從木質(zhì)纖維素載體中釋放提取生物樣本DNA的研究
發(fā)布時間:2021-06-16 18:59
隨著現(xiàn)代科技的不斷進步,DNA技術(shù)越來越受到重視。作為能夠識別鎖定嫌疑人的有力工具,DNA檢驗技術(shù)在刑事案件檢驗中得到廣泛應(yīng)用在重大疑難案件中發(fā)揮了重要作用。陳舊生物樣本檢驗是目前DNA檢驗技術(shù)中需解決的難題,在實際工作中我們發(fā)現(xiàn),陳舊生物樣本物證經(jīng)常出現(xiàn)檢驗位點檢出不全,甚至無法得到有效分型的現(xiàn)象。致使一些重大疑難命案積案使破受到影響陳舊生物樣本物證因為生物樣本浸潤到木質(zhì)纖維素載體里時問較長,不可避免地受外在條件環(huán)境中的光、空氣、水分等的影響[1],現(xiàn)有的生物樣本處理和DNA提取方法都對于鑲嵌在緊密載體內(nèi)部的生物樣本和木質(zhì)纖維素載體交聯(lián)的生物樣本處理不足,生物樣本無法充分釋放,對于保存時間長、蛋白變性程度嚴重,以及與載體交聯(lián)嚴重的生物樣本的DNA提取都不理想,有時甚至無法獲得有效DNA,因而浪費了寶貴的生物樣本和現(xiàn)場檢材,影響了案件偵破和關(guān)鍵證據(jù)的取得。為了從陳年的含有生物樣本的木質(zhì)纖維素類物證檢材中提取出DNA生物樣本證據(jù)并進行檢驗,本研究利用高溫老化的方法對物證進行老化模擬實驗,由于在法醫(yī)學(xué)中,木質(zhì)纖維素物證檢材主要分為紙類和棉布類,所以本研究分別針對兩類進...
【文章來源】:吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:63 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
木質(zhì)纖維素的結(jié)構(gòu)示意圖
即纖維素酶蛋白含量為 1.87 mg/ml,1 ml 標準體系解棉布釋放還原糖的量最大為 1.63 mg/ml,為最佳纖維素酶復(fù)配表 2.6 針對紙類木質(zhì)纖維素的纖維素酶用量研究結(jié)果表號 1 2 3 4 5 6 7 8 蛋白含量g)0.37 0.75 1.12 1.50 1.87 2.24 2.62 2.99 釋放量/ml)0.03 0.27 0.50 0.87 1.63 1.18 0.86 0.68 酶最佳反應(yīng)時間研究S 法測還原糖含量所得 OD540,即為對應(yīng)纖維素酶用量降解采集應(yīng)時間水解采集卡的還原糖釋放量如圖 2.1 所示,由此可得反應(yīng)素酶釋放還原糖的量在 30 min 時最大為 1.672 mg/ml,在之后的平緩甚至緩慢下降,即選用 30 min 作為復(fù)配酶反應(yīng)的時間。
圖 2.2 束斑直徑為 50 μm 時的烘干 20 小時的血液采集卡組的電鏡照片如圖圖 2.3 所示,束斑直徑為 50 μm 時的烘干 7 天的血液采集卡組的電鏡照片,圖 2中左側(cè) c 圖為對照組未經(jīng)復(fù)配酶處理的烘干 7 天的血液采集卡的電鏡照片,右側(cè) d 圖為實驗組經(jīng)復(fù)配酶處理的烘干 7 天的血液采集卡的電鏡照片。在圖 c 中,首先因為血液采集卡的纖維經(jīng)過了 7 天的老化實驗處理,采集卡的纖維與圖 2.2 中 a 小圖有明顯的差別,雖然未經(jīng)復(fù)配酶處理表面就已不太平滑,但整體仍為圓柱狀,有較為淺淺的小溝壑;在圖 d 中纖維表面極其不平整,非常不平滑,出現(xiàn)了極其明顯的溝壑,甚至中間有很長很深的溝壑表明復(fù)配酶對血液采集卡的纖維更為明顯的降解作用。
【參考文獻】:
期刊論文
[1]磁珠DNA自動提取系統(tǒng)在法醫(yī)檢驗中的應(yīng)用研究[J]. 劉桂濤,徐興馳. 法制博覽. 2019(04)
[2]不同保存時間對于血液DNA提取質(zhì)量的影響[J]. 孫婷,納莉,丁璐,周瑜,盧震輝,杜勇. 中國繼續(xù)醫(yī)學(xué)教育. 2019(03)
[3]卵泡液中游離線粒體DNA提取和定量方法的研究[J]. 劉宇,趙雪,鄒敏,邵淑敏,李嬌,張衷源,汪文諍,張玲. 生殖醫(yī)學(xué)雜志. 2018(11)
[4]國產(chǎn)和進口磁珠提取試劑盒提取微量DNA的對比分析[J]. 李麗芬,林超奇,李小丹. 海峽科學(xué). 2018(11)
[5]5種試劑盒對血漿游離DNA提取效果的比較[J]. 李雪蓮,齊謝敏,鄒秉杰,黃青,宋沁馨,周國華. 中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué). 2018(08)
[6]一種磁珠提取結(jié)合實時熒光定量核酸擴增定量檢測重組人血白蛋白中畢赤酵母DNA殘留方法的建立[J]. 王敏力,馬秋平,侯繼鋒. 中國藥學(xué)雜志. 2018(10)
[7]全自動核酸提取儀與手動提取組織DNA的效率比較[J]. 林丹義,張科平,許潔,顏黎栩,駱新蘭,劉艷輝. 臨床與實驗病理學(xué)雜志. 2017(12)
[8]“動物組織中DNA的分離提取及含量測定”實驗教學(xué)改革[J]. 趙玉紅,李欣,李小菊,周浩,李登文,石建黨,張金紅,趙立青. 實驗技術(shù)與管理. 2017(11)
[9]應(yīng)用M48磁珠試劑盒提取牙齒DNA[J]. 程沖,陳啟鳴. 海峽科學(xué). 2017(11)
[10]利用顯微搜索衣物上血跡進行DNA檢驗1例[J]. 張瑾,張穎,劉開會,溫帥媛,白艷平,陶克明. 中國法醫(yī)學(xué)雜志. 2015(05)
博士論文
[1]不同預(yù)處理工藝對稻殼纖維素酶酶解效果的影響[D]. 余君.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
碩士論文
[1]天然纖維素超微結(jié)構(gòu)層次及不同內(nèi)切纖維素酶降解特異性的研究[D]. 陳玉.山東大學(xué) 2017
本文編號:3233611
【文章來源】:吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:63 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
木質(zhì)纖維素的結(jié)構(gòu)示意圖
即纖維素酶蛋白含量為 1.87 mg/ml,1 ml 標準體系解棉布釋放還原糖的量最大為 1.63 mg/ml,為最佳纖維素酶復(fù)配表 2.6 針對紙類木質(zhì)纖維素的纖維素酶用量研究結(jié)果表號 1 2 3 4 5 6 7 8 蛋白含量g)0.37 0.75 1.12 1.50 1.87 2.24 2.62 2.99 釋放量/ml)0.03 0.27 0.50 0.87 1.63 1.18 0.86 0.68 酶最佳反應(yīng)時間研究S 法測還原糖含量所得 OD540,即為對應(yīng)纖維素酶用量降解采集應(yīng)時間水解采集卡的還原糖釋放量如圖 2.1 所示,由此可得反應(yīng)素酶釋放還原糖的量在 30 min 時最大為 1.672 mg/ml,在之后的平緩甚至緩慢下降,即選用 30 min 作為復(fù)配酶反應(yīng)的時間。
圖 2.2 束斑直徑為 50 μm 時的烘干 20 小時的血液采集卡組的電鏡照片如圖圖 2.3 所示,束斑直徑為 50 μm 時的烘干 7 天的血液采集卡組的電鏡照片,圖 2中左側(cè) c 圖為對照組未經(jīng)復(fù)配酶處理的烘干 7 天的血液采集卡的電鏡照片,右側(cè) d 圖為實驗組經(jīng)復(fù)配酶處理的烘干 7 天的血液采集卡的電鏡照片。在圖 c 中,首先因為血液采集卡的纖維經(jīng)過了 7 天的老化實驗處理,采集卡的纖維與圖 2.2 中 a 小圖有明顯的差別,雖然未經(jīng)復(fù)配酶處理表面就已不太平滑,但整體仍為圓柱狀,有較為淺淺的小溝壑;在圖 d 中纖維表面極其不平整,非常不平滑,出現(xiàn)了極其明顯的溝壑,甚至中間有很長很深的溝壑表明復(fù)配酶對血液采集卡的纖維更為明顯的降解作用。
【參考文獻】:
期刊論文
[1]磁珠DNA自動提取系統(tǒng)在法醫(yī)檢驗中的應(yīng)用研究[J]. 劉桂濤,徐興馳. 法制博覽. 2019(04)
[2]不同保存時間對于血液DNA提取質(zhì)量的影響[J]. 孫婷,納莉,丁璐,周瑜,盧震輝,杜勇. 中國繼續(xù)醫(yī)學(xué)教育. 2019(03)
[3]卵泡液中游離線粒體DNA提取和定量方法的研究[J]. 劉宇,趙雪,鄒敏,邵淑敏,李嬌,張衷源,汪文諍,張玲. 生殖醫(yī)學(xué)雜志. 2018(11)
[4]國產(chǎn)和進口磁珠提取試劑盒提取微量DNA的對比分析[J]. 李麗芬,林超奇,李小丹. 海峽科學(xué). 2018(11)
[5]5種試劑盒對血漿游離DNA提取效果的比較[J]. 李雪蓮,齊謝敏,鄒秉杰,黃青,宋沁馨,周國華. 中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué). 2018(08)
[6]一種磁珠提取結(jié)合實時熒光定量核酸擴增定量檢測重組人血白蛋白中畢赤酵母DNA殘留方法的建立[J]. 王敏力,馬秋平,侯繼鋒. 中國藥學(xué)雜志. 2018(10)
[7]全自動核酸提取儀與手動提取組織DNA的效率比較[J]. 林丹義,張科平,許潔,顏黎栩,駱新蘭,劉艷輝. 臨床與實驗病理學(xué)雜志. 2017(12)
[8]“動物組織中DNA的分離提取及含量測定”實驗教學(xué)改革[J]. 趙玉紅,李欣,李小菊,周浩,李登文,石建黨,張金紅,趙立青. 實驗技術(shù)與管理. 2017(11)
[9]應(yīng)用M48磁珠試劑盒提取牙齒DNA[J]. 程沖,陳啟鳴. 海峽科學(xué). 2017(11)
[10]利用顯微搜索衣物上血跡進行DNA檢驗1例[J]. 張瑾,張穎,劉開會,溫帥媛,白艷平,陶克明. 中國法醫(yī)學(xué)雜志. 2015(05)
博士論文
[1]不同預(yù)處理工藝對稻殼纖維素酶酶解效果的影響[D]. 余君.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
碩士論文
[1]天然纖維素超微結(jié)構(gòu)層次及不同內(nèi)切纖維素酶降解特異性的研究[D]. 陳玉.山東大學(xué) 2017
本文編號:3233611
本文鏈接:http://sikaile.net/yixuelunwen/yundongyixue/3233611.html
最近更新
教材專著