目的建立一種快捷有效的肋軟骨組織采集和保存方法。方法用FTA卡采集尸體肋軟骨勻漿,使肋軟骨組織吸附在FTA卡上,采用直擴(kuò)法檢驗(yàn)STR分型。肋軟骨FTA卡采用真空物證袋密封,常溫下保存兩年,采用直擴(kuò)法檢驗(yàn)STR分型。結(jié)果肋軟骨FTA卡采用直擴(kuò)法檢驗(yàn)可得到完整的STR分型圖譜,158份檢材檢出率為93.0%。有效檢出分型的肋軟骨組織在FTA卡上常溫保存兩年,STR分型檢出率為100%。結(jié)論本方法既可通過(guò)直擴(kuò)來(lái)替代傳統(tǒng)肋軟骨組織提取DNA的繁瑣步驟,又可解決肋軟骨在常溫下難以保存的難題。 

【文章來(lái)源】：刑事技術(shù). 2020,45(05)

【文章頁(yè)數(shù)】：4 頁(yè)

【部分圖文】：

肋軟骨FTA卡直接擴(kuò)增得到的STR分型

對(duì)照組肋軟骨的STR分型

圖2 對(duì)照組肋軟骨的STR分型DNA檢驗(yàn)人員在收到肋軟骨FTA卡后，打孔直接擴(kuò)增即可，省去了繁瑣的消化過(guò)程，大大節(jié)省了提取時(shí)間。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，可通過(guò)打孔器孔徑的大小和打孔紙片的數(shù)目來(lái)控制擴(kuò)增的DNA模板量。同時(shí)，采用FTA卡保存肋軟骨組織不影響DNA二次純化，對(duì)于雜質(zhì)多的檢材，可通過(guò)水洗法快速純化，亦可采用其他方法如硅珠法對(duì)肋軟骨DNA進(jìn)行二次純化和提取，以獲得更高質(zhì)量的模板DNA。FTA卡上的肋軟骨組織常溫保存兩年檢出率能達(dá)到100%，未見(jiàn)等位基因丟失現(xiàn)象，證實(shí)了FTA卡保存肋軟骨DNA的有效性，已滿足日常物證送檢與保存的需求。當(dāng)然，由于DNA在保存過(guò)程中會(huì)存在降解，上述結(jié)果呈現(xiàn)剛制成的肋軟骨FTA卡直接擴(kuò)增圖譜在PCR產(chǎn)物峰高波動(dòng)范圍、同一基因座上雜合間峰值比、同一熒光染料不同基因座間的均衡性等好于兩年后的肋軟骨FTA卡直擴(kuò)結(jié)果的現(xiàn)象。本研究中的158份肋軟骨組織通過(guò)常規(guī)方法（Chelex-100法）提取，均得到了完整的STR分型，將其全部轉(zhuǎn)移到FTA卡上，直接擴(kuò)增，有147份肋軟骨FTA卡得到了完整的STR分型，有11份FTA卡未檢出有效的STR分型。這11份屬于高度腐敗尸體肋軟骨，采用常規(guī)的Chelex-100法提取需要加大檢材的量，否則也不能檢出有效STR分型。高度腐敗尸體肋軟骨組織DNA含量低，采用本方法不適用于直擴(kuò)。

【參考文獻(xiàn)】：
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