單細胞凝膠電泳技術在運動醫(yī)學中的應用
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單細胞凝膠電泳(single cell gel electrophoresis.SCGE)又稱彗星實驗(comet assay),是近年來發(fā)展起來的一種在單細胞水平上檢測DNA損傷與修復的新技術。SCGE實驗最初由Rydbery和Johanson(1978)提出.以后經Ostling和Johanson(1984)及Singh(1988)等對實驗條件進行改良.使其具有簡便快速、靈敏性高、重復性好、無需放射性標記等優(yōu)點,目前已被廣泛應用于臨床藥物篩選
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綜述
單細胞凝膠電泳技術在運動醫(yī)學中的應用 劉曉莉蘇美華侯金蕓 單細胞凝膠電泳 (nl cl gleet p oei C E s g el e l r hrs,S G ) i e co s又稱彗星實驗 (o tasy,近年來發(fā)展起來的一種在單 cme sa)是 細胞水平上檢測 D A損傷與修復的新技術。C E實驗最初 N SG 由 R d ey和 J h n o (9 8提出,以后經 Osl g和 y br o a sn 1 7 ) tn i
子誘發(fā)細胞 D A鏈斷裂時,正常的 D A超螺旋結構變得 N N松弛,N D A環(huán)向外伸展,缺口暴露了負電荷, p> 3的鏈且 H 1
強堿性條件促使 D A變性和解螺旋。電泳時分子量較小、 N本身帶負電荷的 D A斷片離開主核向陽極遷移,經熒光染料 N 染色后。光標記的 D A形成彗星狀圖像中的彗尾,又名熒 N故
Jh no t18 ) Snh ̄9 8等對實驗條件進行改良 .其 o asn1 94及 i I18) ( g (使 具有簡便快速、敏性高、復性好、需放射性標記等優(yōu)靈重無點.目前已被廣泛應用于臨床藥物篩選、腫瘤診斷與治療、衰老和細胞凋亡機制的探討以及遺傳毒理學和生物監(jiān)測等研究領域口 5隨著 S G -1。 C E技術的不斷成熟和完善,外一些學國者已將 S G C E技術運用于運動員的訓練監(jiān)控和運動性傷病的
彗星實驗。細胞受損越嚴重,片越多, D A鏈缺口越多,斷含 N 則進入尾部的 D A越多,現為尾長和尾部熒光強度增加。 N表
未損傷細胞在電泳中 D A仍停留于核中,成圓形熒光團, N形 而無彗星樣尾部。
早期診斷等方面,本文就 S G C E技術在運動醫(yī)學領域的應用做簡要綜述。
2 S CGE實驗方法
SG C E實驗主要是根據 S g等的方法日不同實驗室結 ih n, 合各自不同的實驗條件略加修改1 6 )常的實驗步驟如下:。通
1 S CGE的檢測原理
21細胞準備 .在體外實驗中,將對數期生長的細胞用胰蛋白酶消化, 基金項目:家自然科學基金資助項目(0 70 0;京市自然科
國 3 7 15 )北 學基金資助項目 ( 0 2 2 ) 57 0 4
SG C E是一種在單細胞水平上檢測真核細胞 D A單、 N雙鏈斷裂和堿性不穩(wěn)定位點的方法。該技術的原理是包埋于瓊 脂糖中的細胞在細胞裂解液的作用下,胞膜、膜及其他細核膜結構被破壞 .基質也被溶解、提,內蛋白質、 N核抽胞 R A及其他成分均可進入凝膠而擴散至裂解液中,而核 D A分子 N
1北京師范大學體育與運動學院,京,0 8 5 北 10 7作者簡介:曉莉,,授,士劉女教博 收稿日期:0 7 1— 8 20—00
量很高,不能進入凝膠,只能留于原位。當各種 D A損傷因 N
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