發(fā)布時間：2021-01-29 17:58

　　目的:高能電子射線模擬β射線照射L929成纖維細(xì)胞和大鼠皮膚后,觀察細(xì)胞生長增殖和細(xì)胞凋亡,探討β放射損傷的細(xì)胞機制;應(yīng)用PQQ,觀察其對大鼠皮膚急性放射性燒傷的治療作用。方法:①以10Gy照射劑量的高能電子射線模擬β射線照射L929細(xì)胞,采用MTT實驗觀察輻照后細(xì)胞的生長曲線,細(xì)胞同步化后,應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)觀察輻照后細(xì)胞在不同時間點（4h、8h、12h、24h、36h、48h）的細(xì)胞周期分布和細(xì)胞凋亡率,應(yīng)用半定量PCR（RT-PCR）、瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行凋亡指標(biāo)（Caspase-3）的檢測。②45Gy劑量照射SD大鼠臀部皮膚后,分別以噴射、口服給藥途徑使用新型維生素PQQ,使用劑量分別是300mmol/L、2mg/kg體重,應(yīng)用氧自由基測試盒檢測SOD、MDA、NOS,輻照野皮膚整體照相,HE染色觀察炎癥發(fā)展、表皮細(xì)胞、真皮層內(nèi)成纖維母細(xì)胞和毛囊上皮細(xì)胞及膠原纖維的損傷變化。結(jié)果:①受照后L929細(xì)胞生長曲線呈倒“Z”狀,在24h時輻照組細(xì)胞MTTA570值出現(xiàn)明顯的下降,之后緩慢上升于第3天進(jìn)入指數(shù)增長期,於第4天達(dá)到最高點,但與正常細(xì)胞生長曲線有一定差距,之后出現(xiàn)下降趨勢。受照細(xì)... 

【文章來源】：蘇州大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：50 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

10Gyβ射線照射L929細(xì)胞后4h、24h細(xì)胞直方圖

11圖 4 10Gyβ 射線照射 L929 細(xì)胞 Caspase-3 的 RT-PCR 結(jié)果3.4 細(xì)胞周期分析表 1 中可見，輻射后細(xì)胞發(fā)生 G2 期阻滯。輻照后，隨著時間的增加，細(xì)胞周期分布改變：G2/M 期細(xì)胞的比例不斷增加，至 24h 時，G2/M 期細(xì)胞達(dá)到最高峰，占 65.965%；同時，處于 S 期的細(xì)胞數(shù)不斷降低,至 24h 時，S 期細(xì)胞達(dá)到最低，占 12.451%(圖 2)；G0/G1 期比例變化不顯著，基本呈下降趨勢，各時間點均低于正常細(xì)胞水平。

輻照未給藥組 PQQ 噴射治療組PQQ 口服治療組圖4 輻照未給藥組、PQQ噴射治療組、PQQ口服治療組SD大鼠輻照野皮膚整體照相2.5 HE 染色輻照未加藥組第一周，表皮水腫，輕微壞死，未見炎癥反應(yīng)，膠原纖維斷裂；輻照未加藥組第三周，部分毛囊上皮破壞，大部分表皮細(xì)胞變性壞死，棘細(xì)胞、纖維母細(xì)胞腫脹，膠原纖維斷裂明顯,表皮下膠原纖維壞死，炎癥反應(yīng)嚴(yán)重；輻照未加藥組第五周，毛囊上皮細(xì)胞嚴(yán)重破壞，表皮細(xì)胞幾乎完全壞死，脫落形成皮膚潰瘍，棘細(xì)胞、纖維母細(xì)胞腫脹，空泡變性

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]電子射線局部輻照大鼠Ⅰ/Ⅲ型膠原表達(dá)及基質(zhì)金屬蛋白酶改變的研究[J]. 周迎會,仇灝,徐嵐,姜智,孫其昌,馬震宇,吳士良.  實驗動物與比較醫(yī)學(xué). 2006(04)
[2]β射線對NIH3T3成纖維細(xì)胞細(xì)胞周期的影響及�；撬岬母深A(yù)作用[J]. 范雁,徐愛華,周迎會,陳美,吳士良.  江蘇大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2005(06)
[3]吡咯喹啉醌對放創(chuàng)性皮膚損傷促愈合研究[J]. 李皓桓,張弩,劉登勝,劉世清,彭昊.  中華放射醫(yī)學(xué)與防護(hù)雜志. 2005(04)
[4]電子射線照射大鼠膠原及自由基改變的研究[J]. 周迎會,吳士良,仇灝,徐嵐,姜智,賈偉,彭淼.  中華放射醫(yī)學(xué)與防護(hù)雜志. 2004(05)
[5]單純創(chuàng)傷和照射復(fù)合創(chuàng)傷愈合過程中成纖維細(xì)胞的病理學(xué)及超微結(jié)構(gòu)特點[J]. 秦全紅,王德文,高亞兵,彭瑞云,谷慶陽,夏國偉,崔雪梅.  輻射研究與輻射工藝學(xué)報. 2003(02)
[6]急性放射性皮膚潰瘍愈合過程中TGFβ及其受體表達(dá)的研究[J]. 曹衛(wèi)紅,楊志祥,谷慶陽,王德文,高亞兵,楊文峰,孫向黎,王兆海.  中華放射醫(yī)學(xué)與防護(hù)雜志. 2003(01)
[7]急性放射性皮膚潰瘍傷口收縮遲緩的機制[J]. 曹衛(wèi)紅,楊志祥,谷慶陽,楊文峰,孫向黎,王德文,高亞兵.  中國臨床康復(fù). 2002(12)
[8]電子直線加速器照射對NIH3T3細(xì)胞的細(xì)胞周期及凋亡的影響[J]. 徐嵐,周迎會,史寧,彭淼,吳士良.  蘇州大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2002(02)
[9]高能電子線輻射損傷對TGF-β1表達(dá)及Ⅰ、Ⅲ型膠原含量的影響[J]. 周迎會,徐嵐,吳士良,史寧,涂友斌,彭淼.  輻射研究與輻射工藝學(xué)報. 2002(01)
[10]急性放射性皮膚潰瘍發(fā)生發(fā)展過程中多種生長因子及其受體表達(dá)水平和對潰瘍愈合影響的研究[J]. 谷慶陽,曹衛(wèi)紅,楊志祥,楊文鋒,孫向黎,高亞兵,楊紅.  軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院院刊. 2001(04)



本文編號：3007332