單細(xì)胞凝膠電泳技術(shù)在運(yùn)動醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用
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單細(xì)胞凝膠電泳(single cell gel electrophoresis.SCGE)又稱彗星實(shí)驗(yàn)(comet assay),是近年來發(fā)展起來的一種在單細(xì)胞水平上檢測DNA損傷與修復(fù)的新技術(shù)。SCGE實(shí)驗(yàn)最初由Rydbery和Johanson(1978)提出.以后經(jīng)Ostling和Johanson(1984)及Singh(1988)等對實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行改良.使其具有簡便快速、靈敏性高、重復(fù)性好、無需放射性標(biāo)記等優(yōu)點(diǎn),目前已被廣泛應(yīng)用于臨床藥物篩選
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胚胎中腦神經(jīng)干細(xì)胞分化的研究 f1國康復(fù)醫(yī)學(xué)雜志,, J .中 2 0
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綜述
單細(xì)胞凝膠電泳技術(shù)在運(yùn)動醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用 劉曉莉蘇美華侯金蕓 單細(xì)胞凝膠電泳 (nl cl gleet p oei C E s g el e l r hrs,S G ) i e co s又稱彗星實(shí)驗(yàn) (o tasy,近年來發(fā)展起來的一種在單 cme sa)是 細(xì)胞水平上檢測 D A損傷與修復(fù)的新技術(shù)。C E實(shí)驗(yàn)最初 N SG 由 R d ey和 J h n o (9 8提出,以后經(jīng) Osl g和 y br o a sn 1 7 ) tn i
子誘發(fā)細(xì)胞 D A鏈斷裂時,正常的 D A超螺旋結(jié)構(gòu)變得 N N松弛,N D A環(huán)向外伸展,缺口暴露了負(fù)電荷, p> 3的鏈且 H 1
強(qiáng)堿性條件促使 D A變性和解螺旋。電泳時分子量較小、 N本身帶負(fù)電荷的 D A斷片離開主核向陽極遷移,經(jīng)熒光染料 N 染色后。光標(biāo)記的 D A形成彗星狀圖像中的彗尾,又名熒 N故
Jh no t18 ) Snh ̄9 8等對實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行改良 .其 o asn1 94及 i I18) ( g (使 具有簡便快速、敏性高、復(fù)性好、需放射性標(biāo)記等優(yōu)靈重?zé)o點(diǎn).目前已被廣泛應(yīng)用于臨床藥物篩選、腫瘤診斷與治療、衰老和細(xì)胞凋亡機(jī)制的探討以及遺傳毒理學(xué)和生物監(jiān)測等研究領(lǐng)域口 5隨著 S G -1。 C E技術(shù)的不斷成熟和完善,外一些學(xué)國者已將 S G C E技術(shù)運(yùn)用于運(yùn)動員的訓(xùn)練監(jiān)控和運(yùn)動性傷病的
彗星實(shí)驗(yàn)。細(xì)胞受損越嚴(yán)重,片越多, D A鏈缺口越多,斷含 N 則進(jìn)入尾部的 D A越多,現(xiàn)為尾長和尾部熒光強(qiáng)度增加。 N表
未損傷細(xì)胞在電泳中 D A仍停留于核中,成圓形熒光團(tuán), N形 而無彗星樣尾部。
早期診斷等方面,本文就 S G C E技術(shù)在運(yùn)動醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用做簡要綜述。
2 S CGE實(shí)驗(yàn)方法
SG C E實(shí)驗(yàn)主要是根據(jù) S g等的方法日不同實(shí)驗(yàn)室結(jié) ih n, 合各自不同的實(shí)驗(yàn)條件略加修改1 6 )常的實(shí)驗(yàn)步驟如下:。通
1 S CGE的檢測原理
21細(xì)胞準(zhǔn)備 .在體外實(shí)驗(yàn)中,將對數(shù)期生長的細(xì)胞用胰蛋白酶消化, 基金項(xiàng)目:家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(0 70 0;京市自然科
國 3 7 15 )北 學(xué)基金資助項(xiàng)目 ( 0 2 2 ) 57 0 4
SG C E是一種在單細(xì)胞水平上檢測真核細(xì)胞 D A單、 N雙鏈斷裂和堿性不穩(wěn)定位點(diǎn)的方法。該技術(shù)的原理是包埋于瓊 脂糖中的細(xì)胞在細(xì)胞裂解液的作用下,胞膜、膜及其他細(xì)核膜結(jié)構(gòu)被破壞 .基質(zhì)也被溶解、提,內(nèi)蛋白質(zhì)、 N核抽胞 R A及其他成分均可進(jìn)入凝膠而擴(kuò)散至裂解液中,而核 D A分子 N
1北京師范大學(xué)體育與運(yùn)動學(xué)院,京,0 8 5 北 10 7作者簡介:曉莉,,授,士劉女教博 收稿日期:0 7 1— 8 20—00
量很高,不能進(jìn)入凝膠,只能留于原位。當(dāng)各種 D A損傷因 N
本文關(guān)鍵詞:單細(xì)胞凝膠電泳技術(shù)在運(yùn)動醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
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