構(gòu)建精液特異的DNA甲基化-SNP分型體系并試測(cè)精液來(lái)源
發(fā)布時(shí)間:2021-08-22 02:24
目的初步構(gòu)建DNA甲基化聯(lián)合SNP分型體系,探索其用于精液來(lái)源鑒定的價(jià)值。方法首先通過(guò)分析甲基化芯片數(shù)據(jù)篩選出精液特異性的甲基化位點(diǎn),通過(guò)軟件設(shè)計(jì)出各位點(diǎn)特異性引物,再利用SNaPshot技術(shù)對(duì)各位點(diǎn)相鄰的SNP進(jìn)行檢測(cè),嘗試鑒定精液來(lái)源。結(jié)果本實(shí)驗(yàn)成功構(gòu)建了以精液作為鑒定對(duì)象的四位點(diǎn)甲基化-SNP分型復(fù)合檢測(cè)體系,其對(duì)62份隨機(jī)取樣的中國(guó)漢族體液樣本的鑒定結(jié)果表明其特異性良好,可準(zhǔn)確區(qū)分出44份精液或精斑樣本與其他三類共18份體液樣本。且其靈敏度佳,在轉(zhuǎn)化DNA量為0.5ng時(shí)仍可獲得完整分型。在混合斑實(shí)驗(yàn)中,當(dāng)精液與陰道分泌液體積比例為1∶40時(shí),該復(fù)合體系仍能獲得精液完整的分型圖譜。結(jié)論該四位點(diǎn)復(fù)合分型體系在精液鑒定中具有重要價(jià)值,證明了DNA甲基化聯(lián)合SNP分型體系用于體液鑒定的可行性。
【文章來(lái)源】:刑事技術(shù). 2020,45(05)
【文章頁(yè)數(shù)】:6 頁(yè)
【部分圖文】:
基于DNA甲基化的精液SNP分型技術(shù)的主要原理
為了探索復(fù)合體系檢測(cè)混合斑的效能,對(duì)不同體積比的精液和陰道分泌液(精液∶陰道分泌液分別為1∶5、1∶10、1∶15、1∶20、1∶30、1∶40及1∶50)所制作的混合斑進(jìn)行檢測(cè)。如圖4,在混合斑比例為1∶50時(shí),位點(diǎn)cg06552563和cg25706012仍具有明顯峰形,峰高在800 RFU左右。但位點(diǎn)cg06045337和cg04180929峰圖已不明顯,均低于100 RFU。圖3 復(fù)合體系在加入不同量精液DNA時(shí)的分型結(jié)果(A、B、C、D分別為5、2.5、1、0.5ng)
復(fù)合體系在加入不同量精液DNA時(shí)的分型結(jié)果(A、B、C、D分別為5、2.5、1、0.5ng)
本文編號(hào):3356809
【文章來(lái)源】:刑事技術(shù). 2020,45(05)
【文章頁(yè)數(shù)】:6 頁(yè)
【部分圖文】:
基于DNA甲基化的精液SNP分型技術(shù)的主要原理
為了探索復(fù)合體系檢測(cè)混合斑的效能,對(duì)不同體積比的精液和陰道分泌液(精液∶陰道分泌液分別為1∶5、1∶10、1∶15、1∶20、1∶30、1∶40及1∶50)所制作的混合斑進(jìn)行檢測(cè)。如圖4,在混合斑比例為1∶50時(shí),位點(diǎn)cg06552563和cg25706012仍具有明顯峰形,峰高在800 RFU左右。但位點(diǎn)cg06045337和cg04180929峰圖已不明顯,均低于100 RFU。圖3 復(fù)合體系在加入不同量精液DNA時(shí)的分型結(jié)果(A、B、C、D分別為5、2.5、1、0.5ng)
復(fù)合體系在加入不同量精液DNA時(shí)的分型結(jié)果(A、B、C、D分別為5、2.5、1、0.5ng)
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