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缺氧誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基體外修復(fù)輻射損傷小腸上皮細(xì)胞變化

發(fā)布時間:2018-03-21 00:08

  本文選題:間充質(zhì)干細(xì)胞 切入點:培養(yǎng)基 出處:《中國組織工程研究》2015年45期  論文類型:期刊論文


【摘要】:背景:間充質(zhì)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基含有豐富的間充質(zhì)干細(xì)胞旁分泌物質(zhì),被認(rèn)為是干細(xì)胞移植理想的替代方案。然而,正常狀態(tài)的間充質(zhì)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基可能由于旁分泌活性不足,常無法有效修復(fù)損傷組織。目的:觀察缺氧誘導(dǎo)的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基(MSC-CM~(Hyp))對大鼠小腸隱窩上皮IEC-6細(xì)胞輻射損傷后增殖和凋亡的影響,并進(jìn)一步探討其修復(fù)小腸上皮細(xì)胞的旁分泌機(jī)制。方法:IEC-6細(xì)胞接受10 Gy X射線照射后分別加入MSC-CM~(Hyp)、正常培養(yǎng)的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基(MSC-CM~(Nor)組)及DMEM-F12培養(yǎng)基(DMEM-F12組)培養(yǎng)。結(jié)果與結(jié)論:錐蟲藍(lán)染色、流式細(xì)胞儀、Western blot檢測結(jié)果顯示,與DMEM-F12組相比,MSC-CM~(Hyp)組IEC-6細(xì)胞存活數(shù)和增殖率明顯增加(P0.05),凋亡率和凋亡相關(guān)因子Caspases-3/8表達(dá)明顯下降(P0.05),而MSC-CM~(Nor)組的各項指標(biāo)與DMEM-F12組比較差異無顯著性意義(P0.05)。EILSA檢測結(jié)果顯示,與MSC-CM~(Nor)相比,MSC-CM~(Hyp)中血管內(nèi)皮生長因子、堿性成纖維細(xì)胞生長因子、胰島素樣生長因子1、和白細(xì)胞介素10的含量明顯升高(P0.05)。結(jié)果表明,缺氧誘導(dǎo)的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基中細(xì)胞因子含量明顯升高,顯著促進(jìn)輻射損傷IEC-6細(xì)胞的增殖,同時下調(diào)細(xì)胞凋亡信號,從而進(jìn)一步促進(jìn)損傷細(xì)胞的修復(fù)。
[Abstract]:Background: the mesenchymal stem cell conditioned medium contains abundant paracrine substances from mesenchymal stem cells and is considered to be an ideal alternative for stem cell transplantation. The normal mesenchymal stem cell conditioned medium may be due to insufficient paracrine activity. Objective: to observe the effect of hypoxia-induced bone marrow mesenchymal stem cell conditioned medium (MSC-CMH) on proliferation and apoptosis of rat intestinal crypt epithelial IEC-6 cells after radiation injury. To further explore the paracrine mechanism of the repair of intestinal epithelial cells. Methods 10 Gy X ray irradiation was given to 10 Gy of small intestinal epithelial cells. The normal cultured bone marrow mesenchymal stem cells were treated with MSC-CMM-F12 medium.) and the DMEM-F12 medium, DMEM-F12 group, respectively, were used to study the paracrine mechanism of the repair of intestinal epithelial cells. Results and conclusions: trypanosoma blue staining, Western blot analysis by flow cytometry showed that, Compared with the DMEM-F12 group, the survival and proliferation rate of IEC-6 cells in the MSC-CMN group increased significantly, while the apoptosis rate and the expression of apoptosis-related factor (Caspases-3/8) decreased significantly. However, there was no significant difference between the MSC-CM-HypHypHypHypHypHypHypHypHypA group and the DMEM-F12 group in the expression of apoptosis and apoptosis-related factors (P0.05. Elsa), there was no significant difference between the MSC-CM-HypHypHypHypA group and the DMEM-F12 group. The contents of vascular endothelial growth factor (VEGF), basic fibroblast growth factor (bFGF), insulin-like growth factor 1 (IGF-1) and interleukin-10 (IL-10) were significantly higher than those in MSC-CMN. Hypoxia induced bone marrow mesenchymal stem cell conditioned medium significantly increased cytokines content, significantly promoted the proliferation of radiation induced IEC-6 cells, and down-regulated the apoptotic signal, thus further promoting the repair of injured cells.
【作者單位】: 廣東省人民醫(yī)院消化內(nèi)科廣東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院;
【基金】:國家自然科學(xué)基金項目(81300279) 中國博士后科學(xué)基金項目(2012M521579) 廣東省自然科學(xué)基金項目(S2013040013549) 廣東省醫(yī)學(xué)科研基金項目(A2014020) 廣東省科技計劃項目(2015A020212029)~~
【分類號】:R818

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