本文關(guān)鍵詞：MMP3慢病毒表達(dá)載體構(gòu)建及其修飾的胚胎干細(xì)胞的作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：[目的]構(gòu)建基質(zhì)金屬蛋白酶3(Matrix metalloproteinase3,MMP3)基因過表達(dá)慢病毒載體,修飾胚胎干細(xì)胞(ES)檢測其對成纖維細(xì)胞的作用。[方法]克隆MMP3基因,構(gòu)建EGFP標(biāo)記的MMP3慢病毒表達(dá)載體,用GP2-293T細(xì)胞包裝慢病毒,修飾ES細(xì)胞,與成纖維細(xì)胞3T3共培養(yǎng)。鏡下觀察綠色熒光蛋白表達(dá),Western Blot檢測MMP3和TGF-β蛋白表達(dá)。[結(jié)果]成功釣取MMP3基因,并構(gòu)建慢病毒表達(dá)載體LV-MMP3-EGFP;在轉(zhuǎn)染的GP2-293T細(xì)胞中表達(dá)綠色熒光蛋白;修飾后的ES細(xì)胞表達(dá)綠色熒光蛋白,72 h蛋白表達(dá)量最高,轉(zhuǎn)染效率達(dá)到80%以上;被修飾細(xì)胞中MMP3蛋白表達(dá)高于對照組,其表達(dá)量是對照組的1.5倍;共培養(yǎng)后3T3細(xì)胞中TGF-β蛋白表達(dá)實(shí)驗(yàn)組與對照組無顯著變化。[結(jié)論]LV-MMP3-EGFP修飾的ES細(xì)胞能夠大量表達(dá)MMP3蛋白,作用于細(xì)胞外基質(zhì),但是對成纖維細(xì)胞中TGF-β表達(dá)沒有顯著影響(P0.05)。
【作者單位】： 長春工業(yè)大學(xué)化學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院;吉林大學(xué)白求恩第一醫(yī)院放療科;
【關(guān)鍵詞】： MMP ES 慢病毒載體 纖維化
【基金】：吉林省科技廳項(xiàng)目(“低氧預(yù)處理脂肪干細(xì)胞介導(dǎo)HGF/c-Met/PI3K/Akt及PGE2/cAMP/PKA信號通路修復(fù)放射性肺損傷的機(jī)制研究”,No.20150101141JC)
【分類號】：R818
【正文快照】： 放射性腸纖維化在慢性炎癥發(fā)生、損傷活動(dòng)過度以及發(fā)生了傷口愈合不可逆轉(zhuǎn)等情況下而產(chǎn)生,腸道遭受損傷,其黏膜發(fā)生組織修復(fù)及結(jié)構(gòu)重塑,進(jìn)而引發(fā)腸纖維化病癥[1]。大量慢性炎性細(xì)胞發(fā)生聚集,炎性細(xì)胞的不斷浸潤了將會(huì)引起ECM的沉積,細(xì)胞增殖顯著發(fā)生,進(jìn)而形成腸纖維化,ECM的積

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1 李玲;張春麗;閆平;殷雷;康磊;趙倩;王榮福;;放射敏感性啟動(dòng)子調(diào)控CD基因/5-FC自殺系統(tǒng)慢病毒載體的構(gòu)建及~(125)I誘導(dǎo)表達(dá)的研究[J];同位素;2012年03期

  本文關(guān)鍵詞：MMP3慢病毒表達(dá)載體構(gòu)建及其修飾的胚胎干細(xì)胞的作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號：499596