常見嗜尸性蠅類蛹殼樣品在種屬分子鑒定中的應(yīng)用
發(fā)布時間:2018-03-04 10:04
本文選題:嗜尸性蠅類 切入點:蛹殼 出處:《中國寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志》2015年01期 論文類型:期刊論文
【摘要】:目的探討常見嗜尸性蠅類蛹殼樣品在法醫(yī)昆蟲學(xué)種屬鑒定中的應(yīng)用價值。方法收集不同保存時間的嗜尸性蠅類成蟲及其羽化后的蛹殼成套樣品共55套,根據(jù)形態(tài)學(xué)特征鑒定為2科6屬8種。以不同保存時間,將上述樣品分為2年組(n=23)、2~5年組(n=20)和5年組(n=12)。取單個成蠅胸部和空蛹殼,以十六烷基三甲基溴化銨(CTAB)法提取各樣品mt DNA,并測定其濃度和純度。PCR擴增COⅠ基因,獲得COⅠ基因序列Ⅰ和Ⅱ,分別截取498 bp和841 bp的序列。在Gen Bank數(shù)據(jù)庫對所獲序列作BLAST搜索,進行同源性比對分析。結(jié)果所有樣品均成功提取了mt DNA。保存時間≤5年的成蟲胸肌和2年的空蛹殼DNA濃度多在1.0~3.0μg/μl之間,A260/A280值多在1.6~1.8之間。保存時間5年的成蟲胸肌和≥2年的空蛹殼DNA濃度多低于1.0μg/μl,A260/A280值多低于1.6。隨著樣品保存時間的延長,各樣品DNA濃度均明顯下降(P0.01)。保存時間2年,成蟲胸部樣品和空蛹殼樣品均成功擴增出COⅠ序列Ⅰ和序列Ⅱ。隨著保存時間的延長,擴增成功率明顯下降,序列Ⅱ表現(xiàn)更為明顯(P0.01)。8種嗜尸性蠅類COⅠ基因序列Ⅰ和序列Ⅱ分別有6個和7個種屬的同源性比對結(jié)果完全正確且樣品序列比對的Max ident值均97%。結(jié)論嗜尸性蠅類空蛹殼樣品可作為mt DNA提取和種屬比對的檢材。
[Abstract]:Objective to investigate the application value of the pupae shell samples of common necrophilic flies in the identification of forensic entomological species. Methods 55 complete sets of adult and pupa shell samples were collected for different preservation times. According to the morphological characteristics, the samples were identified as 2 families, 6 genera and 8 species. The above samples were divided into 2 groups (2 years, 2 ~ 5 years) and 5 years, respectively. The single adult fly chest and empty pupa shell were obtained. Cetyltrimethylammonium bromide (CTAB) method was used to extract the mt DNA of each sample. The CO 鈪,
本文編號:1565178
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