骨骼肌微損傷自體修復(fù)中超微結(jié)構(gòu)變化與蛋白質(zhì)組學(xué)研究
本文選題:微損傷 + 蛋白質(zhì)組; 參考:《中國(guó)運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)雜志》2015年03期
【摘要】:目的:從蛋白質(zhì)組代謝角度分析骨骼肌微損傷自體修復(fù)過(guò)程中不同功能蛋白質(zhì)組與肌纖維超微結(jié)構(gòu)恢復(fù)的同步變化機(jī)制。方法:Wistar雄性大鼠36只隨機(jī)分為安靜對(duì)照組(D組)、運(yùn)動(dòng)后即刻組(0 h組)、運(yùn)動(dòng)后24 h組(24 h組)、運(yùn)動(dòng)后48 h組(48 h組)、運(yùn)動(dòng)后72 h組(72 h組)及運(yùn)動(dòng)后168 h組(168 h組)每組6只。運(yùn)動(dòng)方案:跑臺(tái)下坡跑,坡度-16度,速度18 m/min,運(yùn)動(dòng)持續(xù)60 min,運(yùn)動(dòng)后相應(yīng)時(shí)間處死。超薄切片、染色,用JEM-1200EX透射電鏡分析不同組別骨骼肌的超微結(jié)構(gòu)。以D組電泳圖譜作參考,進(jìn)行特異蛋白質(zhì)表達(dá)量分析并對(duì)表達(dá)受到激活或者抑制的蛋白質(zhì)進(jìn)行進(jìn)一步質(zhì)譜鑒定。特異蛋白質(zhì)按照功能不同分為I、II、III和IV類。結(jié)果:運(yùn)動(dòng)后即刻,參與細(xì)胞損傷修復(fù)的蛋白質(zhì)(II類)包括膜聯(lián)蛋白A5、維生素D結(jié)合蛋白、α1抗胰蛋白酶前體、DJ-1蛋白、免疫球蛋白、熱休克蛋白β1、著絲粒關(guān)聯(lián)蛋白E表達(dá)先于超微結(jié)構(gòu)變化;運(yùn)動(dòng)后24~72 h,損傷修復(fù)過(guò)程中能量代謝相關(guān)蛋白質(zhì)(I類)如輔酶Q9、煙酰胺腺嘌呤二核苷酸脫氫酶、乙;D(zhuǎn)移酶、異檸檬酸脫氫酶、磷酸甘油-3脫氫酶受到顯著激活,可能促進(jìn)了線粒體自身修復(fù)進(jìn)而加快肌纖維再生速度;運(yùn)動(dòng)后48 h組和72 h組內(nèi)Trim72蛋白、角蛋白、核糖體蛋白、肌球蛋白、載脂蛋白和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)駐地蛋白29參與骨骼肌構(gòu)成的結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)(III類)表達(dá)出現(xiàn)顯著上升,這與超微結(jié)構(gòu)恢復(fù)具有一定的同步性。結(jié)論:骨骼肌微損傷后0~48 h之內(nèi)細(xì)胞損傷修復(fù)蛋白表達(dá)先于超微結(jié)構(gòu)變化;在損傷修復(fù)后24~72 h之內(nèi)線粒體酶系統(tǒng)及能量代謝相關(guān)蛋白表達(dá)先于超微結(jié)構(gòu)修復(fù),這可能促進(jìn)了線粒體自身修復(fù)進(jìn)而加快肌纖維再生速度;在損傷修復(fù)后24~48 h之內(nèi),骨骼肌結(jié)構(gòu)蛋白表達(dá)與超微結(jié)構(gòu)恢復(fù)具有一定的同步性。
[Abstract]:Aim: to analyze the synchronous changes of ultrastructure between different functional proteome and muscle fiber during autorepair of skeletal muscle microinjury from the perspective of proteome metabolism. Methods Thirty-six male Wistar rats were randomly divided into two groups: control group D (n = 36), group D (n = 6), group B (n = 6), group D (n = 6), group B (n = 24), group B (n = 48), group B (n = 48). Exercise plan: running downhill, slope-16 degrees, speed 18 m / min, exercise lasted for 60 minutes, the corresponding time after exercise death. Ultrathin sections were stained and ultrastructure of skeletal muscles of different groups were analyzed by JEM-1200EX transmission electron microscope. The specific protein expression was analyzed by using D group electrophoretic map as reference, and the expression of activated or inhibited protein was further identified by mass spectrometry. The specific proteins can be classified into III and IV according to their functions. Results: immediately after exercise, the proteins involved in the repair of cell injury included annexin A5, vitamin D binding protein, 偽 1 antitrypsin precursor DJ-1 protein, immunoglobulin. Heat shock protein 尾 1, centromere associated protein E expression prior to ultrastructural changes, energy metabolism related protein class I during injury repair at 24h after exercise, such as coenzyme Q9, nicotinamide adenine dinucleotide dehydrogenase, acetyltransferase, The activation of isocitrate dehydrogenase and glycerol phosphate dehydrogenase may promote the repair of mitochondria and accelerate the regeneration rate of muscle fiber, Trim72 protein, keratin, ribosomal protein, myosin in 48 h group and 72 h group after exercise. The expression of apolipoprotein and endoplasmic reticulum site protein 29 involved in structural protein class III) of skeletal muscle increased significantly, which was synchronized with the recovery of ultrastructure. Conclusion: the expression of cell injury repair protein was prior to ultrastructural changes within 48 hours after microinjury of skeletal muscle, and the expression of mitochondrial enzyme system and energy metabolism related protein was prior to ultrastructural repair within 24 to 72 hours after injury repair. This may promote the repair of mitochondria and accelerate the regeneration rate of muscle fiber, and the expression of skeletal muscle structural protein and the recovery of ultrastructure have a certain synchronism within 24 hours after repair.
【作者單位】: 山東體育學(xué)院;中國(guó)科學(xué)院電工研究所生物醫(yī)學(xué)工程部;泰山護(hù)理職業(yè)學(xué)院公共教學(xué)部;濰坊護(hù)理職業(yè)學(xué)院基礎(chǔ)部;
【基金】:國(guó)家體育總局重點(diǎn)研究領(lǐng)域攻關(guān)課題(2014B059) 山東省自然科學(xué)基金(ZR2013CM034,ZR2013CL024) 山東省高?萍加(jì)劃項(xiàng)目(J12LE04)
【分類號(hào)】:R873
【參考文獻(xiàn)】
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【共引文獻(xiàn)】
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本文編號(hào):1919308
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