發(fā)布時(shí)間：2021-10-05 01:49

　　目的探討沉默Krüppel樣因子5（KLF5）對電離輻射后體外培養(yǎng)的大鼠小腸上皮IEC-6細(xì)胞生物學(xué)功能的影響。方法給予大鼠小腸上皮IEC-6細(xì)胞12 Gy照射,分別在照后0、0.5、1、2、3、5、7、24 h,檢測KLF5的表達(dá)。給予IEC-6細(xì)胞0、2、4、8、12和16 Gy X射線照射,照后3 h收集細(xì)胞蛋白,采用Western blot法檢測IEC-6細(xì)胞中KLF5的表達(dá)。設(shè)計(jì)并合成特異性針對大鼠KLF5基因的shRNA靶序列,構(gòu)建到慢病毒載體中,通過感染人胚腎293T細(xì)胞,對慢病毒進(jìn)行包裝和滴度測定。使用包裝好的慢病毒感染IEC-6細(xì)胞,熒光顯微鏡下觀察轉(zhuǎn)染效率,轉(zhuǎn)染72 h后分別采用實(shí)時(shí)-PCR和Western blot方法檢測感染后細(xì)胞中KLF5 mRNA及蛋白的表達(dá)。后續(xù)實(shí)驗(yàn)分為陰性對照組、shKLF5組、單純照射組、照射+ shKLF5組4組。采用CCK-8法觀察8 Gy照射后KLF5沉默細(xì)胞的增殖活性,流式細(xì)胞術(shù)檢測8 Gy照射后KLF5沉默細(xì)胞的周期分布和凋亡,免疫熒光染色觀察2 Gy照射后KLF5沉默細(xì)胞中γ-H2AX焦點(diǎn)數(shù)量。結(jié)果不同劑量射線照射后KLF5... 

【文章來源】：中華放射醫(yī)學(xué)與防護(hù)雜志. 2020,40(07)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：7 頁

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3418757