【摘要】：研究背景和目的:軍事訓(xùn)練期間發(fā)生的人員在封閉環(huán)境暴露于高濃度發(fā)煙罐煙霧(HC煙霧)導(dǎo)致吸入性損傷事件會造成嚴(yán)重人員傷亡,既往認(rèn)為吸入性肺損傷機(jī)制一直被是非特異性的,治療方案也一直僅僅限于對癥治療。明確吸入性毒氣損傷機(jī)制,尋找新治療方案一直是近期研究的重點。本研究的目的是利用大鼠模型揭示發(fā)煙罐煙霧吸入所致肺損傷的潛在機(jī)制。研究方法:本研究建立發(fā)煙罐煙霧吸入性損傷的動物模型,自主研發(fā)可測定煙霧成分及濃度的煙箱,制作模擬發(fā)煙罐,確定大鼠模型染毒劑量,測定發(fā)煙罐煙霧中鋅離子濃度,大鼠肺進(jìn)行HE及Mallory染色,大鼠血清行生化檢測。以iTRAQ和加權(quán)基因共表達(dá)網(wǎng)絡(luò)分析WGCNA來鑒別吸入煙霧1天、2天、7天和14天重要的大鼠肺差異蛋白,并進(jìn)行GO和KEGG途徑分析研究了差異表達(dá)蛋白的生物學(xué)功能。同時分析了吸入煙霧后肺損傷早期(dl天和d2天)和中晚期(d7和d14天)的差異表達(dá)蛋白,進(jìn)行蛋白-蛋白相互作用(PPI)分析。最后通過免疫組織化學(xué)和蛋白質(zhì)印跡分析對損傷修復(fù)相關(guān)蛋白PARK7、FABP5和Galectin-7進(jìn)行驗證。對大鼠及患者進(jìn)行PARK7 BALF和血清ELISA檢測。主要結(jié)果及結(jié)論:大鼠死亡率與煙霧鋅離子濃度明顯相關(guān)。大鼠肺部病理研究發(fā)現(xiàn)染毒后早期肺組織出現(xiàn)充血、水腫、肺泡結(jié)構(gòu)破壞等病理變化,中后期出現(xiàn)肺氣腫及肺纖維化,染毒早期生化指標(biāo)明顯升高。吸入煙霧后第1、2、7和14天,總計共獲得27種不同表達(dá)蛋白。WGCNA結(jié)果表明,寶藍(lán)色模塊(涉及909個蛋白質(zhì))與煙霧吸入時間最相關(guān)。在肺損傷修復(fù)的早期階段,分別鑒定了 My13,Ckm,Adrml和 Igfbp7。在肺損傷修復(fù)中晚期鑒定 Gapdh,Acly,Tnni2,Actal,Actn3,Pygm,Eno3 and Tpil及糖酵解/糖異生信號通路。根據(jù)目前研究熱點發(fā)掘組學(xué)數(shù)據(jù),發(fā)現(xiàn)持續(xù)下調(diào)的鋅離子通道TRPM7,及可能參與鋅離子轉(zhuǎn)運(yùn)的溶質(zhì)載體Slc25a51等蛋白在HC煙霧肺損傷起重要作用。對肺損傷修復(fù)關(guān)鍵蛋白檢索分析,從55個hub蛋白中篩選出3個蛋白:Galectin-7、PARK7及FABP5進(jìn)行驗證。對大鼠肺組織進(jìn)行了免疫組化及WB再次驗證。Galectin-7 WB為陰性。FABP5的WB與蛋白質(zhì)組學(xué)分析一致,FABP5免疫組化結(jié)果為陰性。PARK7的免疫組化、WB與iTRAQ定量表達(dá)均一致。ELISA檢測發(fā)現(xiàn)大鼠及人,HC煙霧暴露后d1、2天BALF的PARK7水平明顯增高,后期逐漸下降至正常。大鼠和中重度患者血清PARK7指標(biāo)在7天內(nèi)急性期均下降。而人輕度損傷組急性期血清PARK7水平是上升。說明PARK7不僅參與損傷修復(fù),還可作為反應(yīng)吸入性損傷嚴(yán)重程度的生物學(xué)標(biāo)志物。
【圖文】：

解放軍醫(yī)學(xué)院博士學(xué)位論文逡逑預(yù)測氯化鋅煙霧吸入損傷嚴(yán)重程度［２６］，，但近２０年無基氯化鋅煙霧毒理機(jī)制，我們以高劑量氯化鋅煙霧染毒大鼠。逡逑料與方法逡逑煙霧箱模型建立：因所有重癥患者均在封閉環(huán)境內(nèi)高濃度境，本實驗自制靜態(tài)發(fā)煙罐煙霧箱，箱體為長方體：長ｌ積０．４８邋ｍ３，在頂部放置排風(fēng)扇，便于染毒結(jié)束后盡快散性地接通的氣體接口，連接氣體采樣儀，將氣體樣本轉(zhuǎn)化霧中不同成分物質(zhì)的性質(zhì)和濃度。箱體內(nèi)放置模擬發(fā)煙罐。逡逑

圖３煙霧鋅離子濃度與大鼠死亡率相關(guān)逡逑吸入煙霧后大鼠各時間點病理改變逡逑大鼠吸入損傷后肺早期改變即Ｄｌ、Ｄ２主要以肺泡腔出血、肺間質(zhì)水腫、、泡、煙霧顆粒氣管沉著為主。９．９模擬罐較５．０ｇ模擬罐損傷更
【學(xué)位授予單位】：中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R82

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 關(guān)曉旭;;失火煙霧吸入損傷[J];化工勞動保護(hù)(工業(yè)衛(wèi)生與職業(yè)病分冊);1991年04期

2 牟燕華;高壓氧治療失火煙霧吸入損傷七例[J];中華航海醫(yī)學(xué)雜志;1997年04期

3 吳振忠;黎鰲;朱佩芳;姜坤元;陳發(fā)明;王天乙;魏钷菊;李進(jìn)年;李照洲;何寶斌;王風(fēng)君;;狗煙霧吸入損傷早期纖維支氣管鏡檢查[J];中華整形燒傷外科雜志;1985年02期

4 王曉彤;王可軍;遲寧;;急性失火煙霧吸入損傷2例報告[J];職業(yè)衛(wèi)生與應(yīng)急救援;2014年05期

5 孫磊;蔡穎;敖琳;安輝;陳晟;陶成玉;劉晉yN;曹佳;;密閉艙室煙霧吸入對大鼠重要臟器損傷的病理觀察[J];中華衛(wèi)生應(yīng)急電子雜志;2017年06期

6 李晶潔;瀝青煙霧致肺水腫死亡1例[J];中國誤診學(xué)雜志;2004年03期

7 劉偉;金發(fā)光;傅恩清;謝永宏;孫瑞琳;;吸入有毒煙霧致急性肺損傷3例[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2010年01期

8 謝爾凡,楊宗城,黎鰲;外源性肺表面活性物質(zhì)替代治療煙霧吸入損傷的實驗研究[J];中華醫(yī)學(xué)雜志;1997年04期

9 胡慶宏,郭光華,王文,汪泱,李國輝,曹勇;吸入傷犬部分液體通氣后血生化指標(biāo)變化與動脈血氧分壓的關(guān)系[J];中華燒傷雜志;2002年03期

10 程冰;劉群;張建明;馮世海;趙永健;施耘;;辛伐他汀對煙霧吸入性損傷大鼠肺的保護(hù)作用[J];中華損傷與修復(fù)雜志(電子版);2012年01期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前1條

1 謝曉瑋;發(fā)煙罐煙霧導(dǎo)致肺損傷的蛋白組學(xué)研究[D];中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2019年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前2條

1 馬彥波;肢體爆炸傷復(fù)合煙霧吸入損傷特點與救治的實驗研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2016年

2 劉一凡;黑火藥煙霧致大鼠吸入性肺損傷及烏司他丁的干預(yù)作用[D];中南大學(xué);2014年

本文編號：2670408