發(fā)布時(shí)間：2020-06-14 17:34

【摘要】：目的:運(yùn)用代謝組學(xué)技術(shù),比較大鼠正常骨骼肌與損傷骨骼肌中代謝物的差異,尋找與損傷時(shí)間相關(guān)的特征差異代謝物,并對(duì)以上特征差異代謝物進(jìn)行通路富集,尋找與損傷時(shí)間相關(guān)的代謝通路,對(duì)骨骼肌損傷與修復(fù)的機(jī)制進(jìn)行探討。方法:建立大鼠骨骼肌挫傷模型,包括骨骼肌挫傷0.5h組、1h組、2h組和對(duì)照組(n=7)。挫傷后的大鼠在相應(yīng)損傷時(shí)間點(diǎn)處死,并分別于死后0h、1h、6h、12h、24h取損傷中心區(qū)骨骼肌。應(yīng)用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法(gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS)測(cè)定骨骼肌中的代謝物。采用MS-Dial ver2.76軟件對(duì)原始譜圖進(jìn)行預(yù)處理,再將得到的數(shù)據(jù)矩陣進(jìn)行歸一化處理后導(dǎo)入SIMCA-P14.1軟件進(jìn)行多元統(tǒng)計(jì)分析和數(shù)據(jù)建模,最后結(jié)合OPLS-DA與單因素方差分析(ANOVA)篩選出與損傷時(shí)間相關(guān)的特征差異代謝物。結(jié)果:大鼠骨骼肌挫傷后的代謝輪廓與正常時(shí)所展現(xiàn)的代謝輪廓有明顯差異。從實(shí)驗(yàn)組中共篩選出5種具有連續(xù)差異表達(dá)性質(zhì)的特征差異代謝物,它們分別是N-甲酰甘氨酸、丙二酸、肌氨酸、丙氨酰-丙氨酸、尸胺,并表現(xiàn)出了與時(shí)間相關(guān)的表達(dá)規(guī)律;同時(shí)結(jié)合ROC曲線分析,L-亮氨酸、多巴、肌氨酸、尸胺、N-甲酰甘氨酸、丙二酸、L-絲氨酸、麥芽三糖、甘氨酸是大鼠骨骼肌損傷0.5h的特征差異代謝物,且聯(lián)合用于推斷損傷時(shí)間時(shí)具有更高的準(zhǔn)確性;L-亮氨酸、多巴、肌氨酸、尸胺、N-甲酰甘氨酸、丙二酸、烏頭酸、乙二酸是大鼠骨骼肌損傷1h的特征差異代謝物,且聯(lián)合用于推斷損傷時(shí)間時(shí)具有更高的準(zhǔn)確性;L-亮氨酸、多巴、肌氨酸、尸胺、N-甲酰甘氨酸、丙二酸、烏頭酸、D-蘇糖醇、5-羥色胺、D-木酮糖是大鼠骨骼肌挫傷2h的特征差異代謝物,且聯(lián)合用于推斷損傷時(shí)間時(shí)具有更高的準(zhǔn)確性。以上特征差異代謝物分別參與三羧酸循環(huán)、糖酵解、磷酸戊糖途徑、氨基酸代謝等通路,與能量代謝、蛋白質(zhì)的分解與合成有關(guān)。結(jié)論:本實(shí)驗(yàn)從代謝組學(xué)的角度尋找到了骨骼肌損傷后與時(shí)間相關(guān)的特征差異代謝物。對(duì)得到的差異代謝物進(jìn)行生物功能富集后找到了受影響的代謝通路,可以從機(jī)制上對(duì)骨骼肌損傷后的一系列變化進(jìn)行闡釋。該研究結(jié)果可為推斷骨骼肌損傷時(shí)間提供科學(xué)依據(jù)。
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類(lèi)號(hào)】：D919
【圖文】：

所示，錄出，組間分離良好，圖中箭?

對(duì)照組與骨骼肌挫?

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本文編號(hào)：2713126