【摘要】：目的:腦外傷是指由于外力直接作用于頭部所造成的損傷,腦外傷發(fā)病率逐年增加,致死及致殘率極高。腦外傷發(fā)生后,由腦部損傷組織生理生化代謝的改變所引起的繼發(fā)性損傷成為大腦功能缺損的主要原因。在臨床中,腦外傷的診斷多基于CT、MRI等影像學(xué)方法,而缺乏相應(yīng)的生化指標(biāo),故在腦外傷的治療過程中難以進(jìn)行綜合性動態(tài)評價。此外,部分腦外傷患者所出現(xiàn)的精神及神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥的發(fā)病機(jī)制仍然不明確。本研究擬通過定量蛋白質(zhì)組學(xué)和生物信息學(xué),全面分析腦外傷后代謝通路的變化情況,進(jìn)而初步篩選腦外傷后的潛在生物標(biāo)志物,探討代謝通路變化與腦損傷的關(guān)系,也為腦外傷損傷時間推斷提供技術(shù)手段。方法:本研究采用重物自由落體撞擊SD大鼠大腦皮質(zhì)的方式建立TBI動物模型。為探討腦外傷后不同時間點(diǎn)蛋白組學(xué)的變化情況,分別在腦外傷后1 h、6 h、24h、3 d處死大鼠,并收集損傷組織周圍的皮質(zhì)。通過高分辨LC-MS/MS,分別對不同損傷時間點(diǎn)的皮質(zhì)和對照組皮質(zhì)進(jìn)行定量蛋白組學(xué)分析。檢測到的每一個蛋白質(zhì)根據(jù)損傷組/對照組的比值大小篩選差異蛋白,以倍數(shù)大于1.2或倍數(shù)小于0.8作為差異蛋白的閾進(jìn)行篩選。在此基礎(chǔ)上通過DAVID,Pather Database等數(shù)據(jù)庫進(jìn)行生物信息學(xué)分析,獲得Gene Ontology(GO)、Pathways的分析結(jié)果,根據(jù)生物信息學(xué)分析情況篩選差異蛋白作為潛在的生物標(biāo)志物,并進(jìn)行可靠性驗(yàn)證。同時,根據(jù)Pathways分析結(jié)果,探討代謝通路變化與腦外傷后凋亡的關(guān)系,深入分析腦外傷后腦功能障礙的可能機(jī)制。結(jié)果:腦外傷后,損傷區(qū)腦組織蛋白表達(dá)發(fā)生顯著變化,不同時間點(diǎn)差異蛋白參與到急性期應(yīng)答、氧轉(zhuǎn)運(yùn)等生物學(xué)過程。在生物信息學(xué)對Pathways分析的基礎(chǔ)上,篩選出泛素蛋白酶體途徑、糖酵解途徑以及Wnt信號通路作為研究分析對象,結(jié)合差異蛋白表達(dá)情況從而確定了PSMC4在損傷1h時表達(dá)量增加,第3天恢復(fù)正常;Hexokinase-1在腦外傷后1h表達(dá)增加,持續(xù)到第3天后逐漸降低;AP2M1前3天無顯著變化,第3天開始降低。對代謝通路與腦外傷后凋亡的研究情況來看,腦外傷后凋亡抑制蛋白bcl-2表達(dá)降低,促凋亡蛋白caspase-3表達(dá)增加,同時Wnt信號通路關(guān)鍵蛋白β-catenin表達(dá)降低,通路受到抑制;當(dāng)激活Wnt通路后,外傷后凋亡的激活被抑制。結(jié)論:腦外傷后,蛋白質(zhì)組學(xué)輪廓發(fā)生顯著改變,差異蛋白影響多個生物學(xué)過程以及多條代謝途徑;PSMC4、Hexokinase-1、AP2M1,可以作為初步篩選腦外傷急性期(≤3 d)的潛在生物標(biāo)志物;激活Wnt通路可以抑制損傷后神經(jīng)元的凋亡。
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：D919
【圖文】：

得到定量信息（圖 2-1）；腦外傷 6h 后，三次生物學(xué)重復(fù)共鑒定到 1002 個蛋白，881個被定量（圖 2-2）；損傷 24h 后，鑒定到 933 個蛋白，其中 832 有定量信息（圖 2-3）；外傷 3d 后共鑒定 1216 個蛋白，定量蛋白有 1057 個（圖 2-4）。根據(jù)已有文獻(xiàn)的篩選標(biāo)準(zhǔn)，對蛋白組學(xué)差異蛋白進(jìn)行篩選，以 TMT-127/TMT-126(損傷組/對照組)變化量≥1.2 倍或≤0.8 倍作為差異蛋白的選閾值，超過其范圍，則認(rèn)為腦外傷后這類蛋白的表達(dá)發(fā)生變化。對每一個損傷時間點(diǎn)的三次生物學(xué)重復(fù)，按下列原則對差異蛋白進(jìn)行篩選：1. 三次定量結(jié)果中，TMT-127/TMT-126 比值均≥1.2 或≤0.8；2. 三次定量結(jié)果中，TMT-127/TMT-126 比值有兩次≥1.2 或≤0.8；滿足以上兩個條件，則作為該損傷時間點(diǎn)的差異蛋白。對于差異蛋白，1h、6h、24h、3d 分別篩選出 173，147，283，255 個蛋白作為差異蛋白，上調(diào)和下調(diào)情況見圖 3。

腦外傷1h后，蛋白定性與定量結(jié)果

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 侯明山;藺鵬禎;楊軍;劉曉斌;;血漿和肽素水平與腦外傷患者病情嚴(yán)重程度相關(guān)性研究[J];現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2016年04期

2 許玉清;;嚴(yán)重腦外傷患者術(shù)后廢用綜合征的護(hù)理干預(yù)[J];實(shí)用臨床醫(yī)藥雜志;2016年22期

3 唐娟;;分析康復(fù)護(hù)理應(yīng)用于腦外傷患者中的臨床有效性[J];中國醫(yī)藥指南;2016年30期

4 劉海蓮;;腦外傷患者開展時間護(hù)理模式對其運(yùn)動功能及生活質(zhì)量的影響探討[J];世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘;2016年89期

5 袁豐;;氣管切開時機(jī)對重癥小腦外傷患者的影響[J];江西醫(yī)藥;2017年03期

6 陳萍;;重癥腦外傷患者呼吸道護(hù)理體會[J];實(shí)用臨床護(hù)理學(xué)電子雜志;2017年22期

7 張艷芳;;重病腦外傷患者的呼吸道護(hù)理分析[J];實(shí)用臨床護(hù)理學(xué)電子雜志;2017年26期

8 張偉;;探究氣管切開術(shù)在治療重癥腦外傷患者中的臨床應(yīng)用[J];中國衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)管理;2017年13期

9 劉素敏;;人性化護(hù)理對重癥腦外傷患者高壓氧綜合治療的效果觀察[J];世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘;2015年A1期

10 彭平娟;;情志護(hù)理對腦外傷患者心理和情感障礙康復(fù)的影響探討[J];包頭醫(yī)學(xué);2016年04期

相關(guān)會議論文 前10條

1 孫正杰;;優(yōu)化急救流程在嚴(yán)重腦外傷患者救治中的作用[A];中華醫(yī)學(xué)會急診醫(yī)學(xué)分會第17次全國急診醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)年會論文集[C];2014年

2 張恒;;對腦外傷患者實(shí)施早期康復(fù)的體會[A];首屆全國腦外傷治療與康復(fù)學(xué)術(shù)大會論文匯編（下）[C];2011年

3 袁方;丁軍;郭衍;高文偉;王敢;陳世文;陳浩;田恒力;;腦外傷患者預(yù)后預(yù)測模型的建立及其驗(yàn)證[A];2011中華醫(yī)學(xué)會神經(jīng)外科學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2011年

4 高海海;張勇;陳萍;趙志穎;郝孔志;彭有鼎;;腦外傷患者的聽力學(xué)調(diào)查[A];2010全國耳鼻咽喉頭頸外科中青年學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2010年

5 陸向紅;易丹;;臨床藥師參與腦外傷患者治療1例分析[A];第五屆臨床藥學(xué)實(shí)踐案例分析與合理用藥學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2012年

6 王鑫;陳正東;王葦;;腦外傷患者數(shù)字工作記憶的功能性磁共振研究[A];首屆全國腦外傷治療與康復(fù)學(xué)術(shù)大會論文匯編（下）[C];2011年

7 崔可;林榮海;單仁飛;;腦外傷患者急性期的液體管理[A];2007年浙江省危重病學(xué)學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2007年

8 張皓;張小年;王曉艷;孫新亭;遲茜茜;;不同病程腦外傷患者康復(fù)治療效果及經(jīng)濟(jì)學(xué)分析[A];首屆全國腦外傷治療與康復(fù)學(xué)術(shù)大會論文匯編（下）[C];2011年

9 鄧水香;曹同瓦;祝禾辰;王昆侖;方勇;;降鈣素原與單純腦外傷患者病情嚴(yán)重程度、并發(fā)癥以及預(yù)后的關(guān)系[A];《中華急診醫(yī)學(xué)雜志》第十一屆組稿會暨第四屆急診醫(yī)學(xué)青年論壇論文匯編[C];2012年

10 楊松斌;董曉巧;竹方龍;呂慶偉;黃杭斌;章國海;秦智勇;;腦外傷患者血漿抵抗素的檢測及臨床意義[A];《中華急診醫(yī)學(xué)雜志》第九屆組稿會暨第二屆急診醫(yī)學(xué)青年論壇全國急危重癥與救援醫(yī)學(xué)學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2010年

相關(guān)重要報紙文章 前3條

1 劉偉國;讓嚴(yán)重腦外傷患者“cool”起來[N];健康報;2005年

2 馮建宏;腦外傷患者怎樣進(jìn)行平衡功能訓(xùn)練[N];大眾衛(wèi)生報;2006年

3 武警后勤學(xué)院附屬醫(yī)院神經(jīng)外科教授 張賽;亞低溫療法如何用于腦外傷患者[N];健康報;2012年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前4條

1 胡華;人腦外傷和腫瘤周圍水腫的分子調(diào)節(jié)：5-脂氧酶/半胱氨酰白三烯受體與水通道蛋白4（AQP4）的關(guān)系[D];浙江大學(xué);2005年

2 劉宏偉;局部人工腦脊液沖洗、局灶亞低溫對腦外傷后腦水腫、細(xì)胞凋亡的影響[D];中南大學(xué);2007年

3 鮑偉奇;GABA_A/BZ受體PET顯像劑~(11)C-FMZ的放射性藥物制備及在嚴(yán)重腦外傷患者大腦神經(jīng)元損傷的評價[D];復(fù)旦大學(xué);2013年

4 王貍

本文編號：2733234