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實(shí)驗(yàn)大鼠過(guò)敏性休克時(shí)IL-25、類(lèi)糜蛋白酶表達(dá)的研究

發(fā)布時(shí)間:2018-03-14 00:53

  本文選題:過(guò)敏性休克 切入點(diǎn):IgE 出處:《皖南醫(yī)學(xué)院》2017年碩士論文 論文類(lèi)型:學(xué)位論文


【摘要】:目的:研究大鼠過(guò)敏性休克時(shí)IL-25和肥大細(xì)胞類(lèi)糜蛋白酶表達(dá)的意義。方法:將清潔級(jí)(SD)雄性實(shí)驗(yàn)大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組,實(shí)驗(yàn)組分別于第1、5d腹腔注射雞卵蛋白,自首次給藥后第18d尾靜脈注射雞卵蛋白激發(fā)過(guò)敏性休克,正常對(duì)照組注射生理鹽水,造模完成后,實(shí)驗(yàn)組又分為實(shí)驗(yàn)對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)死亡組;實(shí)驗(yàn)對(duì)照組為激發(fā)過(guò)敏性休克未死亡的大鼠,實(shí)驗(yàn)死亡組為激發(fā)過(guò)敏性休克死亡的大鼠:分為死后常溫0h組、死后常溫12h組、死后冷藏12h、24h、48h、72h組(每組各6只)。最后在規(guī)定時(shí)間內(nèi)取心血,用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法(ELISA法)分別檢測(cè)血清中的IgE、IL-25和肥大細(xì)胞類(lèi)糜蛋白酶的含量;并且在相應(yīng)時(shí)間取出各組織(喉頭、氣管、肺、心、肝、腎及小腸組織),放于10%中性甲醛中固定48h后,脫水、浸蠟和包埋,制成蠟塊。再經(jīng)過(guò)切片,進(jìn)行HE染色,觀察各組織病理變化;并選取肺、心和小腸組織的切片,用免疫組織化學(xué)染色技術(shù)對(duì)目標(biāo)蛋白進(jìn)行染色,顯微鏡下觀察拍照IL-25和類(lèi)糜蛋白酶在各組的表達(dá)變化并采集圖片,再利用計(jì)算機(jī)圖像處理技術(shù)分析比較各組IL-25和類(lèi)糜蛋白酶的積分光密度(IOD)。分析完實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),探討在過(guò)敏性休克不同保存時(shí)間段兩個(gè)指標(biāo)與正常對(duì)照組變化情況,從而判斷這兩個(gè)指標(biāo)在過(guò)敏性休克方面的價(jià)值。結(jié)果:1)血清中指標(biāo)IgE、IL-25及類(lèi)糜蛋白酶的分析結(jié)果:(1)正常對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)對(duì)照組(過(guò)敏性休克未死亡組)、過(guò)敏性休克死亡常溫0h、常溫12h、冷藏12h、24h、48h、72h組的IgE含量進(jìn)行比較P0.01;IL-25及類(lèi)糜蛋白酶的含量分別用上面方法進(jìn)行比較,同樣得出P0.01。(2)實(shí)驗(yàn)對(duì)照組與過(guò)敏性休克死亡各組的IgE含量進(jìn)行比較P0.01;IL-25及類(lèi)糜蛋白酶的含量分別用上面方法進(jìn)行比較,同樣得出P0.01。(3)過(guò)敏性休克死亡常溫0h組與其他休克死亡各組的IgE含量比較P㧐0.05;IL-25及類(lèi)糜蛋白酶的含量分別用上面方法比較,同樣得出p㧐0.05;觀察數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn),血清中的ige含量在常溫0h組最大,其他組有所下降,血清中的il-25含量也是如此;血清中的類(lèi)糜蛋白酶含量在常溫12h組最大,其他組有所下降。2)指標(biāo)il-25:(1)在肺組織內(nèi),正常對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)對(duì)照組、過(guò)敏性休克死亡各組il-25的iod值進(jìn)行比較p0.05;實(shí)驗(yàn)對(duì)照組與過(guò)敏性休克死亡常溫0h組il-25的iod值進(jìn)行比較p0.05,與過(guò)敏性休克死亡常溫12h、冷藏12h、24h、48h、72h組il-25的iod值進(jìn)行比較p㧐0.05;過(guò)敏性休克死亡常溫0h組與休克死亡冷藏48h、72h組il-25的iod值進(jìn)行比較p0.05,與休克死亡常溫12h、冷藏12h、24h組il-25的iod值進(jìn)行比較p㧐0.05,且在休克死亡常溫0h時(shí)il-25的iod均值最大,其他組依次降低;(2)在心肌內(nèi),正常對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)對(duì)照組、過(guò)敏性休克死亡各組il-25的iod值進(jìn)行比較p0.05;實(shí)驗(yàn)對(duì)照組與過(guò)敏性休克死亡常溫0h、冷藏12h、24h、48h、72h組il-25的iod值進(jìn)行比較p0.05,與過(guò)敏性休克死亡常溫12h組il-25的iod值進(jìn)行比較p㧐0.05;過(guò)敏性休克死亡常溫0h組與其他休克死亡各組il-25的iod值進(jìn)行比較p㧐0.05,且在休克死亡常溫0h時(shí)il-25的iod均值最大,其他組有所降低,常溫12h時(shí)的下降幅度大于冷藏12h的;(3)在小腸組織內(nèi),正常對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)對(duì)照組、過(guò)敏性休克死亡各組il-25的iod值進(jìn)行比較p0.05;實(shí)驗(yàn)對(duì)照組與過(guò)敏性休克死亡各組il-25的iod值進(jìn)行比較p㧐0.05;過(guò)敏性休克死亡常溫0h組與其他休克死亡各組il-25的iod值進(jìn)行比較p㧐0.05,在休克死亡常溫0h時(shí)iod值最大,其他有所下降。3)類(lèi)糜蛋白酶指標(biāo):(1)在肺組織中,正常對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)對(duì)照組、過(guò)敏性休克死亡各組類(lèi)糜蛋白酶的iod值進(jìn)行比較p0.05;實(shí)驗(yàn)對(duì)照組與過(guò)敏性休克死亡常溫0h、冷藏12h、24h組類(lèi)糜蛋白酶的iod值進(jìn)行比較p0.05,與過(guò)敏性休克死亡常溫12h、冷藏48h、72h組類(lèi)糜蛋白酶的iod值進(jìn)行比較p㧐0.05;過(guò)敏性休克死亡常溫0h組與休克死亡常溫12h、冷藏48h、72h組類(lèi)糜蛋白酶的iod值進(jìn)行比較p0.05,與休克死亡冷藏12h、24h組類(lèi)糜蛋白酶的iod值進(jìn)行比較p㧐0.05,且在休克死亡常溫0h時(shí)類(lèi)糜蛋白酶的iod均值最大,其他組依次降低;(2)在心肌中,正常對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)對(duì)照組、過(guò)敏性休克死亡各組類(lèi)糜蛋白酶的iod值進(jìn)行比較p0.05;實(shí)驗(yàn)對(duì)照組與過(guò)敏性休克死亡各組類(lèi)糜蛋白酶的IOD值進(jìn)行比較P0.05;過(guò)敏性休克死亡常溫0h組與其他休克死亡各組的類(lèi)糜蛋白酶的IOD值進(jìn)行比較P㧐0.05,且在休克死亡常溫0h時(shí)類(lèi)糜蛋白酶的均值最大,其他組有所降低,常溫12h時(shí)的下降幅度大于冷藏12h的;(3)在小腸組織中,正常對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)對(duì)照組、過(guò)敏性休克死亡各組類(lèi)糜蛋白酶的IOD值進(jìn)行比較P0.05;實(shí)驗(yàn)對(duì)照組與過(guò)敏性休克死亡各組類(lèi)糜蛋白酶的IOD值進(jìn)行比較P0.05,過(guò)敏性休克死亡常溫0h組與其他休克死亡各組的類(lèi)糜蛋白酶的IOD值進(jìn)行比較P㧐0.05,在休克死亡常溫0h時(shí)IOD值最大,其他有所下降。結(jié)論:1)血清IgE在大鼠過(guò)敏性休克時(shí)表達(dá)顯著升高,證明造模成功;并且發(fā)現(xiàn)血清IgE水平與休克嚴(yán)重程度呈一定的正相關(guān)性。2)大鼠過(guò)敏性休克血清、肺、心肌和小腸組織中IL-25表達(dá)增加,隨著死后保存時(shí)間的延長(zhǎng),表達(dá)呈下降趨勢(shì);且血清中的IL-25高低與休克嚴(yán)重程度呈現(xiàn)一定的正相關(guān)。3)大鼠過(guò)敏性休克血清、肺、心肌及小腸組織中類(lèi)糜蛋白酶表達(dá)增加,隨著死后保存時(shí)間的延長(zhǎng),表達(dá)呈現(xiàn)下降趨勢(shì);并且在血清、心肌和小腸組織中,其水平與休克嚴(yán)重程度呈現(xiàn)一定的正相關(guān)性。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】:皖南醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類(lèi)號(hào)】:D919.4

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