研究背景骨髓型放射病和腸型放射病是急性放射病中最主要的兩種疾病類型,目前除美國FDA批準(zhǔn)上市的WR-2721外,尚無其他有效的防治方法。因此,尋找能夠解決核輻射損傷的輻射防護劑以及輻射損傷中的關(guān)鍵作用分子,已成為當(dāng)今核輻射領(lǐng)域研究的重點和難點。在前期的研究中,我們發(fā)現(xiàn)TLR4的配體LPS具有很強的輻射防護作用,但由于毒性較大限制了其臨床應(yīng)用。2014年,邵峰院士提出LPS作為Caspase-11胞內(nèi)配體激活細(xì)胞焦亡通路,隨后細(xì)胞焦亡被廣泛研究并被陸續(xù)報道。其中GSDMD作為焦亡通路的執(zhí)行分子是焦亡發(fā)生與否的關(guān)鍵所在,而其與電離輻射損傷效應(yīng)的關(guān)系還尚無文獻報道。因此我們以GSDMD作為研究對象,探究GSDMD及其相關(guān)通路對造血系統(tǒng)和腸道電離輻射損傷的效應(yīng),明確GSDMD及其通路與電離輻射的關(guān)系,并初步研究GSDMD參與電離輻射損傷的分子機制。研究目的1、明確GSDMD對造血系統(tǒng)電離輻射損傷的效應(yīng);2、明確GSDMD對腸道電離輻射損傷的效應(yīng);3、初步闡明GSDMD參與腸道電離輻射損傷的分子機制。研究內(nèi)容、方法及結(jié)果一、GSDMD對造血系統(tǒng)的電離輻射損傷效應(yīng)研究1、GSDMD KO能夠顯著提... 

【文章來源】：中國人民解放軍海軍軍醫(yī)大學(xué)上海市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：100 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

GSDMDKO小鼠的基因型鑒定

GSDMD 對造血系統(tǒng)和腸道的電離輻射損傷效應(yīng)和初步分子機制研究2、GSDMD KO 顯著提高電離輻射的生存率得到足夠數(shù)量的 GSDMD KO 純合小鼠后，我們首先研究輻射對 GSDMD KO 小鼠生存期的影響。在實驗前，將小鼠置于同等環(huán)境條件下共飼養(yǎng) 1-2 周。選取體重為18-20 g 同批次 6-8 周的 C57BL/6 野生型小鼠作為對照組（n=10），再取 10 只小鼠照射前 24 h 和 2 h 分別給予 WR-2721 腹腔注射作為陽性藥物組（n=10），選取體重、周齡、性別與對照組相匹配的 GSDMD KO 小鼠作為實驗組（n=10）進行實驗。利用60Co放射源，對小鼠進行全身 γ 射線照射，統(tǒng)計 30 天生存期。如圖 1-2 所示，亞致死劑量 7.5 Gy 條件下，野生型小鼠 30 天生存率為 50%，而GSDMD KO 小鼠生存率為 100%，相較于陽性藥物 WR-2721，能夠明顯提高生存率（P=0.0373）；在全致死劑量 8.5 Gy 條件下，野生型小鼠在第 8 天全部死亡，30 天的生存率為 0，平均存活時間為 7 天；給予陽性藥物 WR-2721 后生存時間略有延長；與之形成鮮明對比，GSDMD KO 小鼠 30 天內(nèi)仍有 3 只小鼠存活，30 天的生存率為30%，明顯延長了小鼠的照后生存時間。

圖 1-3. GSDMD KO 改善電離輻射引起的外周血損傷。從左至右依次為白細(xì)胞（WBC），紅細(xì)胞（RBC）和血小板（PLT），虛線表示 GSDMD KO 小鼠，實線表示野生型小鼠。GSDMD KO小鼠外周血恢復(fù)更快。4、GSDMD KO 抑制骨髓/脾臟/胸腺的有核細(xì)胞減少根據(jù)上述實驗結(jié)果提示，我們進一步探索 GSDMD 參與輻射對造血系統(tǒng)損傷的相關(guān)指標(biāo)。我們利用流式細(xì)胞儀檢測野生型小鼠與 GSDMD KO 小鼠骨髓、脾臟和胸腺中有核細(xì)胞的數(shù)量并準(zhǔn)確計數(shù)。結(jié)果顯示（圖 1-4），我們對野生型小鼠和 GSDMDKO 小鼠給予 10.0 Gy 的 γ 射線照射。照后 1 天，檢測小鼠骨髓有核細(xì)胞并準(zhǔn)確計數(shù)。結(jié)果表明，IR 處理后 GSDMD KO 小鼠的骨髓、脾臟和胸腺有核細(xì)胞明顯多于野生型小鼠，提示 GSDMD KO 有助于刺激造血，抑制電離輻射后的有核細(xì)胞減少。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Diagnostic imaging and radiation exposure in inflammatory bowel disease[J]. Nekisa Zakeri,Richard CG Pollok.  World Journal of Gastroenterology. 2016(07)



本文編號：3143476