S1組)、衰老過程中有氧運動干預(yù)組(S2組)、衰老后自然喂養(yǎng)組(N2組)和衰老后有氧運動干預(yù)組(S3組)。衰老造模完成以后,每個大組隨機再分為2個小組,一組進行7天Morris水迷宮實驗,為M組(即NaM組、N1M組、S1M組、S2M組、N2M組和S3M組),另一組自然喂養(yǎng)7天,為N組(即NaN組、N1N組、S1N組、S2N組、N2N組和S3N組),共12個小組,n=15。造模結(jié)束后,按照實驗設(shè)計進行斷頭取材。首先測定大鼠大腦皮質(zhì)SOD、GSH-Px活性和SOD的含量,再分別采用Real-time PCR檢測大鼠小腦內(nèi)GAP-43基因mRNA表達量,Western Bolting測定大鼠小腦內(nèi)GAP-43基因蛋白的表達水平。結(jié)果:(1)自由基檢測結(jié)果:Na組SOD、GSH-Px活性高于N1組且呈顯著性差異(P0.01),MDA含量低于N1組且呈顯著性差異(P0.01);S1組SOD、GSH-Px活性和MDA含量與N1組大鼠相比無顯著性差異(P0.05);S2組SOD、GSH-Px活性高于N1組且呈顯著性差異(P0.01),MDA含量低于N1組且呈顯著性差異(P0.01);S3組SOD、GSH-Px活性和MDA含量與N2組大鼠相比無顯著性差異(P0.05)。(2)Moriss水迷宮檢測結(jié)果:定位航行實驗結(jié)果顯示NaM組和S2M組的穩(wěn)定空間學(xué)習記憶在經(jīng)過前三天的訓(xùn)練之后就趨于穩(wěn)定,而N1M組、S1M組、S3M組和N2M組的穩(wěn)定空間記憶能力出現(xiàn)在第4天的訓(xùn)練之后;第一象限入水的空間探索實驗結(jié)果顯示:NaM組和N1M組、N2M組穿越原站臺數(shù)呈現(xiàn)顯著性差異(P0.01)且Na M組穿越次數(shù)多于N1M組、N2M組;S1M組和N1M組穿越原站臺數(shù)無顯著性差異(P0.05);S2M組和N1M組穿越原站臺數(shù)呈現(xiàn)顯著性差異(P0.01)且S2M組穿越次數(shù)多于N1M組;S3M組和N2M組穿越原站臺數(shù)無顯著性差異(P0.05)。(3)大鼠小腦GAP-43表達結(jié)果:S1組和N1組大鼠小腦GAP-43 mRNA和蛋白表達之間無顯著性差異(P0.05);S2組大鼠小腦中GAP-43 mRNA和蛋白表達顯著高于N1組(P0.01);S3N組大鼠小腦內(nèi)GAP-43 mRNA表達水平和N2N組大鼠存在顯著性差異(P0.01)且S3N組高于N2N組,S3N組大鼠小腦內(nèi)GAP-43蛋白表達水平和N2N組大鼠無顯著性差異(P0.05);S3M組大鼠小腦內(nèi)GAP-43 mRNA表達水平和N2M組大鼠存在顯著性差異(P0.01)且S3M組高于N2M組,而S3M組大鼠小腦內(nèi)GAP-43蛋白表達水平和N2M組大鼠無顯著性差異(P0.05)。(4)相關(guān)性分析結(jié)果:各組大鼠小腦內(nèi)GAP-43 mRNA和蛋白表達量與大鼠穿越站臺次數(shù)之間呈正相關(guān)(P0.05)。結(jié)論:(1)6周的D-半乳糖注射成功地建立了大鼠腦衰老模型。(2)衰老造模前進行有氧運動干預(yù)不能上調(diào)衰老后大鼠小腦內(nèi)GAP-43的mRNA和蛋白表達量,對改善大鼠的學(xué)習記憶能力作用不明顯。(3)衰老中進行有氧運動干預(yù)可以上調(diào)小腦內(nèi)GAP-43的mRNA和蛋白表達量,同時可以改善大鼠的學(xué)習記憶能力。(4)衰老后進行有氧運動干預(yù)對大鼠小腦內(nèi)GAP-43表達量的上調(diào)和改善學(xué)習記憶能力的作用不明顯。(5)小腦內(nèi)GAP-43基因表達量與學(xué)習記憶能力成正相關(guān),可能是有氧運動干預(yù)學(xué)習記憶能力的機制之一。
【關(guān)鍵詞】：GAP-43 有氧運動 學(xué)習記憶 衰老 小腦
【學(xué)位授予單位】：成都體育學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R87
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-11
• 第一部分 文獻綜述11-18
• 1 學(xué)習記憶的概述11-12
• 1.1 學(xué)習記憶的概念及分類11-12
• 1.2 學(xué)習記憶的神經(jīng)基礎(chǔ)12
• 2 有氧運動對衰老學(xué)習記憶的影響12-14
• 2.1 衰老的自由基學(xué)說12-13
• 2.2 運動對衰老的影響13
• 2.3 運動對學(xué)習記憶能力的影響13-14
• 3 小腦與學(xué)習記憶的關(guān)系14-15
• 4 GAP-43 的研究現(xiàn)狀15-18
• 4.1 GAP-43 概述15-16
• 4.2 GAP-43 影響學(xué)習記憶的相關(guān)機制16-17
• 4.3 GAP-43 與運動及衰老學(xué)習記憶的關(guān)系17-18
• 第二部分 實驗部分18-41
• 1 材料和方法18-28
• 1.1 主要材料18
• 1.2 主要實驗試劑18-19
• 1.3 實驗對象及分組19-20
• 1.3.1 實驗對象19
• 1.3.2 動物造模19-20
• 1.4 Morris水迷宮行為學(xué)訓(xùn)練和測試20-21
• 1.4.1 定位航行試驗20-21
• 1.4.2 空間探索實驗21
• 1.5 動物取材及樣本處理21
• 1.6 自由基指標檢測21
• 1.7 Real time PCR檢測小腦GAP-43的mRNA基因表達21-25
• 1.7.1 實驗前準備21-22
• 1.7.2 總mRNA提取22-23
• 1.7.3 測定mRNA含量及鑒定純度和完整性23
• 1.7.4 Real-time PCR檢測GAP-43基因mRNA的表達23-25
• 1.8 Western blotting檢測小腦GAP-43蛋白基因表達25-28
• 1.8.1 蛋白含量測定25-26
• 1.8.2 western-bolting實驗26-27
• 1.8.3 Western-bolting實驗常用試劑的配制27-28
• 1.9 統(tǒng)計學(xué)分析28
• 2 實驗結(jié)果28-37
• 2.1 肉眼觀察結(jié)果28
• 2.2 Morris水迷宮檢測結(jié)果28-31
• 2.3 自由基檢測結(jié)果31-34
• 2.3.1 MDA檢測結(jié)果31-32
• 2.3.2 GSH-Px檢測結(jié)果32-33
• 2.3.3 SOD檢測結(jié)果33-34
• 2.4 Real-time PCR檢測結(jié)果34-35
• 2.5 Western-bolting檢測結(jié)果35-37
• 2.6 小腦GAP-43 與空間學(xué)習記憶能力的相關(guān)性37
• 3 分析與討論37-41
• 3.1 大鼠衰老模型驗證37-38
• 3.2 不同時期有氧運動對大鼠衰老的影響38
• 3.3 不同時期有氧運動對大鼠空間學(xué)習記憶能力的影響38-40
• 3.4 不同時期有氧運動對衰老大鼠小腦GAP-43 表達的影響40-41
• 3.5 衰老大鼠小腦GAP-43 與空間學(xué)習記憶能力的相關(guān)性分析41
• 4 結(jié)論41
• 參考文獻41-45
• 致謝45

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