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不同條件下核酸樣本制備的質(zhì)量控制和參數(shù)建立

發(fā)布時間:2023-02-18 13:51
  現(xiàn)代某些遺傳學(xué)研究領(lǐng)域,如法醫(yī)學(xué)分析,出生前或植入前診斷(preimplantation genetic diagnosis,PGD),或致瘤因子檢測中,DNA分析通常只是針對小量細胞甚至單個細胞。有限的基因組DNA(genomic DNA,gDNA)即通常所說的低拷貝數(shù)(low copy number,LCN)DNA常常限制這些檢測的敏感性。另一方面,臨床實踐和法醫(yī)學(xué)實踐中由于種種外界條件的限制,長期以來在生物樣本中,獲得理想的高質(zhì)量的DNA一直是個難題。DNA常受光、熱、濕度、溫度、微生物等多種因素的影響而發(fā)生降解。因此,DNA的質(zhì)和量是影響DNA分析的兩個重要因素。 福爾馬林固定、石蠟包埋組織(formalin fixed and parafiin embedded,F(xiàn)FPE)是現(xiàn)在運用最廣的用于回顧性研究的材料。一般認為,從福爾馬林固定的組織樣本中分離出的DNA常成高度降解狀態(tài),平均片段大小在60-200bp之間。DNA的降解可發(fā)生于組織準備、福爾馬林固定和石蠟包埋的不同階段,這對于DNA檢測的敏感性會產(chǎn)生不利影響。通常大于300bp的擴增片段較難在石蠟包埋組織進行基因表達研究...

【文章頁數(shù)】:79 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
縮略語
中文摘要
英文摘要
正文
    前言
    儀器和試劑材料
    第一部分 建立微量DNA檢測細胞系標準
    第二部分 對腫瘤細胞系DNA的檢測及應(yīng)用
    第三部分 福爾馬林固定石蠟包埋組織中DNA的質(zhì)量分析
    討論
    結(jié)論
    參考文獻
綜述1
綜述2
致謝



本文編號:3745090

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