目的：通過對中小強(qiáng)度有氧運(yùn)動后大鼠心房肌蛋白質(zhì)組表達(dá)特征的研究,篩選出對運(yùn)動產(chǎn)生反應(yīng)的應(yīng)激蛋白質(zhì),并進(jìn)一步探討應(yīng)激蛋白質(zhì)的基因表達(dá)水平,為運(yùn)動心臟蛋白質(zhì)組學(xué)的后繼研究提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。 方法：20只SD雄性大鼠隨機(jī)分為運(yùn)動組和對照組(n=10),運(yùn)動組大鼠采用跑臺訓(xùn)練建立中小強(qiáng)度(60～70%最大攝氧量)有氧運(yùn)動動物運(yùn)動模型。8周后,提取心房肌組織全蛋白進(jìn)行雙向凝膠電泳(2-DE),使用ImageMaster 2D Platinum圖像分析軟件對2-DE圖譜進(jìn)行分析,篩選出差異表達(dá)的蛋白質(zhì)點(diǎn),并應(yīng)用基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時間質(zhì)譜(MALDI-TOF-MS)獲得其中表達(dá)量變化≥5倍的蛋白質(zhì)點(diǎn)的肽質(zhì)量指紋譜,通過搜索數(shù)據(jù)庫進(jìn)行蛋白質(zhì)鑒定,并采用實(shí)時定量逆轉(zhuǎn)錄--聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)技術(shù)檢測6個目標(biāo)蛋白質(zhì)的mRNA表達(dá)水平。 結(jié)果：①8周中小強(qiáng)度有氧運(yùn)動后,大鼠的心臟重量增加了1.7%,心重指數(shù)增加了32%；②經(jīng)圖像分析,運(yùn)動組和對照組心房肌電泳圖譜中平均檢測到蛋白質(zhì)點(diǎn)(380±62)個和(411±59)個,獲得差異大于2倍的蛋白質(zhì)點(diǎn)68個。其中,獲得具有5倍以上差異表達(dá)量...

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
前言
1 材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)對象與分組
    1.2 實(shí)驗(yàn)動物運(yùn)動模型的建立
    1.3 儀器設(shè)備和試劑
    1.4 樣品制備
    1.5 固相PH梯度-SDS雙向凝膠電泳和凝膠圖像掃描及分析
    1.6 質(zhì)譜分析
    1.7 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)
    1.8 質(zhì)量控制
    1.9 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計學(xué)分析
2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    2.1 心臟重量及心重指數(shù)
    2.2 2-DE圖譜及蛋白差異表達(dá)情況
    2.3 差異蛋白質(zhì)點(diǎn)的質(zhì)譜鑒定結(jié)果
    2.4 目標(biāo)蛋白質(zhì)的mRNA表達(dá)水平
3 分析與討論
    3.1 心臟重量的改變
    3.2 雙向凝膠電泳圖譜分析
    3.3 有氧運(yùn)動后目標(biāo)蛋白表達(dá)情況
    3.4 目標(biāo)蛋白基因表達(dá)情況分析
4 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
縮略詞表(中英文對照)
附專題綜述
    參考文獻(xiàn)
科研情況
致謝



本文編號：4007819