【摘要】：目的枸杞是一種中草藥,主要活性成分是枸杞多糖(Lycium barbarum polysaccharide,LBP),有多種藥理作用。本研究的目的是探討枸杞多糖對輻射所致小鼠骨髓單核細(xì)胞(Bone marrow mononuclear cells,BMNCs)凋亡的影響,檢測不同劑量枸杞多糖對輻射誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡的抑制效果并對其作用機(jī)制進(jìn)行初步探究。方法體外培養(yǎng)小鼠骨髓單核細(xì)胞,將其分為blank組(未經(jīng)輻射和LBP處理)、control組(僅輻射)、200μg/mL LBP(輻射+200μg/mL LBP)、400μg/mL LBP(輻射+400μg/mL LBP)、800μg/mL LBP(輻射+800μg/mL LBP),LBP處理24小時后,用cck-8法檢測細(xì)胞活力、流式細(xì)胞術(shù)(Flow cytometry,FCM)檢測細(xì)胞凋亡率、通過JC-1檢測線粒體膜電位熒光和Western印跡檢測線粒體途徑中凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)。結(jié)果結(jié)果顯示,經(jīng)過24小時的LBP處理,與輻射對照組相比,400μg/mL LBP和800μg/mL LBP組可顯著提高細(xì)胞活力(P0.01),各LBP組可降低輻射誘導(dǎo)的BMNCs的早期凋亡率(P0.05)。線粒體膜電位熒光表明枸杞多糖減輕輻射誘導(dǎo)的線粒體膜電位的下降(P0.01)。蛋白質(zhì)印跡分析顯示,枸杞多糖抑制細(xì)胞色素C從線粒體中釋放,以及Caspase9、Caspase3、PARP的表達(dá)(P0.05)。結(jié)論枸杞多糖能抑制輻射誘導(dǎo)的小鼠BMNCs的凋亡,其機(jī)制很有可能是通過抑制線粒體凋亡途徑來實現(xiàn)。
【圖文】：

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文將小鼠 BMNCs 暴露于 100 μg/mL、200 μg/mL、400 μg/mL、800 μg/mL、1600μg/mL LBP 24h 后，采用 CCK-8 法檢測并計算細(xì)胞抑制率。結(jié)果顯示在圖 1A 中，除了 1600 μg/mL LBP 組之外，在其他 LBP 劑量組中沒有明顯的抑制，因此實驗選擇抑制率更小的 200 μg/mL、400 μg/mL、800 μg/mL 劑量的 LBP。給小鼠 BMNCs 分別給予 0 Gy、1 Gy、2 Gy、4 Gy、8 Gy 的射線照射，24h后采用 CCK-8 法檢測并計算細(xì)胞生存分?jǐn)?shù)。結(jié)果如圖 1B 所示，與 0 Gy 組相比，4 Gy、8 Gy 組差異有統(tǒng)計學(xué)意義（p <0.05），因此選擇產(chǎn)生輻射損傷的最少劑量4 Gy 作為后續(xù)實驗的輻射劑量。

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文將小鼠 BMNCs 暴露于 100 μg/mL、200 μg/mL、400 μg/mL、800 μg/mL、1600μg/mL LBP 24h 后，采用 CCK-8 法檢測并計算細(xì)胞抑制率。結(jié)果顯示在圖 1A 中，除了 1600 μg/mL LBP 組之外，在其他 LBP 劑量組中沒有明顯的抑制，因此實驗選擇抑制率更小的 200 μg/mL、400 μg/mL、800 μg/mL 劑量的 LBP。給小鼠 BMNCs 分別給予 0 Gy、1 Gy、2 Gy、4 Gy、8 Gy 的射線照射，，24h后采用 CCK-8 法檢測并計算細(xì)胞生存分?jǐn)?shù)。結(jié)果如圖 1B 所示，與 0 Gy 組相比，4 Gy、8 Gy 組差異有統(tǒng)計學(xué)意義（p <0.05），因此選擇產(chǎn)生輻射損傷的最少劑量4 Gy 作為后續(xù)實驗的輻射劑量。
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R818

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前4條

1 譚秋慧;安長新;蕭云;廖志敏;;枸杞多糖對熱應(yīng)激大鼠生精細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用及其機(jī)制研究[J];中華男科學(xué)雜志;2012年01期

2 張衛(wèi)星;王華禮;王瑞;李銳;何偉;張?zhí)鞓?biāo);;中藥單體及其組方對~(60)Co-γ致小鼠生精功能障礙的治療[J];中華男科學(xué)雜志;2010年05期

3 甘璐,王建華,張聲華;枸杞多糖抑制人白血病細(xì)胞生長的研究[J];衛(wèi)生研究;2001年06期

4 齊春會,黃琳娟,張永祥,趙修南,田庚元,茹祥斌,沈倍奮;枸杞糖綴合物及糖鏈的化學(xué)結(jié)構(gòu)與免疫活性[J];中國藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志;2001年03期

本文編號：2635704