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去泛素化酶USP11在放射性肺損傷中的生物學(xué)作用及其作用機制的初步研究

發(fā)布時間:2021-02-23 11:54
  目的:初步研究去泛素化酶11(Ubiquitin-specific peptidase 11,USP11)在放射性肺損傷發(fā)生進展過程中的生物學(xué)作用及其可能的調(diào)控機制。方法:(1)對Usp11基因敲除小鼠進行繁育鑒定,獲得實驗所需要的基因敲除純合子Usp11-/-小鼠和正常野生型Usp11+/+小鼠,并追蹤統(tǒng)計小鼠的身長體重等生長發(fā)育指標(biāo);(2)不同基因型小鼠全身照射9Gy,觀察急性放射性損傷時小鼠血白細胞以及淋巴細胞的變化;(3)不同基因型小鼠全身照射7.5Gy,觀察統(tǒng)計小鼠生存期;(4)將小鼠分為基因敲除的純合子Usp11-/-組和正常野生型Usp11+/+組,通過右肺局部精準(zhǔn)定位照射30Gy,建立放射性肺損傷的模型;(5)分別于照射后不同時間點對造模小鼠進行影像學(xué)掃描觀察肺部變化;同時收集小鼠左右肺組織,進行病理學(xué)HE染色以及纖維化MASSON特染;取照射后不同時間點的小鼠血清用ELISA法檢測小鼠血清TGF-β1的含量;同時用Western Blot的方法完成小鼠肺組織纖維化相關(guān)蛋白α-SMA的定量;(6)采用組織塊法分離提取不同基因型小鼠肺組織的原代細胞,經(jīng)免疫熒光的方法觀察照... 

【文章來源】:蘇州大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】:89 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

去泛素化酶USP11在放射性肺損傷中的生物學(xué)作用及其作用機制的初步研究


小鼠基因型鑒定結(jié)果(第1、2、3泳道為雜合子,第4、5、7泳道為純合子,第6泳道為野生型)

身長,小鼠,放射性肺損傷,泛素化


a小鼠身長測量和體重測量

身長,小鼠,造血系統(tǒng),血白細胞


10圖 1-2b 不同基因型小鼠體重身長變化并無差別(n=6)三、小鼠照射后急性損傷期血白細胞和淋巴細胞變化造血系統(tǒng)是活躍的細胞更新系統(tǒng),對電離輻射很敏感。輻射會顯著抑制造血免疫功能。為了探究照射是否對不同基因型小鼠的造血系統(tǒng)有著不同的影響,本實驗將不同基因型小鼠分組,收集全身照射 9Gy 后的第 1 天以及第 3.5 天的小鼠血液,檢測白細胞 WBC 的數(shù)量以及淋巴細胞 LYM 的百分比。結(jié)果如圖 1-3 所示:在不照射的情況下,兩種基因型小鼠血白細胞數(shù)和淋巴細胞百分比基本相同且維持正常水平。在照射后,由于受到射線的直接殺傷作用或

【參考文獻】:
期刊論文
[1]泛素特異性蛋白酶在抗病毒感染免疫中的作用研究進展[J]. 朱惠惠,趙西寶,胡未偉,陳瑋琳.  浙江大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2015 (05)
[2]香煙作用于肺部原代細胞影響慢阻肺氣道重構(gòu)的研究進展[J]. 陳玲,蔣雪梅,鄧林紅.  中國老年學(xué)雜志. 2015(12)
[3]USP11通過去泛素化p53調(diào)控p53穩(wěn)定性(英文)[J]. Jia-ying KE,Cong-jie DAI,Wen-lin WU,Jin-hua GAO,Ai-juan XIA,Guang-ping LIU,Kao-sheng LV,Chun-lin WU.  Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology). 2014(12)
[4]泛素蛋白的研究進展[J]. 黃新敏,張艷霞,萬小榮.  廣東農(nóng)業(yè)科學(xué). 2010(06)
[5]轉(zhuǎn)化生長因子TGF-β1與腫瘤[J]. 賈軍,張志明,楊世勇.  陜西腫瘤醫(yī)學(xué). 2001(01)



本文編號:3047547

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