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外泌體—電離輻射誘導(dǎo)旁效應(yīng)的另一種機(jī)制

發(fā)布時間:2017-07-07 15:02

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【摘要】:采用條件培養(yǎng)液轉(zhuǎn)移的方法,以微核形成和克隆形成為終點,檢測X-射線在H460非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞中誘導(dǎo)經(jīng)培養(yǎng)液介導(dǎo)的旁效應(yīng);采用差速離心法從未受照射和受照H460細(xì)胞培養(yǎng)液中提取、純化外泌體,用透射電鏡觀察其形態(tài),激光粒度儀分析其粒徑分布,并用Western blot檢測其標(biāo)志蛋白hsp90β的表達(dá)。通過熒光探針共定位實驗觀察外泌體進(jìn)入接收細(xì)胞的情況,采用結(jié)晶紫實驗檢測外泌體對接收細(xì)胞增殖的影響。結(jié)果表明:X-射線可在H460細(xì)胞中誘導(dǎo)經(jīng)培養(yǎng)液介導(dǎo)的旁效應(yīng),表現(xiàn)為旁效應(yīng)細(xì)胞的微核增加和克隆存活率下降;未受照射和受照細(xì)胞均分泌外泌體,但不同條件下細(xì)胞分泌外泌體的尺寸分布不同;當(dāng)將外泌體加入到接收細(xì)胞時,外泌體可能通過膜融合的方式很快進(jìn)入接收細(xì)胞,進(jìn)而促進(jìn)接收細(xì)胞的增殖;受照射H460細(xì)胞分泌的外泌體不影響接收細(xì)胞的克隆存活率,但增加接收細(xì)胞的微核形成率,并且這種現(xiàn)象在用RNA酶處理外泌體后消失。以上結(jié)果表明,受照射H460細(xì)胞分泌的外泌體可能是介導(dǎo)電離輻射旁效應(yīng)的機(jī)制之一,并且其中RNA可能是介導(dǎo)電離輻射誘導(dǎo)旁效應(yīng)的一種重要信號分子。
【作者單位】: 蘇州大學(xué)醫(yī)學(xué)部放射醫(yī)學(xué)與防護(hù)學(xué)院放射醫(yī)學(xué)及交叉學(xué)科研究院;
【關(guān)鍵詞】電離輻射旁效應(yīng) 外泌體 微核 細(xì)胞增殖 人非小細(xì)胞肺癌
【基金】:國家自然科學(xué)基金(31270898,11335011) 江蘇省教育廳省屬高校自然科學(xué)研究重大項目(12KJA310005) 江蘇高校優(yōu)勢學(xué)科建設(shè)工程資助項目(PAPD)資助
【分類號】:R734.2
【正文快照】: 電離輻射誘導(dǎo)旁效應(yīng)指受照射細(xì)胞周圍沒有受到照射的細(xì)胞表現(xiàn)出來的生物學(xué)效應(yīng)。已有大量研究證明了旁效應(yīng)的存在[1-4],但介導(dǎo)旁效應(yīng)的分子機(jī)制卻仍然不清楚。至今,已提出4種介導(dǎo)旁效應(yīng)的分子機(jī)制,包括細(xì)胞間縫隙連接、信號細(xì)胞膜上配體與旁效應(yīng)細(xì)胞膜上受體之間的相互作用、,

本文編號:530642

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