阿曼托雙黃酮的輻射防護(hù)作用機(jī)制研究
發(fā)布時(shí)間:2017-05-19 13:13
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【摘要】:目的 研究阿曼托雙黃酮(AMF)的輻射防護(hù)作用機(jī)制方法 1.對(duì)C57BL/6小鼠采取預(yù)防給藥,照射前腹腔注射AMF,用60Coγ射線進(jìn)行一次性全身照射。C57BL/6小鼠經(jīng)7.5 Gy劑量照射后,觀察C57BL/6小鼠的存活率,觀察時(shí)間為30 d;用Tunel和DAPI染色檢測(cè)AMF對(duì)照射后C57BL/6小鼠骨髓細(xì)胞凋亡的影響;用PI染色和細(xì)胞流式檢測(cè)AMF對(duì)照射后C57BL/6小鼠骨髓細(xì)胞周期的影響;Western Blot法檢測(cè)AMF對(duì)照射后C57BL/6小鼠骨髓細(xì)胞中Tnfaip2蛋白表達(dá)的影響;C57BL/6小鼠經(jīng)3 Gy劑量照射后,采用細(xì)胞集落培養(yǎng)檢測(cè)AMF對(duì)照射后骨髓細(xì)胞增殖能力的影響;用CD34、CD117流式抗體雙標(biāo)和細(xì)胞流式檢測(cè)AMF對(duì)照射后小鼠造血干細(xì)胞數(shù)目的影響。2.培養(yǎng)C57BL/6小鼠骨髓原代細(xì)胞,或者用MACS法分選,培養(yǎng)C57BL/6小鼠骨髓CD117+細(xì)胞,照射前12 h采取預(yù)防給藥,然后接受12 Gy60Coγ射線一次性照射;在照后6 h、12 h,分別用Hoechst染色法檢測(cè)AMF對(duì)照射后骨髓原代細(xì)胞凋亡的影響;用Tunel和DAPI染色檢測(cè)AMF對(duì)照射后CD117+細(xì)胞凋亡的影響;用PI染色和細(xì)胞流式檢測(cè)對(duì)AMF對(duì)照射后兩種細(xì)胞周期的影響;用Elisa法檢測(cè)對(duì)AMF對(duì)照射后兩種細(xì)胞培養(yǎng)上清中TNF-α濃度的影響;RT-PCR檢測(cè)對(duì)Tnfaip2表達(dá)的影響。結(jié)果 1.AMF可以提高7.5 Gy致死劑量照射后C57BL/6小鼠30%的存活率,且延長(zhǎng)了小鼠的存活時(shí)間;AMF可以降低輻射后細(xì)胞的凋亡,對(duì)輻射后細(xì)胞的增值能力的恢復(fù)也有所幫助,但對(duì)造血干細(xì)胞的數(shù)目未表現(xiàn)出顯著的保護(hù)作用;2.AMF能夠緩解輻射后C57BL/6小鼠骨髓原代細(xì)胞和C57BL/6小鼠骨髓CD117+細(xì)胞的凋亡;降低兩種細(xì)胞培養(yǎng)基中TNF-α的表達(dá)。結(jié)論 AMF具有一定的抗輻射作用,它可能是通過(guò)抑制輻射后TNF-α的表達(dá)、調(diào)節(jié)輻射引起的細(xì)胞周期紊亂來(lái)降低細(xì)胞凋亡而發(fā)揮輻射防護(hù)作用。
【關(guān)鍵詞】:阿曼托雙黃酮(AMF) 輻射防護(hù) C57BL/6小鼠 骨髓
【學(xué)位授予單位】:青海大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類(lèi)號(hào)】:R818
【目錄】:
- 摘要4-5
- Abstract5-7
- 英文縮略符號(hào)對(duì)照表7-9
- 前言9-11
- 第一部分 AMF對(duì)輻射后C57BL/6 小鼠的作用研究11-25
- 1 材料11-12
- 2 方法12-17
- 3 結(jié)果17-23
- 4 討論23-25
- 第二部分 AMF對(duì)輻射后C57BL/6 小鼠骨髓原代細(xì)胞的作用研究25-35
- 1 材料25-26
- 2 方法26-28
- 3 結(jié)果28-34
- 4 討論34-35
- 第三部分 AMF對(duì)輻射后C57BL/6 小鼠骨髓CD117+細(xì)胞的作用研究35-43
- 1 材料35-36
- 2 方法36-38
- 3 結(jié)果38-41
- 4 討論41-42
- 5 總結(jié)42-43
- 參考文獻(xiàn)43-48
- 致謝48-49
- 附錄-綜述49-60
- 【參考文獻(xiàn)】56-60
- 個(gè)人簡(jiǎn)歷6
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7 任秋霞;周U,
本文編號(hào):378783
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