本文關(guān)鍵詞：ANTP-SmacN7融合肽對(duì)H460細(xì)胞輻射增敏作用的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的腫瘤的輻射耐受制約了放療療效,第二個(gè)線粒體衍生的半胱氨酸蛋白酶激活劑(Second mitochondria-derived activator of caspase, Smac)蛋白類似物可明顯提高輻射誘導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞凋亡,有望成為新型腫瘤輻射增敏藥物。本研究旨在探討新型Smac蛋白類似物ANTP-SmacN7融合肽對(duì)肺癌細(xì)胞系H460的輻射增敏作用。方法(1)取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期肺癌H460細(xì)胞,分為空白對(duì)照組,單純照射組,ANTP-SmacN7組和照射聯(lián)合ANTP-SmacN7組,單純照射組給予0、2、4、6 Gy照射,照射聯(lián)合ANTP-SmacN7組中ANTP-SmacN7的濃度為20 μmol/L。2) WST-1測(cè)定H460細(xì)胞的增殖。(3)流式細(xì)胞儀測(cè)定細(xì)胞處理后24和48h的細(xì)胞凋亡率。(4) Western blot實(shí)驗(yàn)檢測(cè)caspase3和cleaved caspase3的表達(dá)水平。結(jié)果(1)ANTP-SmacN7融合能夠順利進(jìn)入細(xì)胞,且能夠增強(qiáng)H460細(xì)胞的輻射敏感性(F=25.1,P0.01,增敏比為1.86)(2)照射聯(lián)合ANTP-SmacN7可明顯降低H460細(xì)胞的克隆形成率()c2=45.2,P0.01；χ2=40.3,P0.01),提高cleaved caspase3的表達(dá)量,促進(jìn)caspase3的活化,增加輻射誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡率。結(jié)論ANTP-SmacN7融合肽可明顯提高H460細(xì)胞的輻射敏感性,促凋亡作用這一特性與抑制XIAP的mRNA轉(zhuǎn)錄和促進(jìn)cIAP-1的降解以及caspase的激活有關(guān),ANTP-SmacN7作為一種新的Smac蛋白類似物有望用于腫瘤的輻射增敏治療。
【關(guān)鍵詞】：ANTP-SmacN7 放射增敏 凋亡 DNA雙鏈斷裂 凋亡抑制蛋白 caspase
【學(xué)位授予單位】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R730.55
【目錄】：

• 中文摘要5-6
• Abstract6-7
• 前言7-12
• 第一章 ANTP-SmacN7融合肽對(duì)H460細(xì)胞放射增敏作用12-35
• 1.1 實(shí)驗(yàn)材料12-16
• 1.1.1 細(xì)胞株12
• 1.1.2 主要試劑12-13
• 1.1.3 主要試劑緩沖液的配置13-15
• 1.1.4 細(xì)胞培養(yǎng)耗材15
• 1.1.5 主要儀器設(shè)備15-16
• 1.2 實(shí)驗(yàn)方法16-22
• 1.2.1 多肽合成及純化16
• 1.2.2 操作前準(zhǔn)備16
• 1.2.3 細(xì)胞培養(yǎng)16-19
• 1.2.4 ANTP-SmacN7融合肽進(jìn)入細(xì)胞的能力的檢測(cè)19-20
• 1.2.5 MTT法檢測(cè)ANTP-SmacN7對(duì)肺癌H460細(xì)胞的細(xì)胞毒性及作用特點(diǎn)20-21
• 1.2.6 細(xì)胞克隆形成實(shí)驗(yàn)測(cè)ANTP-SmacN7對(duì)腫瘤細(xì)胞的輻射增敏性21-22
• 1.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果22-28
• 1.3.1 ANTP-SmacN7融合蛋白的合成及純化22-24
• 1.3.2 ANTP-SmacN7融合肽進(jìn)入細(xì)胞的能力實(shí)驗(yàn)結(jié)果24-25
• 1.3.3 ANTP-SmacN7對(duì)肺癌H460細(xì)胞的細(xì)胞毒性及作用特點(diǎn)25-26
• 1.3.4 ANTP-SmacN7對(duì)腫瘤細(xì)胞的輻射增敏作用26-28
• 1.4 討論28-32
• 參考文獻(xiàn)32-35
• 第二章 ANTP-SmacN7對(duì)H460細(xì)胞放射增敏的作用機(jī)制35-47
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料35-39
• 2.1.1 細(xì)胞株35
• 2.1.2 主要試劑35-36
• 2.1.3 主要試劑緩沖液的配置36-38
• 2.1.4 細(xì)胞培養(yǎng)耗材38
• 2.1.5 主要儀器設(shè)備38-39
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法39-41
• 2.2.1 細(xì)胞的培養(yǎng)39-40
• 2.2.2 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡40-41
• 2.2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法41
• 2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果41-43
• 2.4 討論43-45
• 參考文獻(xiàn)45-47
• 結(jié)論與展望47-48
• 綜述一48-57
• 參考文獻(xiàn)52-57
• 綜述二57-67
• 參考文獻(xiàn)60-67
• 縮略詞表67-69
• 在讀期間第一作者發(fā)表的論文69-70
• 致謝70-71

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3 嚴(yán)銀芳,陳曉,楊小清,閆遠(yuǎn)芳;流行性腮腺炎病毒減毒株S_(79)在幾株腫瘤細(xì)胞和正常細(xì)胞中增殖的比較研究[J];腫瘤;2003年06期

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6 張運(yùn)濤,劉凡,姜茹,谷仲平,汪涌,張順,劉榮福,李玉梅;外源性p27與GRC-1細(xì)胞端粒酶活性及細(xì)胞凋亡關(guān)系的實(shí)驗(yàn)研究[J];中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志;2002年09期

7 石和元;王平;胡永年;邱幸凡;田代志;;溫膽湯改良方對(duì)Aβ_(25-35)誘導(dǎo)AD細(xì)胞模型bcl-2、bax蛋白表達(dá)的影響[J];世界科學(xué)技術(shù);2005年06期

8 孟威宏;王強(qiáng);王虹蛟;顏煒群;;牛胰蛋白酶抑制劑研究進(jìn)展[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(老年醫(yī)學(xué)分冊(cè));2008年04期

9 鐘民濤;王曉麗;李星云;劉磊;劉穎麗;張偉;黃敏;;香菇C91-3菌絲發(fā)酵蛋白對(duì)H22腫瘤細(xì)胞體內(nèi)外抗腫瘤機(jī)制的初探[J];中國(guó)微生態(tài)學(xué)雜志;2011年09期

10 張晨,黃世林,馬東初,孫英慧,馬小鋒;硫化砷誘導(dǎo)NB_4細(xì)胞調(diào)亡[J];白血病;2000年06期

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1 鄒萍;;血液系統(tǒng)惡性腫瘤細(xì)胞來源膜微粒的特征及生物學(xué)作用研究[A];第13屆全國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要[C];2011年

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3 陳衛(wèi)銀;祝彼得;劉福友;馮雪梅;;參芎滴丸對(duì)急性腦梗死模型大鼠神經(jīng)細(xì)胞調(diào)亡的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十三次全國(guó)神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2010年

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5 綦淑芬;萬瑞香;姚如勇;;扇貝多肽對(duì)Hela細(xì)胞在紫外線損傷下的保護(hù)作用[A];第五屆全國(guó)自由基生物學(xué)與自由基醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)討論會(huì)論文摘要匯編[C];2000年

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1 張?zhí)锟?細(xì)胞調(diào)亡的意義[N];中國(guó)人口報(bào);2002年

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1 羅曉明;載藥聚合物超細(xì)纖維作為腫瘤局部制劑的研究[D];西南交通大學(xué);2014年

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7 陳鳳華;Tat-SmacN7融合肽對(duì)腫瘤細(xì)胞輻射增敏作用的研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2013年

8 虞志新;Th17/Treg失衡及其與中性粒細(xì)胞相互影響在ARDS發(fā)病中的作用和機(jī)制研究[D];江蘇大學(xué);2015年

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本文編號(hào)：433380